维普资讯 http://www.cqvip.com ２００２年９月 中成药 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｐａｔｅｎｔ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｓｅｐ．．２００２ ＶＯ１．２４ ＮＯ．９ 第２４卷第９期 愈痫灵颗粒剂中Ｓ种挥发油的提取及Ｉ３一环糊精包合物的制备研究 何 群， 王净净， 钟 艳， 顾 星， 李振光， 段祖珍 （湖南中医学院，湖南长沙４１０００７） 关键词：愈痫灵颗粒剂；挥发油；提取；包合 摘要：目的：为探讨愈痫灵颗粒剂３种挥发油的混合提取及包合最佳工艺路线。方法：采用正交设计实验，以挥发油重量 为评价提取工艺指标，以包合物收率、油转移率、油包合率为评价包合工艺指标。结果：提取最优工艺条件是：药材混合 加５倍量水，浸泡９０ｍｉｎ，加热至沸腾回流４ｈ；包合适宜用研磨法．较好的工艺条件是：ｐ．环糊精与挥发油按８：１投料，加 ２倍量水研磨３０ｍｉｎ。结论：按上述工艺条件提取、包合本制剂中这３种挥发油最为合理。 中图分类号：Ｒ９４４．２ ７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１—１５２８（２００２）０９—０６６０—０Ｓ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｒｅｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ａｎｄ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉ￣－ＣＹＤ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｃｏｒｎ－ ｐｏｕｎｄ ｏｆ Ｙｕｘｉａｎｌｉｎｇ Ｇｒａｎｕｌｅｓ ＨＥ Ｑｕｎ， ＷＡＮＧ Ｊｉｎｇ—ｊｉｎｇ， ＺＨＯＮＧ Ｙａｎ， ＧＵ Ｘｉｎｇ， Ｌｌ Ｚｈｅｎ－ｇｕａｎｇ，ＤＵＡＮ Ｚｕ—ｚｈｅｎ （Ｈｕｎａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＴＣＭ．Ｃｈａｎｇｓｈａ ４１０００７，Ｃｈｉｎａ） Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｙｕｘｉａｎｌｉｎｇ Ｇｒａｎｕｌｅｓ；ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｓｐｅｃｉｆｙ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｃｅｓｓ ｆｏｒ ｍｉｘｔｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｒｅｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ａｎｄ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ —ＣＹＤ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｏｆ Ｙｕｘｉａｎｌｉｎｇ Ｇｒａｎｕｌｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔａｋｉｎｇ ｗｅｉｇｈｔ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ｔＯ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ａｎｄ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄ，ｔｒａｎｓｆｅｒ ｒａｔｅ ｏｆ ｏｉｌ，ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｏｉｌ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ．Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉ— ｔｉｏｎ ｗａｓ ｔｏ ａｄｄ ｆｉｖｅ ｔｉｍｅｓ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｗａｔｅｒ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｍｉｘｔｕｒｅ ｏｆ ｃｒｕｄｅ ｄｒｕｇｓ，ｔｏ ｓｏａｋ ｆｏｒ ９０ ｍｉｎ，ｔＯ ｈｅａｔ ｕｐ ｔｏ ｂｏｉｌｉｎｇ ａｎｄ ｒｅｆｌｕｘ ４ｈ．Ｔｈｅ ｔｒｉｔｕｒａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄ， ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ —ＣＹＤ：Ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ｉｎ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ａｓ ８：１ ｗａｓ ｍｉｘｅｄ，ａｄｄｉｎｇ ｔｗｏ ｔｉｍｅｓ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｗａｔｅｒ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｍｉｘｔｕｒｅ ａｎｄ ｔｒｉｔｕｒａｔｉｏｎ ３０ ｍｉｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：Ａｂｏｖｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｃｅｓｓ ｗａｓ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｒａｔｉｏｎａｌ ｉｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｃＩ１】ｓｉｏｎ ０ｆ ｔｈｒｅｅ ｋｉｎｄｓ ０ｆ ｖＯｌａｔｉｌｅ Ｏｉｌ． 愈痫灵颗粒剂处方来源于本院著名神经内科专 家王净净教授创制的治疗癫痫的临床经验方，由川Ｉ 芎、牡丹皮、石菖蒲等十二味中药材组成。本方汤剂 经多年的临床疗效观察及动物实验研究…证明，具 有良好的定痫、止痉、醒神、开窍作用，能有效地治疗 １仪器、药材与试剂 ＭＡ１１０型电子分析天平（上海市第二天平仪器 厂）；挥发油提取器（药典规格，购于长沙市医疗器械 玻化公司）；ＺＫ．８２Ａ真空干燥箱（上海市实验仪器 总厂）；药材购于湖南中医学院专家门诊部，经周１３ 及预防癫痫大发作，且无明显的毒副作用，也未见有 不良反应 Ｊ。方中ＪＩＩ芎、牡丹皮、石菖蒲这３种药材 皆含有挥发油系抗癫痫有效成分，在提取工艺中采 用双提法将挥发油提取、分离，由于挥发油不稳定易 宝副教授鉴定符合《中国药典）２０００版一部规定，８一 环糊精（北京奥博星生物技术责任有限公司，生化试 剂）；乙醚等其它试剂皆为ＡＲ级。 ２方法与结果 氧化、聚合以至失效，所以将其制成包合物。本文对 挥发油的混合提取、分离、包合的工艺条件进行了研 究。 收稿日期：２００２—０２—１６ ２．１ 挥发油提取、分离基本方法 取川芎、牡丹皮、 石菖蒲三昧药材粉碎，过２号筛，加水浸泡，用挥发 油提取器连续回流提取数小时，提取液冷却后，用乙 作者简介：何６６０ 群（１９５８～），女，湖南长沙市人，副教授，主要研究方向：制剂工艺，质量及生物利用度。电话：０７３１．５３８１３６５ 维普资讯 http://www.cqvip.com ｅｅ成药 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｐａｔｅｎｔ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２００２年９月 Ｓｅｐ．，２００２ Ｖｏ１．２４ Ｎｏ．９ 第２４卷第９期 醚萃取３次，合并乙醚液，４０。ｃ以下回收乙醚至小 体积，加无水硫酸钠脱水，过滤，转移至称量瓶中．挥 干乙醚得纯挥发油，称重，密闭保存。 ２．２提取工艺正交设计实验方案及结果分析 根 据初步试验结果及文献报道｜３ ，对上述挥发油混合 提取工艺中影响较大的３种因素：浸泡时间，加水 量，回流时间进行考察研究，每个因素取３个水平， 见表１。用 （３ ）正交设计试验表安排试验，以挥 发油总重量为考察指标，结果见表２。将上述实验 结果进行方差分析见表３。 Ｔａｂｌｅ １ Ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｌｅｖｅｌ ｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ Ｔａｂｌｅ ２ Ｏｐｔｉｍａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔｓ ａｎａｌｙｓｉｓ ｔａｂｌｅ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｒｉａｎｃｅ ｔａｂｌｅ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ Ａｔｔｅｎｔｉｏｎ：Ｆｏ Ｉ（２．２） ９，Ｆ０２５（２，２） １９ 方差分析结果表明：影响最大的因素为：回流时 间，其次为浸泡时间，而加水量影响不显著，主次顺 序为Ｃ＞Ａ＞Ｂ。由此可见，Ａ取Ａ３，Ｂ取任意水平， ｃ取Ｃ３，故结合生产实际确定最优提取工艺条件为 药材浸泡９０ｍｉｎ，加５倍量水，加热回流提取４ｈ。 ２．３ ８一环糊精包合物制备研究Ｌ４ ２．３．１ 包合方法的选择：根据初步试验结果，本挥 发油包合采用研磨法优于饱和水溶液法，故采用研 磨法。具体操作步骤如下：称取一定量的８一环糊精， 加适量水研磨，再加入按比例称量好的挥发油（用无 水乙醚溶解）共同研磨数分钟，放置，待干后，加适量 石油醚、水分别洗涤、抽滤，得包合物，真空干燥，控 制温度在４０。Ｃ以下，２ｈ后确定是否达恒重，干燥至 恒重后称量。 ２．３．２包合物收率、油转移率、含油百分率的测定 方法： 包合物收率＝包合物重（ｇ）／［挥发油重（ｇ）＋８． 环糊精重（ｇ）］×１００％ 油转移率＝包合后提取的挥发油重（ｇ）／［挥发 油投入重（ｇ）］×１００％ 含油率＝包合后提取的挥发油重（ｇ）／［包合物 重（ｇ）］×１００％ 测定包合物中含挥发油重量按挥发油提取方法 及条件提取包合物内的挥发油至挥发油提取完全 （回流５ｈ），同法分离，称重。 ２．３．３正交设计试验优选８一环糊精包合物的制备 工艺：结合预实验及文献报道 ］，对影响包合较明 显的工艺条件：挥发油与８一环糊精的投料配比、加水 量、研磨时间３方面的因素进行考察，每种因素取３ 水平，见表４。采用 （３ ）正交试验表安排试验，以 包合物收率、含油率、油转移率为评价包合工艺指标 结果见表５。将上述实验结果进行方差分析见表６。 通过方差分析结果，得出Ａ３Ｂ１ ｃ３为最佳包合工 艺条件，即 ．环糊精：挥发油＝８：１，加２倍量水，研 磨３０ｍｉｎ。 Ｔａｂｌｅ ４ Ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｌｅｖｅｌ ｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ３小结与讨论 ３．１ 提取工艺评价指标原拟采用挥发油转移率，但 三味药材中川芎、牡丹皮的挥发油相对密度＜１，而 石菖蒲的挥发油相对密度＞１，在同时提取中可见一 部分挥发油浮在水上层，一部分沉在水层之下，所以 挥发油的定量只能采用称重法，对正交设计试验来 ６６１ 维普资讯 http://www.cqvip.com 中成药 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｐａｔｅｎｔ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｓｅｐ．，２００２ ＶＯ１．２４ ＮＯ．９ ２００２年９月 第２４卷第９期 说若药材同一批，粉碎程度一致，用挥发油总重量代 替挥发油转移率其结果相同，对优选提取工艺条件 Ｔａｂｌｅ ５ 没有任何影响。 Ｏｐｔｉｍａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔｓ ａｎａｌｙｓｉｓ ｔａｂｌｅ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ Ｔａｂｌｅ ６ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｒｉａｎｃｅ ｔａｂｌｅ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ 最为明显的因素是挥发油与Ｂ．环糊精配比，其次是 研磨时间，加水量影响较小，因素的主次顺序是Ａ＞ Ｃ＞Ｂ，所以Ａ取Ａ３，Ｂ取Ｂ ，Ｃ取 ，最为合理，虽 然从含油率来看Ａ取Ａ】为佳，但包合物收率及油 转移率皆表明Ａ取Ａ 为好，所以综合分析确定Ａ 取Ａ 。还需对挥发油与ｐ一环糊精的配比作进一步 深入的研究，这也是本实验不完善之处。 ３．４ 包合物干燥条件不一致，也是导致实验结果不 理想的原因之一。 参考文献 ［１］王净净，邓元江，顾星治痫灵对实验性癫痫大鼠的作用［Ｊ］ 湖南中医学院学报，１９９９，１９（４）：１２． ［２］ 王净净，李振光，邓元江，等．愈痫灵治疗癫痫的临床研究［Ｊ］ ３．２ 由包合实验结果可知，包合物收率及油转移率 都不高，估计实验用挥发油取量太少导致实验操作 过程中损失太多，误差大，再则器皿具大小不配套也 是原因之一。 中国医师杂志，２００１，３（１１）：８２１—８２３． ［３］王义红，钟颖，吴冬梅，等．川芎挥发油 环糊精包合制备工 艺的研究［Ｊ］．时珍国药研究，１９９７。８（３）：２２９． ［４］ 宋兴涛，颜秀涛，张群，等．肉桂油８一环糊精包合物的制备工 艺研究［Ｊ］．中草药，２０００，１１（３１）：８１８． ３．３包合实验及方差分析结果表明，影响包合工艺 ［５］龚慕辛，李敏．苍术挥发油８一环糊精包合物的制备研究［Ｊ］． 中成药，２０００，７（２２）：４６４—４６６． ６６２
