一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针[发明专利]

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 CN 107661569 A(43)申请公布日 2018.02.06

(21)申请号 201610599344.8(22)申请日 2016.07.27

(71)申请人 上海坤爱生物科技股份有限公司

地址 201318 上海市浦东新区周浦镇天雄

路588弄1_28号13幢205室

申请人 沈阳坤爱生物科技有限公司(72)发明人 任怀娟　赵鑫　王泽剑　齐念民　(74)专利代理机构 上海汉声知识产权代理有限

公司 31236

代理人 胡晶(51)Int.Cl.

A61M 37/00(2006.01)A61K 35/28(2015.01)A61K 35/30(2015.01)A61K 35/50(2015.01)

权利要求书1页 说明书6页 附图1页

A61P 17/18(2006.01)A61P 17/00(2006.01)A61K 8/99(2017.01)A61Q 19/08(2006.01)A61Q 19/02(2006.01)

()发明名称

一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针(57)摘要

本发明公开了一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，所述的干细胞处理物微针由金属材料制成的微针和干细胞处理物组成，所述的干细胞处理物为干细胞培养基，所述的干细胞为造血干细胞、骨髓干细胞、神经干细胞、羊膜干细胞、牙髓干细胞或宫膜干细胞。本发明的干细胞处理物微针，相比于静脉或肌肉注射，减少了使用者的疼痛，操作也更加简单、方便，且不会造成环境污染；同时相比现有技术使用的干细胞或干细胞提取物，成本低、操作简单，将培养过干细胞的培养基直接利用起来，避免了资源的浪费。

CN 107661569 ACN 107661569 A

权　利　要　求　书

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1.一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，其特征在于，所述的干细胞处理物微针由金属材料制成的微针和干细胞处理物组成，所述的干细胞处理物为干细胞培养基，所述的干细胞为造血干细胞、骨髓干细胞、神经干细胞、羊膜干细胞、牙髓干细胞或宫膜干细胞。

2.根据权利要求1所述的用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，其特征在于，所述的干细胞处理物为干细胞培养基的浓缩液或提取物。

3.根据权利要求1所述的用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，其特征在于，所述的微针为贴针、包衣微针或包裹药物的微针。

4.根据权利要求1所述的用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，其特征在于，所述的微针为表面光滑、表面有沟槽或表面有凹坑的小针点阵。

5.根据权利要求1所述的用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，其特征在于，所述的微针的金属材料为钛、铜、铝、铁、镍、钨、不锈钢、钛合金、铝合金、镍合金或铜合金的一种。

6.根据权利要求1所述的用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，其特征在于，所述的微针的表面覆盖有一层以上的薄膜，所述的薄膜为介质薄膜、金属薄膜或金属合金薄膜。

7.根据权利要求6所述的用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，其特征在于，所述的微针为空心微针或实心微针，所述的微针的针杆为圆柱体或圆锥体，所述的微针的长度为10-2000um，所述的微针的针尖曲率半径或等效曲率半径为lnm-800^im。

8.根据权利要求1所述的用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，其特征在于，所述的干细胞处理物的制备，包括以下步骤：

(1)干细胞分离与提取

从人体组织中分离得到所述的干细胞；(2)干细胞扩增

将分离得到的所述的干细胞在培养基中培养，37℃，5％CO2的条件下扩增，经处理得到所述的干细胞培养基。

9.根据权利要求8所述的用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，其特征在于，所述的步骤(1)干细胞分离用到的分离方法为离心法、胶原酶消化法、组织块法或免疫磁珠法。

10.根据权利要求8所述的用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，其特征在于，所述的步骤(2)干细胞扩增用到的培养基为DMEM、α-MEM或无血清培养基。

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说　明　书

一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针

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技术领域

[0001]本发明涉及干细胞微针领域，特别涉及一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，用于对皮肤的抗氧化和修护沉着于皮肤的黑色素。背景技术

[0002]1999年，《Science》将人类胚胎干细胞研究成果评为当年世界十大科技进展之首，2000年，《Time》周刊将其列为20世纪末世界十大科技成就之首，并认为胚胎干细胞和人类基因组将同时成为新世纪最具发展和应用前景的领域。至此干细胞研究成为近年来生物学以及医学领域中最引人注目的热点之一。干细胞(stem cells，SC)是一类具有自我复制能力(self-renewing)的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。干细胞(Stem Cell)是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，改变了人类疾病的应对方法，医学界将其称为“万用细胞”。[0003]干细胞研究对于美容保健和开发多种疾病新疗法，维护和促进人类健康具有巨大的应用前景，因此干细胞技术及其应用被认为是21世纪的人类健康工程。干细胞是一类特殊的细胞，其生物学特征是既具有自我更新的能力(self-renewal)，又具有多项分化潜能(multilineage differentiation)。已有研究表明：脂肪干细胞也具有抗氧化的作用。[0004]干细胞治疗，是通过静脉、肌内注射或其他方式，使自己或者他人的干细胞或由干细胞分化而来的成熟细胞到达某一组织，进行代替或修复损伤组织的治疗技术。[0005]在已有的干细胞治疗途径中，主要是通过静脉、肌肉注射的方式进行干细胞移植，但是，除了注射疼痛之外，注射过程还需要专业技术人员操作，且注射针具也会造成环境污染。此外，现有技术用于治疗或美容保健的成分，基本上使用的是培养后得到的干细胞或者是从干细胞中提取的有效物质，而忽视了在干细胞培养过程中，细胞生长繁殖时分泌物的疗效作用，即培养过干细胞的培养基本身、其浓缩液或提取物也可以用于疾病的治疗或美容保健。

发明内容

[0006]本发明提供一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，将培养干细胞过程中，得到的干细胞培养基本身、浓缩液或提取物制成微针，用于对皮肤的抗氧化和修护沉着于皮肤的黑色素。

[0007]本发明的技术方案如下：

[0008]一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，所述的干细胞处理物微针由金属材料制成的微针和干细胞处理物组成，所述的干细胞处理物为干细胞培养基，所述的干细胞为造血干细胞、骨髓干细胞、神经干细胞、羊膜干细胞、牙髓干细胞或宫膜干细胞。[0009]进一步的优选，所述的干细胞处理物为干细胞培养基的浓缩液或提取物。[0010]进一步的优选，所述的微针为贴针、包衣微针或包裹药物的微针。[0011]进一步的优选，所述的微针为表面光滑、表面有沟槽或表面有凹坑的小针点阵。

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说　明　书

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进一步的优选，所述的微针的金属材料为钛、铜、铝、铁、镍、钨、不锈钢、钛合金、铝

合金、镍合金或铜合金的一种。[0013]进一步的优选，所述的微针的表面覆盖有一层以上的薄膜，所述薄膜为介质薄膜、金属薄膜或金属合金薄膜。[0014]进一步的优选，所述的微针为空心微针或实心微针，所述的微针的针杆为圆柱体或圆锥体，所述的微针的长度为10-2000um，所述的微针的针尖曲率半径或等效曲率半径为lnm-800^im。

[0015]本发明还公开了所述的干细胞处理物的制备，包括以下步骤：[0016](1)干细胞分离与提取

[0017]从人体组织中分离得到所述的干细胞；[0018](2)干细胞扩增

[0019]将分离得到的所述的干细胞在培养基中培养，37℃，5％CO2的条件下扩增，经处理得到所述的干细胞培养基。[0020]进一步的优选，所述的步骤(1)干细胞分离用到的分离方法为离心法、胶原酶消化法、组织块法或免疫磁珠法。[0021]进一步的优选，所述的步骤(2)干细胞扩增用到的培养基为DMEM、α-MEM或无血清培养基。

[0022]与现有技术相比，本发明的有益效果如下：

[0023]第一.本发明的一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，将干细胞处理物制备成微针，相比于静脉或肌肉注射，减少了使用者使用时的疼痛，操作时也更加的简单和方便，无需专业技术人员即可完成使用，且不会造成环境污染；

[0024]第二.本发明的一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，将培养干细胞的过程中，得到的干细胞培养基本身、浓缩液或提取物制成微针，即利用干细胞生长繁殖时，在培养基分泌的有效成分，用于对皮肤的抗氧化和修护沉着于皮肤的黑色素，因此，本发明相对于现有技术利用干细胞或干细胞提取物治疗或美容保健，具有制备成本低、操作简单，将培养过干细胞的培养基直接利用起来，避免了资源的浪费。[0025]当然，实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。附图说明

[0026]图1为本发明的一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针的显微结构示意图。具体实施方式

[0027]下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应该理解，这些实施例仅用于说明本发明，而不用于限定本发明的保护范围。在实际应用中本领域技术人员根据本发明做出的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。

[0028]图1所示的是本发明的一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针的显微结构示意图，所述的干细胞处理物的制备，包括以下步骤：[0029](1)干细胞分离与提取[0030]从人体组织中通过离心、胶原酶消化、组织块法或免疫磁珠的方法分离得到所述

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的干细胞；

[0031](2)干细胞扩增

[0032]将分离得到的所述的干细胞在DMEM、α-MEM或无血清培养基中培养，37℃，5％CO2的条件下扩增，经处理得到所述的干细胞培养基或干细胞上清液。

[0033]为了能够说明本发明的一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针，具有对皮肤的抗氧化和修护沉着于皮肤的黑色素的作用。通常，当制备微针的干细胞处理物对皮肤具有抗氧化和修护沉着于皮肤的黑色素的作用时，用该干细胞处理物制备的微针也同样具备上述作用。因此，本发明通过将制得的干细胞处理物，包括干细胞培养基本身、浓缩液或提取物，应用于细胞培养来测定抗氧化作用，从而间接的表明干细胞处理物微针的疗效。本发明将干细胞处理物制成微针，用于皮肤的抗氧化，相比于传统的注射或涂抹方法，具有高效、作用时间长、缓释等优点。[0034]实施例1：脂肪干细胞培养基应用于细胞培养时具有抗氧化作用[0035]将制得回收后的脂肪干细胞培养基与新的完全培养基1:1混合，作为实验组用于小鼠黑色素瘤细胞(B16)细胞培养；同时设定使用新的完全培养基培养的B16细胞作为空白组。通过使用碧云天总抗氧化能力试剂盒测定两组B16细胞的总抗氧化能力，用于评价脂肪干细胞培养基能否提升B16细胞内抗氧化物质水平。[0036]群组统计资料

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样本检定

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从以上检定得到的数据可得出，实验组与对照组的数据方差相等，Sig＝0.006<

0.01，从而证明实验组与对照组相比，脂肪干细胞培养基可明显提升B16细胞内抗氧化物质水平。

[0041]实施例2：干细胞培养基经浓缩-冻干得到的蛋白质提取物用于细胞培养时具有抗氧化作用

[0042]对回收的干细胞培养基进行浓缩-冻干处理，获取干细胞培养基中的蛋白质。将获得的蛋白质提取物复溶于完全培养基，分别配制4mg/ml及2mg/ml两个浓度梯度为实验组，并设置未添加该蛋白质提取物的完全培养基为空白组。将以上三组培养基分别用于牙髓干细胞培养，使用碧云天总抗氧化能力试剂盒测定牙髓干细胞的总抗氧化能力，评价干细胞培养基的蛋白质提取物能否提升牙髓干细胞内抗氧化物质水平。[0043]群组统计资料

[0040]

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[0045][0046]

抗氧化能力

会显示同质子集中组群的平均值。

[0048]使用调和平均值样本大小＝4.000。[0049]统计结果表明，4mg/ml浓度的干细胞培养基蛋白质提取物依旧可以显著提升培养的牙髓干细胞内抗氧化能力，并进一步表面，经浓缩-冻干处理得到的干细胞蛋白质提取物可保留干细胞培养基中有效物质的活性。

[0050]本发明将培养过干细胞的培养基回收回来，使用干细胞培养基本身、使用干细胞培养基浓缩液或者提取干细胞培养基的有效成分，制备得到一种用于皮肤抗氧化的干细胞处理物微针；而干细胞可继续的置于另外一培养基继续培养或者将干细胞作为其他用途使用。因此，本发明相对于现有技术利用干细胞或干细胞提取物治疗或美容保健，具有成本低、操作简单，将培养过干细胞的培养基直接利用起来，避免了资源的浪费等优点。[0051]以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽

[0047]

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叙述所有的细节，也不该发明仅为所述的具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本发明的原理和实际应用，从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的。

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说　明　书　附　图

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图1

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