中外医学研究 ２０１２年３月 第１０卷第７期（总第１５９期） ≯ ≯叠≯０ ０≯ ≯ ∥叠 ≯ 曩移蠢曩薯曩≯≯≯ 罄 ≯≯曩 ≯ 誊务≯ ≯曩譬 急性白血病患者外周血中ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇ细胞的 表达及临床意义 唐瑛 崔为发 ， 刘永 刘慧荣 王占聚 王海英 孙嘉斌 潍坊医学院附属医院（山东 潍坊２６１０３１） 潍坊医学院 【摘要】 目的：探讨急性白血病患者治疗前后外周血ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞的变化及临床意义。方法：应用流式细胞技术 分别对４０名健康成人和９２例急性白血病初诊患者治疗前后外周血ＣＤ４ Ｆｏｘｐ３ 、ＣＤ４＋ＣＤ２５ 、ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞表达水 平进行检测。结果：ＣＤ４ Ｆｏｘｐ３ 、ＣＤ４＋ＣＤ２５ 、ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞在健康成人和急性白血病患者外周血中都有表达。急性 白血病初诊患者外周血中ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔｒｅｇ细胞的比例较对照组稍有增加，但差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；ＣＤ４ Ｆｏｘｐ３ 、ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ。＋Ｔｒｅｇ细胞的比例均明显高于对照组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．Ｏ１）。急性白血病两种亚型ＡＬＬ、ＡＮＬＬ间，以及ＡＮＬＬ中 的四种主要亚型（Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４、Ｍ５）患者外周血中表达均无明显的差异（Ｐ＞０．０５）。治疗后，患者外周血中ＣＤ４ ＣＤ２５ 、ＣＤ４ Ｆｏｘｐ３ 、 ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞比例明显高于治疗前和对照组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。结论：ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔｒｅｇｓ可能是急性白血 病患者免疫抑制并导致肿瘤免疫逃逸的一个重要原因之一。 【关键词】 白血病；急性；ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞是重要的调节性Ｔ细胞亚群之 ＰＥ—ＩｇＧｌ、ＰＥ—ＣＤＢ、ＰＥ—ＣＤ２５，异硫氰酸荧光素（ＦＩＴＣ）标记的 一，具有免疫性和免疫抑制性两大功能特征，可以降低机体 鼠抗人单克隆抗体ＦＩＴＣ—ＩｇＧ１、ＦＩＴＣ—ＣＩＭ，藻红蛋白（ＰＥ）标记 对肿瘤细胞的免疫监视。关于ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞的 的鼠抗人Ｆｏｘｐ３等均购白天津协科生物股份有限公司。 研究多集中在实体瘤，而血液病学的相关研究较少。本研究通过 １．２．２方法分别抽取健康成人和患者外周静脉血２ ｍｌ置于 研究急性白血病患者化疗前后外周血中ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ 含１０ ｍｌ ＥＤＴＡ抗凝管中，充分混匀后室温保存，２４ ｈ内用流式细 细胞的变化，探讨其在白血病发病、病情变化规律，为白血病的发 胞仪进行检测。 病机制研究及免疫治疗提供可靠依据。 １．３统计学处理试验数据应用ＳＰＳＳ ９．０统计软件进行分析， １资料与方法 计数资料用均数±标准差（ｘ ４－Ｓ）表示，采用ｔ检验，Ｐ＜０．０５为差 １．１一般资料对照组：２００９年４月一２０１０年４月健康成年人 异有统计学意义。 ４０人。试验组：初诊为急性白血病治疗后缓解的成年患者９２例。 ２结果 治疗方案：ＡＬ诱导缓解治疗分别为：ＡＭＬ（除初发Ｍ３）采用 ２．１ 对照组外周血中的表达 对照组健康成人外周血中有 ＤＡ／ＩＤＡ、ＭＡ或ＨＡ方案，初发Ｍ３采用全反式维甲酸诱导凋亡 ＣＤ４ ＣＤ２５ 、ＣＤ４ Ｆｏｘｐ３ 和ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ 三类Ｔｒｅｇ细 约第五天开始加ＤＮＲ治疗。ＡＬＬ采用ＶＣＤＰ方案。疗效标准： 胞，分别占ＣＤ４ 细胞总数的（１９．２３±５．８６）％、（５．７２±１．３３）％ 符合张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》（３版）之国内白血 和（０．９７±０．７２）％，见表１。 病诊疗标准及效果判断标准。 ２．。２急性白血病患者治疗前后外周血中的表达急性白血病初诊 １．２试验方法 患者外周血中ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔｒｅｇ细胞占ＣＤ４ Ｔｒｅｇ细胞总数的 １．２．１主要试剂及设备流式细胞仪（ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ）购自美国 （２ｎ ７６ ４－１．６４）％，较对照组稍有增加，但差异无统计学意义 ＢｅｅｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎ公司；藻红蛋白（ＰＥ）标记的鼠抗人单克隆抗体 （Ｐ＞０．０５）。ＣＤ４ Ｆｏｘｐ３ 、ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞的比例明显 高于对照组，差异有统计学意义（Ｐ均＜０．Ｏ１），见表１。治疗后， ＣＤ４ ＯＹ２５ 、ＣＤ４ Ｆｏｘｐ３ 、ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞均持续升 通讯作者：孙嘉斌 高，分别为（２３．０６ ４－１．７３）％、（２８．３６±１．７７）％和（１５．３６±２．１７）％，与 注射可立即聚合，降低溶解度，形成甘精胰岛素沉淀物，而吸收延 参考文献 迟，达到长效目的。 ［１］潘长玉，陆菊明，杨文英，等．随机、开放、低精蛋白锌胰岛素 本研究证实通过甘精胰岛素联合格列吡嗪对２型糖尿病患 注射液平行对照，联合控释格列吡嗪评价重组甘精胰岛素注 者进行治疗，控制血糖效果与诺和灵联合格列吡嗪无明显差异， 射液治疗１：２服降糖药控制不佳的２型糖尿病患者的有效性 但可有效提高血糖达标率及降低夜问低血糖事件发生率。 和安全性［Ｊ］．中国药物应用与监测，２００６，３（５）：１—７． 总之，应用甘精胰岛素联合格列吡嗪治疗２型糖尿病是安全 ［２］陈利强，王川．甘精胰岛素强化治疗２型糖尿病的研究［Ｊ］． 有效的，值得临床推广。 现代中西医结合杂志，２００５，１４（１１）：１４０７—１４０８． （收稿日期：２０１２—０１—３０） （编辑：陈春梅） Ｃｈｉｎｅｓｅ ａｎｄ Ｆｏｒｅｉｇｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｖｏ１．１０．Ｎｏ．７ Ｍａｒ．２０１２—１７— ． 历 彦 ０ １ ２ ３１ ５９孽誊０。｜誊。蛋 譬学 ≯－－碧 ≯ 中外医学研究 ０≯ 。 一一 ２年月 第１０卷第７期（总第 期）≯≯０ ＿≯ 聋 ０商垂曩毒簪譬疆０≯ ≯≯０≯对照组和治疗前相比，差异均有统计学意义（Ｐ均＜０．０１），见表１。 表１正常人、急性白血病患者治疗前后外周血中ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞的表达 ％ 与对照组相比， Ｐ＜０．０５，△Ｐ＜０．０１，与对照组、治疗前相比，＃Ｐ＜０．０１ ２．３在急性白血病的两种亚型ＡＮＬＬ、ＡＬＬ患者外周血中ＣＤ４ ＣＤ２５ 、ＣＩＭ Ｆｏｘｐ３ 和Ｃ１Ｍ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞均有表达， 但各自比例变化不大，差异无统计学意义（Ｐ均＞０．０５），见表２。 其中，ＡＮＬＬ中几种常见的亚型Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４、Ｍ５所表达的ＣＤ４ ＣＤ２５ 、ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ 和ＣＩＭ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞水平比较接 近，差异无统计学意义（Ｐ均＞０．０５），见表３。 表２ ＣＩＭ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ 在ＡＮＬＬ、ＡＬＬ中的表达 ％ ３讨论 常组和治疗前），提示，治疗过程中，抗白血病药物、免疫抑制剂和 激素等在抑制机体的免疫功能，诱导、杀伤白血病细胞，可能也直 接作用于淋巴细胞促进ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ 的表达；此外，治疗 药物还可能够通过促进体内ＩＬ一１０等细胞因子分泌增加，问接 促进ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ 的表达 。 总之，ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔｒｅｇｓ是急性白血病患者免疫抑制并导致 肿瘤免疫逃逸的一个重要原因之一 因此，进一步阐明ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔｒｅｇｓ的变化及抑制机体肿瘤免疫机制，可以为肿瘤免疫 ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔｒｅｇ细胞是一类具有免疫无反应性和免疫抑制 性的Ｔ细胞亚群，在诱导维持自身耐受、防止自身免疫疾病以及 加强对肿瘤的免疫应答都起重要作用。Ｆｏｘｐ３属于ｆｏｘｈｅａｄ家族 分叉头／翼状螺旋转录调节因子，是ＣＤ４ ＣＤ２５ 调节性Ｔ细胞 的一个特征性标志，是细胞获得免疫调节特性的关键转录因子， 其正常表达是ＣＤ４ ＣＤ２５ 调节性Ｔ细胞发挥作用的前提…。 研究表明：在正常的组织或外周血ＣＩＭ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３均有不同 程度的表达，但是在肺癌、卵巢癌、胃肠道肿瘤、乳腺癌等多种实 体瘤肿瘤患者的外周血和肿瘤局部组织细胞均明显升高 。Ｂｅ． ｙｅｒ等 研究发现慢淋及急性髓细胞白血病患者ＣＩＭ ＣＤ２５ Ｔｒｅｇｓ的比例较正常对照组明显增加，而且与患者的病程、疾病的 预后有明显的相关性，提示其参与了肿瘤免疫逃逸，促进机体免 疫抑制过程。 治疗开辟新的途径。 参考文献 ［１］Ｂｒｕｎｋｏｗ ＭＥ，Ｊｅｆｆｅｒｙ ＥＷ，ｎｊｉｒｒｉｌｄ ＫＡ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｆｏｒｋ—ｈｅａｄ／ｗｉｎｇｅｄ—ｈｅｌｉｘ ｐｒｏｔｅｉｎ，ｓｃｕｒｆｉｎ，ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｆａｔａｌ ｌｙｍ— ｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ｄｉｓｏｒｄｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｓｃｕｒｆｙ ｍｏｕｓｅ［Ｊ］．Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ， ２００１，２７（１）：６８—７３． 本研究通过对９２例急性白血病患者外周血进行检测并与对 照组进行比较，发现急性白血病患者外周血中ＣＩ）４ ＣＤ２５ 、 ＣＤ４ Ｆｏｘｐ３ 、ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞占ＣＩＭ 淋巴细胞总 ［２］Ｗｏｌｆ ＡＭ，Ｗｏｌｆ Ｄ，Ｓｔｅｕｒｅｒ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｃｒｅａｓｅ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ， ２００３，９（２）：６０６—６６１． 数均明显高于正常人，与以往报道一致 ，这说明急性白血病患 者的免疫细胞的活性被抑制，抗肿瘤免疫应答减弱，有利于肿瘤 的生长。研究首次发现ＣＩＭ ＣＤ２５ Ｖｏｘｐ３ Ｔｒｅｇ细胞在急性白 血病两种亚型ＡＮＬＬ和ＡＬＬ问以及ＡＮＬＬ的Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４、Ｍ５的 ［３］Ｂｅｙｅｒ Ｍ，Ｓｃｈｕｈｚｅ儿．Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｂｌｏｏｄ， ２００６，１０８（３）：８０４—８１１． ［４］Ｒｏｊａｓ ＪＭ，Ｗａｎｇ Ｌ，Ｏｗｅｎ Ｓ，ｅｌ ａ１．Ｎａｔｕｒａｌｌｙ ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ ＣＤ４ ＣＤ２５ ＦＯＸＰ３ Ｔ—ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｃｅｌｌｓ ａｒｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙ— 四种亚型患者外周血中的表达均无明显差，表明：在急性白血病 的发生、发展过程中，Ｔｒｅｇ细胞通过相同或相似的机制参与机体 免疫抑制过程。治疗后，急性白血病患者外周血中ＣＤ４ ＣＤ２５ 、 ｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｎｏｔ ｉｎ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ ｒｅｍｉｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｃａｎ ｂｅ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ【Ｊ］．Ｅｘｐ Ｈｅｍａｔｏｌ，２０１０，３８（１２）： １２０９—１２１８． ＣＤ４ Ｆｏｘｐ３ 、ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｆｏｘｐ３ 的比例持续升高（明显高于正 （收稿日期：２０１２—０１—２８）（编辑：陈春梅） １８——Ｃｈｉｎｅｓｅ ａｎｄ Ｆｏｍｉｇｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｖｏ１．１０，Ｎｏ．７ Ｍａｒ，２０１２
