MM_FS_CNG_0520 食品添加剂抗坏血酸钠

MM_FS_CNG_0520食品添加剂 抗坏血酸钠

MM_FS_CNG_0520

食品添加剂抗坏血酸钠

1.适用范围

本方法适用于以抗坏血酸和钠盐为原料制得的抗坏血酸钠，在食品工业中作为营养强化剂、抗氧化剂。

2.化学名称、分子式、结构式、分子量

化学名称：抗坏血酸钠

sodium ascorbate

分子式：C₆H₇NaO₆

分子量：198.11（按1987年国际原子量计）

3.技术要求

3.1.性状

本品为白色至微黄色结晶固体，1g本品能溶于2mL水中。

3.2.项目与指标

表 1

4.试验方法

4.1.鉴别

4.1.1.原理

本品中的抗坏血酸部分具有二烯醇基结构，具有强的还原性，并且具有糖类的性质。

4.1.2.试剂

碱性酒石酸铜试液:

取硫酸铜结晶6.93g，加水使溶解成100mL；

取酒石酸钾钠结晶34.6g与氢氧化钠10g，加水使溶解成100mL；

用时将两液等量混合，即得；

亚甲基蓝试液:

0.5％（W／V）乙醇溶液；

稀盐酸:

取盐酸9mL，加水稀释至1000mL，即得；

乙酸氧铀锌试液:

取乙酸氧铀10g，加冰乙酸5mL与水50mL，微热使溶解，另取乙酸锌30g，加冰乙酸3mL与水30mL，微热使溶解，将两液混合，放冷，滤过，即得。

三氯乙酸试液:

取三氯乙酸6g，加三氯甲烷25mL溶解后，加30％过氧化氢溶液0.5mL，摇匀，即得。

4.1.3.鉴别方法

4.1.3.1.1∶50的该溶液在25℃下能还原碱性酒石酸铜试液，加热时更迅速。

4.1.3.2.用0.5mL 0.1mol／L的盐酸酸化2mL1∶50的样品溶液，加入4滴亚甲基蓝试液，40℃下温化，深蓝色3min内褪去。

4.1.3.3.用15mL1∶20的三氯乙酸溶液溶解15mg样品，加约200mg活性炭，猛烈振摇1min，用小的菊型滤纸过滤，必要时，再次过滤直至澄清，往5mL滤液中加一滴吡咯，缓慢搅拌至溶解，然后置50℃水浴上加热，产生蓝色。

4.1.3.4.呈现钠盐的特征反应按《中华人民共和国药典》1995年版（二部）附录14页。

4.2.含量测定

4.2.1.原理

样品与碘滴定溶液发生氧化还原反应，根据碘滴定液的颜色判断滴定终点。

4.2.2.试剂

碘；

碘标准滴定溶液：0.1mol／L碘标准滴定溶液；

稀硫酸：

取硫酸57mL，缓缓注入适量水中，冷却至室温，加水稀释至1000mL，摇匀；

淀粉指示液。

4.2.3.测定方法

精密称取用五氧化二磷干燥24h的本品约400mg，精确至0.0002g，用100mL新沸的冷蒸馏水和25mL稀硫酸试液的混合液溶解，立即用0.1mol／L碘液滴定，近终点时加3mL淀粉指示液至溶液显蓝色，在30s内不退（每1mL0.1mol／L的碘液相当于9.905mg的抗坏血酸钠）。

4.2.3.1.分析结果的表述

抗坏血酸钠含量X以质量百分数表示，按式（1）计算：

式中：V —— 样品消耗碘标准滴定溶液的体积，mL；

F —— 碘标准滴定溶液的浓度换算值，F＝滴定液的实测浓度（mol／L）；滴定液的规定浓度（mol／L）

m₁ —— 样品的质量，g；

0.009905 —— 与1.00mL碘标准滴定溶液[c（1／2I₂）＝0.1mol／L]相当的以克表示的抗坏血酸钠（C₆H₇NaO₆）的质量。

4.2.4.允许差

本方法两次平行测定结果相对偏差不超过0.3％。

4.3.砷盐的测定

4.3.1.试剂

盐酸。

砷标准溶液：此溶液1.0mL相当于1.0μg砷。

4.3.2.测定 砷斑法

4.3.2.1.原理概要

在碘化钾和氯化亚锡存在下，将样品液中的高价砷还原为三价砷，三价砷与锌粒和酸产生的新生态氢生成砷化氢气体，通过乙酸铅棉花除去硫化氢干扰，再与溴化汞试纸生成黄色至橙色的色斑，与标准砷斑比较作限量试验。

4.3.2.2.主要试剂与仪器

4.3.2.2.1.主要试剂

、硫酸、盐酸；

硫酸（1mol/l）溶液：量取28mL浓硫酸，慢慢加入水中，用水稀释到500mL；

氧化镁、三氯甲烷、吡啶、无砷金属锌；

20％氢氧化钠溶液；

15％镁溶液；

15％碘化钾溶液（临用前配制，贮于棕色瓶内）；

40％氯化亚锡溶液：称取20g氯化亚锡（SnCl₂·2H₂O），溶于50mL盐酸中；

乙酸铅棉花：将脱脂棉浸于10％乙酸铅溶液中，2h后取出晾干；

吸收液A：称取0.25g二乙氨基二硫代甲酸银，研碎后用适量三氯甲烷溶解，加入1.0mL三乙醇胺，再用三氯甲烷稀释至100mL。静置后过滤于棕色瓶中，贮存于冰箱内备用；

吸收液B：称取0.50g二乙氨基二硫代甲酸银，研碎后用吡啶溶解，并用吡啶稀释至100mL。静置后过滤于棕色瓶中，贮存于冰箱内备用。

1％酚酞乙醇溶液；

砷标准溶液：称取0.1320g于硫酸干燥器中干燥至恒重的三氧化二砷（As₂O₃）），溶于5mL20％氢氧化钠溶液中。溶解后，加入25ml 1mol/l硫酸，移入1L容量瓶中，加新煮沸冷却的水稀释至刻度。此溶液1.00mL相当于0.100mg砷。临用前取1.0mL，加1mL1mol／L硫酸于100mL容量瓶中，加新煮沸冷却的水稀释至刻度。此溶液1.0mL相当于1.0μg砷。

溴化汞试纸：将剪成直径2cm的圆形滤纸片，在5％溴化汞乙醇溶液中浸渍1h以上，保存于冰箱中，临用前取出置暗处阴干备用。

4.3.2.2.2.仪器

测砷装置：见图2

100ml锥形瓶；

橡皮塞：中间有一孔；

玻璃测砷管：全长18cm，上粗下细，自管口向下至14cm一段的内径约为6.5mm，自此以下逐渐狭细，末端内径约为（1～3）mm，近末端1cm处有一孔，直径2mm，狭细部分紧密插入橡皮塞中，使下部伸出至小孔恰在橡皮塞下面。上部较粗部分装入乙酸铅棉花，长（5～6）cm，上端至管口处至少3cm，测砷管顶端为圆形扁平的管口，上面磨平，下面两侧各有一钩，为固定玻璃帽用；

图 2

1—锥形瓶；2—橡皮塞；3—测砷管；

4—管口；5—玻璃帽

玻璃帽：下面磨平，上面有弯月形凹槽，有圆孔，直径6.5mm。使用时将玻璃帽盖在测砷管的管口，使圆孔互相吻合，中间夹一溴化汞试纸，用橡皮圈或其他适宜的方法将玻璃帽与测砷管固定。

4.3.2.3.过程简述

4.3.2.3.1.样品处理

湿法消解：取样品3g（精确至0.002g），置于250mL凯氏烧瓶或三角烧瓶中，加10mL浸润样品，放置片刻（或过夜）后，缓缓加热，待作用缓和后，稍冷，沿瓶壁加入5mL硫酸，再缓缓加热，至瓶中溶液开始变成棕色，不断滴加（如有必要可滴加些高氯酸，但须注意防止爆炸），至有机质分解完全，继续加热，生成大量的二氧化硫白色烟雾，最后溶液应无色或微带黄色。冷却后加20mL水煮沸，除去残余的至产生白烟为止。如此处理两次，放冷，将溶液移入50mL容量瓶中，用少量水洗涤凯氏烧瓶或三角烧瓶（2～3）次，将洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀，每10mL样品液相当于1.0g样品。

取相同量的，硫酸，按上述方法做试剂空白试验。

干灰化法：本法用于不适合于湿法消解的样品。

取样品3g（精确至0.002g），瓷坩埚中，加10mL 15％镁溶液，再于上面覆盖1g氧化镁粉末，混匀，浸泡4h，于低温或置水浴上蒸干，用小火加热至炭化完全，将坩埚移至高温炉中，在550℃以下灼烧至灰化完全，冷却后取出，加适量水湿润灰分，再缓缓加入盐酸（1＋1）溶液至酚酞红色褪去，然后将溶液移入50mL容量瓶中（必要时过滤），用少量水洗涤坩埚3次，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀。每10mL样品液相当于1.0g样品。

取相同量的氧化镁，镁，按上述方法做试剂空白试验。

4.3.2.3.2.测定

吸取一定量的样品液和砷的限量标准液（含砷1.0或2.0μg），分别置于锥形瓶中，加5mL盐酸（样品液中如含硫酸或盐酸，则要减去样品液中所含酸的毫升数），加水至30mL，再加5mL 15％碘化钾溶液，5滴40％氯化亚锡溶液，混匀，室温放置10min。

向上述锥形瓶中，各加入3g无砷金属锌，并立即塞上预先装有乙酸铅棉花及溴化汞试纸的测砷管，于25℃放置1h，取出砷斑进行比较，样品的砷斑不得深于砷的限量标准的砷斑。

若样品经处理，则砷的限量标准也须同法处理。

4.4.重金属测定

4.4.1.试剂

pH3.5的乙酸盐缓冲液；

硫代乙酰胺试液；

铅标准溶液。

4.4.2.测定方法

4.4.2.1.A管.吸取2.0mL铅标准溶液于50mL纳氏比色管中，加水至25mL，混匀，加入pH3.5的乙酸盐缓冲液2mL，混匀，备用。

4.4.2.2.B管.取一支与A管所配套的纳氏比色管，称取样品1.0g于纳氏比色管中，加水至25mL混匀，加入pH3.5的乙酸盐缓冲液2mL，混匀，备用。

4.4.2.3.向两管中加入2mL硫代乙酰胺试液，混匀，于暗处放置2min后，在白色背景下观察，自上而下，B管的色度不得深于A管的色度。

第一法

取25ml纳氏比色管两支，甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液(pH3.5)2m1后，加水或各药品项下规定的溶剂稀释成25m1，乙管中加人按各药品项下规定的方法制成的供试液25ml；若供试液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与乙管一致；再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2m1，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。

    如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使颜色一致时，可取该药品项下规定的二倍量的供试品和试液，加水或该药品项下规定的溶剂使成30ml，将溶液分成甲乙二等份，乙管中加水或该药品项下规定的溶剂稀释成25ml；甲管中加人硫代乙酰胺试液2m1，摇匀，放置2分钟，经滤膜(孔径3μm)滤过，然后甲管中加人标准铅溶液一定量，加水或该药品项下规定的溶剂使成25ml;再分别在乙管中加硫代乙酷胺试液2ml，甲管中加水2ml，照上述方法比较，即得。

    供试品如含高铁盐影响重金属检查时，可取该药品项下规定方法制成的供试溶液，加抗坏血酸0.5～1.0g，并在对照液中加人相同量的抗坏血酸，再照上述方法检查。

    配制供试品溶液时，如使用的盐酸超过1.0ml(或与盐酸1.0ml相当的稀盐酸)，氨试液超过2m1，或加入其他试剂进行处理者，除另有规定外，对照液中应取同样同量的试剂置瓷皿中蒸千后，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液一定量，再用水稀释成25ml。

    第二法

    取炽灼残渣项下遗留的残渣，加0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后(或取供试品一定量，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml，使恰湿润，用低温加热至硫酸除尽后，加0.5ml。蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，在500～600℃炽灼使完全灰化)，放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15m1，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml；另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水l5m1，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液一定量，再用水稀释成25ml；照上述第一法检查，即得。

4.5.铅的测定

4.5.1.试剂

柠檬酸氢二铵：50％溶液；

：10％溶液；

二苯基硫巴腙（双硫腙）；

铅标准溶液：

精密称取0.1598g高纯铅，加10mL1％，溶解后定量移入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液1mL相当于1mg铅，临用前用水稀释100倍，使成1mL相当于10μg铅；

1％：

取1mL，加水稀释至100mL。

4.5.2.测定方法

称取样品1g及铅的限量标准溶液2mL（相当于20μg铅），分别置于125mL分液漏斗中，各加入1％至20mL。

向样品液及铅的限量标准溶液中各加入1mL50％柠檬酸铵溶液、1mL20％盐酸羟胺溶液和2滴酚红指示液，用氨水（1＋1）调至红色，再各加2mL10％溶液，混匀后，加入5.0mL双硫腙使用液，剧烈振荡1min，静置分层后，进行目视比色，样品液三氯甲烷层的色度不得深于铅限量标准液三氯甲烷层的色度。

4.6.干燥失重

4.6.1.仪器

烘箱，灵敏度能控制在±2℃，装有温度计，温度计插入烘箱的深度应使水银球与待测试样在同一水平面上。

4.6.2.测定方法

称取样品约3g，置于与样品同样条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定，在105℃±1℃的条件下干燥至恒重，从减失的重量和样品重量计算干燥失重。

4.6.3.结果的表述

干燥失重X₂（以质量百分数表示）按式（2）计算：

式中：m₄ —— 样品的质量，g；

m₂ —— 称量瓶及样品在干燥前质量，g；

m₃ —— 称量瓶及样品在干燥后质量，g。

4.7.比旋度

4.7.1.仪器

旋光仪。

4.7.2.方法

取样品5g（精确至0.002g）加水至50mL，摇匀，装入旋光管，小心排出气泡，将盖旋紧后放入旋光仪内，在20±0.5℃的条件下，按说明书的规定进行操作并读取旋光度，准确至0.01°，左旋以负号表示，右旋以正号表示。

液体的比旋光度按下式计算：

           [α]=

溶液的比旋光度按下式计算：

[α]＝

式中：[α]——20℃时，用钠光谱D线波长测定时的比旋光度，（°）；

α——测得的旋光度，（°）；

l——旋光管的长度，dm；

ρ——液体在20℃时的密度，g/mL；

c——溶液中有效组分的浓度g/100mL。

4.8.pH

4.8.1.仪器

酸度计。

4.8.2.磷酸盐标准缓冲液（pH6.8）

4.8.3.邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液（pH4.0）

4.8.4.方法

取样品2g（精确至0.01g），加水至20mL使溶解。

水溶液的pH值应以玻璃电极为指示电极，用酸度剂进行测定。酸度计应定期检定，使精密度和准确度附和要求。

    4.8.4.1.仪器校正用的标准缓冲液

    应使用标准缓冲物质配制，配制方法如下。

    (1)草酸三氢钾标准缓冲液：精密称取在℃±3℃干燥 4～5小时的草酸三氢钾 [KH₃(C₂O₄)₂·2H₂O]12.61 g,加水使溶解并稀释至10Ooml。

（2）邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液：精密称取在1l5℃±5℃干燥2～3小时的邻苯二甲酸氢钾[KHC₈H₄O₄]10.12g，加水使溶液并稀释至1000ml。

（3）磷酸盐标准规缓冲液（PH6.8）：精密称取在1l5℃±5℃干燥2～3小时的无水磷酸氢二钠3.533g与磷酸二氢钾3.387g，加水使溶液溶解并稀释至1000ml。

   (4)磷酸盐标准缓冲液(pH7.4)：精密称取在1l5℃±5℃干燥2～3小时的无水磷酸氢二钠4.303g与磷酸二氢钾1.179g，加水使溶解并稀释至10OOml。

至

   (5)硼砂标准缓冲液：精密称取硼砂[Na₂B₄O₇·10H₂O]3.80g(汪意避免风化)，加水使溶解并稀释10OOml，置聚乙烯塑料瓶中，密塞，避免与空气中一氧化碳接触。

不同温度时标准缓冲液的pH值如下表