细菌培养

来源：年旅网

1.倒板

LB固体培养基（胰蛋白胨1g、酵母提取物0.5g、NaCl 1g、琼脂粉1.5g、三蒸水100ml）高压灭菌后，待其冷却至60~70度（不烫手），按1：100加Amp，然后倒入细菌培养皿中（均匀，约皿的3/4厚），待其冷却后封口，在底部标记上周、Amp、操作者姓名、日期，放于4度保存。

LB液体培养基（胰蛋白胨1g、酵母提取物0.5g、NaCl 1g、三蒸水100ml）高压灭菌后，待其冷却后，放于4度保存备用。

2.划板：（全程均在超净台上操作）

（1）取1支含质粒的菌液，吸取20ul菌液（根据板子大小判断，不宜过多）均匀点滴在含有Amp的板子上，用涂布棒先轻后重推匀。

（2）操作完成后，将板子放于37度培养箱中，不封口正放2h后，倒置放16h。

（3）培养后观察，板子上呈现点状菌落即可。待其冷却后封口4℃保存。

3.摇菌

取一50ml的锥形瓶，加5~8mlLB液体培养基，再按1：100加入Amp，用头从板子上挑取一菌落于锥形瓶中，反复冲洗。37度，200r，培养14～16h（提前十五分钟预热摇床）。

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