治疗癌症的方法和组合疗法[发明专利]

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 CN 111712243 A(43)申请公布日 2020.09.25

(21)申请号 2018800102.1(22)申请日 2018.01.10(85)PCT国际申请进入国家阶段日

2020.08.11(86)PCT国际申请的申请数据

PCT/US2018/013211 2018.01.10(87)PCT国际申请的公布数据

WO2019/139581 EN 2019.07.18(71)申请人 ARRAY生物制药公司

地址 美国科罗拉多(72)发明人 P·A·李　D·钱特里　

S·L·温斯基　

(74)专利代理机构 中国贸促会专利商标事务所

有限公司 11038

代理人 李程达()发明名称

治疗癌症的方法和组合疗法(57)摘要

本发明涉及一种通过在一段时间内向有此

所述需要的患者施用治疗剂来治疗癌症的方法，

治疗剂基本上由MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂组成，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐。

(51)Int.Cl.

A61K 31/4184(2006.01)A61K 31/519(2006.01)

权利要求书2页 说明书57页 附图25页

CN 111712243 ACN 111712243 A

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1.一种用于治疗癌症的方法，所述方法基本上由在一段时间内向有此需要的患者施用治疗剂组成，所述治疗剂基本上由一定量的PD-1结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂组成，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗癌症。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述癌症是结直肠癌或胰腺癌。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述癌症是结直肠癌。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述癌症是转移性结直肠癌。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述结直肠癌是转移性微卫星稳定的结直肠癌。6.根据权利要求2所述的方法，其中所述癌症是胰腺癌。7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述PD-1结合拮抗剂是抗PD-1抗体。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗或其生物类似物。9.根据权利要求8所述的方法，其中在所述一段时间内每两周静脉内施用纳武单抗或其生物类似物。

10.根据权利要求9所述的方法，其中在所述一段时间内以约3mg/kg的剂量或以约240mg的固定剂量每两周静脉内施用纳武单抗或其生物类似物。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗或其生物类似物。12.根据权利要求11所述的方法，其中在所述一段时间内每三周静脉内施用派姆单抗或其生物类似物。

13.根据权利要求12所述的方法，其中在所述一段时间内以约2mg/kg的剂量或以约200mg的固定剂量静脉内施用派姆单抗或其生物类似物。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述MEK抑制剂为结晶的比美替尼。15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中在所述一段时间内以约30mg BID或约45mg BID的量口服施用比美替尼或其药学上可接受的盐。

16.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中在所述一段时间内以约30mg BID或约45mg BID的量口服施用比美替尼或其药学上可接受的盐，其中在至少一个28天的治疗周期中三周施用和一周不施用。

17.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中在所述一段时间之前，用基本上不由PD-1结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂组成的治疗剂治疗患者，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐。

18.根据权利要求1所述的方法，其中在所述一段时间内不向患者施用BRAF激酶抑制剂。

19.根据权利要求1所述的方法，其中在所述一段时间之前，用化学疗法治疗所述患者，所述化学疗法选自基于铂的化学疗法和含氟嘧啶的疗法中的一种或多种。

20.根据权利要求1-19中任一项所述的方法，其中所述方法还包括通过确定以下中的一种或多种来评估所述一段时间内的治疗功效：疾病进展的抑制、肿瘤生长的抑制、原发性肿瘤的减少、肿瘤相关症状的减轻、肿瘤分泌因子的抑制、原发性或继发性肿瘤的延迟出现、原发性或继发性肿瘤的减慢的发展、原发性或继发性肿瘤的降低的发生率、疾病的继发性效应的减慢或降低的严重程度、停滞的肿瘤生长和肿瘤的消退、增加的进展时间(TTP)、增加的无进展生存期(PFS)、增加的总生存期(OS)或增加的反应持续时间(DOR)。

21.一种组合治疗方法，所述方法基本上由在一段时间内向有此需要的患者施用治疗

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剂组成，所述治疗剂基本上由地或组合地治疗有效量的MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂组成，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐。

22.根据权利要求21所述的组合治疗方法，其中所述PD-1结合拮抗剂是抗PD-1抗体。23.根据权利要求22所述的组合治疗方法，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗或其生物类似物。

24.根据权利要求22所述的组合治疗方法，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗或其生物类似物。

25.根据权利要求21至24中任一项所述的组合治疗方法，其中所述MEK抑制剂在所述一段时间内作为片剂施用至患者。

26.根据权利要求25所述的组合治疗方法，其中所述片剂包含15mg的所述MEK抑制剂。27.根据权利要求21-26中任一项所述的组合治疗方法，其中所述抗PD-1抗体在所述一段时间内通过静脉内施用进行施用。

28.根据权利要求21至27中任一项所述的组合治疗方法，其中所述患者患有癌症。29.根据权利要求28所述的组合治疗方法，其中所述癌症是结直肠癌或胰腺癌。30.根据权利要求29所述的组合治疗方法，其中所述癌症是结直肠癌。31.根据权利要求30所述的组合治疗方法，其中所述癌症是转移性结直肠癌。32.根据权利要求31所述的组合治疗方法，其中所述结直肠癌是转移性微卫星稳定的结直肠癌。

33.根据权利要求29所述的组合治疗方法，其中所述癌症是胰腺癌。

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治疗癌症的方法和组合疗法

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技术领域

[0001]本发明涉及可用于治疗癌症的方法和组合疗法。特别地，本发明涉及通过施用基本上由MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂组成的组合疗法来治疗癌症的方法和组合疗法，所述MEK抑制剂为比美替尼(binimetinib)或其药学上可接受的盐。还描述了本发明的组合的药物用途。

背景技术

[0002]PD-L1在许多癌症中过表达，并且通常与预后不良有关(Okazaki T等人,Intern.Immun.2007 19(7):813)(Thompson RH等人,Cancer Res 2006,66(7):3381)。有趣的是，与正常组织和外周血中的T淋巴细胞相比，大多数肿瘤浸润T淋巴细胞主要表达PD-1。肿瘤反应性T细胞上的PD-1可能导致抗肿瘤免疫应答受损(Ahmadzadeh等人,Blood 2009 1 14(8):1537)。这可能是由于利用表达PD-L1的肿瘤细胞与表达PD-1的T细胞相互作用而介导的PD-L1信号传导，从而导致T细胞活化的减弱和免疫监视的逃避(Sharpe等人,Nat Rev 2002,Keir ME等人,2008Annu.Rev.Immunol.26:677)。因此，抑制PD-L1/PD-1相互作用可能增强CD8+T细胞介导的肿瘤杀伤。

[0003]已经提出通过PD-1直接配体(例如，PD-L1，PD-L2)抑制PD-1轴信号传导作为增强T细胞免疫以治疗癌症的手段(例如，肿瘤免疫)。此外，通过抑制PD-L1与结合伴侣B7-1的结合已经观察到对T细胞免疫的类似增强作用。其他有利的治疗性治疗方案可以将PD-1受体/配体相互作用的阻断与其他抗癌剂结合起来。仍然需要这种有利的疗法来治疗、稳定、预防和/或延迟各种癌症发展。[0004]近年来，美国食品药品监督管理局(FDA)批准了包括PD-1抗体纳武单抗(Opdivo)和派姆单抗(Keytruda)在内的几种PD-1拮抗剂用于治疗癌症。[0005]促原活化蛋白激酶激酶(也称为MAP2K，MEK或MAPKK)是一种磷酸化丝裂原激化蛋白激酶(MAPK)的激酶。MAPK信号传导通路在细胞增殖、存活、分化、运动和血管生成中起关键作用。已经鉴定出四种不同的MAPK信号传导级联，其中之一涉及细胞外信号调节激酶ERK1和ERK2及其上游分子MEK1和MEK2。(Akinleye,等人,Journal of Hematology&Oncology 2013 6:27)。MEK1和MEK2的抑制剂一直是抗肿瘤药物发现的焦点。[0006]MEK是多种受体酪氨酸激酶(RTK)(包括VEGF受体、CSF1R和TAM激酶Mer、AXL和Tyro3)的信号传导的关键下游效应物。抑制这些受体下游的MAPK信号传导可通过增强的运输(VEGF受体)、钝化M2巨噬细胞的免疫抑制活性(CSF1R)，并提高免疫系统识别和响应肿瘤微环境中的癌症相关抗原(TAM激酶)的能力来增加肿瘤中存在的CD8 T+细胞的数量。后者(被称为免疫原性细胞死亡)的作用是促进肿瘤微环境内CD8+效应T细胞和局部引流淋巴结内CD8+记忆T细胞的扩增，从而进一步增强抗肿瘤免疫应答(Ann.Rev.Immunol.(2013)19:598)。

[0007]仍然需要寻找有利的组合疗法来治疗癌症患者或特定癌症患者群体，并可能采用特定的给药方案，以与单药治疗或双药治疗相比改善临床抗肿瘤活性，并任选地改善组合

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安全性特征。

发明内容

[0008]在一个实施方案中，本文提供了一种组合治疗方法，该方法基本上由在一段时间内向有此需要的患者施用治疗剂组成，所述治疗剂基本上由地治疗有效量的MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂组成或由其组成，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐。[0009]在一个实施方案中，本文提供了一种用于治疗癌症的方法，该方法基本上由在一段时间内向有此需要的患者施用治疗剂组成，所述治疗剂基本上由一定量的PD-1结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂组成或由其组成，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗癌症。在一个实施方案中，比美替尼是结晶的比美替尼。[0010]在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间之前，用一种或多种治疗剂治疗患者，所述治疗剂基本上不由PD-1结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂组成，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐(例如，由PD-1结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂组成的治疗剂，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐)。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间之前，已经用基于铂的化学治疗剂治疗患者，并且任选地，先前已经确定患者对用基于铂的化学治疗剂的治疗无反应，并且任选地，先前已经确定对基于铂的化学治疗剂的治疗无反应。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间之前，已经用BRAF激酶抑制剂(例如，康奈非尼(encorafenib))治疗了患者，并且任选地，使用BRAF激酶抑制剂(例如，康奈非尼)的先前治疗是不成功的。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间之前，用MEK抑制剂(例如，比美替尼)作为单一疗法治疗患者，并且任选地，使用MEK抑制剂作为单一疗法的先前治疗是不成功的。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间之前，用PD-1结合拮抗剂(例如，纳武单抗或派姆单抗或其生物类似药)作为单一疗法治疗患者，并且任选地，使用PD-1结合拮抗剂(例如，纳武单抗或派姆单抗或其生物类似药)的先前治疗是不成功的。在任何所述实施方案中，在一段时间之前已经施用至患者的不成功的治疗可以包括但不限于其中患者先前治疗已失败或患者对这样的先前治疗是难治的和/或其中癌症已转移或复发的治疗。[0011]在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间之前，用化学疗法、靶向抗癌剂、放射疗法和手术中的一种或多种治疗患者，并且任选地，先前治疗是不成功的。在本文所述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间之前，用基于铂的化学疗法和含氟嘧啶的疗法或治疗剂中的一种或两种治疗患者。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间之前，用EGFR抑制剂和ALK抑制剂中的一种或两种治疗患者，并且任选地，先前治疗是不成功的。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间之前，用亚叶酸、氟尿嘧啶、奥沙利铂(oxaliplatin)和伊立替康(irinotecan)中的一种或多种治疗患者，并且任选地，先前治疗是不成功的。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间之前，用选自紫杉醇、吉西他滨(gemcitabine)、卡铂(carboplatin)、顺铂(cisplatin)和多柔比星(doxorubicin)的一种或多种治疗剂治疗患者，并且任选地，先前治疗是不成功的。[0012]在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间后，用基本上不由PD-1结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂组成的治疗剂治疗患者，所述MEK抑制剂是比美替尼或药学上可接受的其盐(例如由PD-1结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂组成的治疗剂，所述MEK抑

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制剂是比美替尼或其药学上可接受的盐)。[0013]在一些实施方案中，在一段时间内，PD-1结合拮抗剂的施用和比美替尼或其药学上可接受的盐的施用基本上同时发生。在一些实施方案中，在一段时间内，向患者施用PD-1结合拮抗剂在向患者施用比美替尼或其药学上可接受的盐之前进行。在一些实施方案中，在一段时间内，在向患者施用PD-1结合拮抗剂之前，向患者施用比美替尼或其药学上可接受的盐。

[0014]在一些实施方案中，在一段时间内，还对患者施用手术治疗(例如，实体瘤和/或淋巴结的切除)和/或不包括BRAF激酶抑制剂(例如，康奈非尼)的治疗。在一些实施方案中，在一段时间内，还向患者施用靶向的抗癌剂。在一些实施方案中，在一段时间内向患者施用放射疗法。在一些实施方案中，在一段时间内向患者施用一种或多种药物(例如，以下中的一种或多种：皮质类固醇、5-羟色胺拮抗剂、多巴胺拮抗剂、NK-1抑制剂、大麻素、抗焦虑药(例如，劳拉西泮(lorazepam)或地西泮(diazepam))、抗生素、抗真菌药、集落刺激因子、铁补充剂、Procrit、依泊汀α(epoetin alfa)、达贝泊汀α(darbepoetin alfa)、止吐药、利尿剂、NSAID、镇痛药、甲氨蝶呤、抗利尿剂、益生菌、血压药物、抗恶心药、泻药等)以改善治疗的副作用。

[0015]在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间内不向患者施用BRAF激酶抑制剂(例如，康奈非尼)。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间内不向患者施用另外的靶向抗癌剂。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间内不向受试者施用化学疗法。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间内不向受试者施用非MEK激酶靶向的抑制剂。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间内不向患者施用烷基化剂、蒽环类、细胞骨架破坏剂(例如紫杉烷)、埃博霉素(epothilone)、组蛋白脱乙酰基酶抑制剂、拓扑异构酶I抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂、核苷酸类似物、核苷酸前体类似物、肽抗生素、基于铂的药物、维甲酸类和长春花生物碱及其衍生物中的一种或多种。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间内不向患者施用c-MET抑制剂。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间内不向受试者施用CDK4/6抑制剂。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间内不向患者施用PI3K抑制剂。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间内不向受试者施用BRAF抑制剂(例如，康奈非尼)。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间内不向患者施用FGFR抑制剂。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间内不向患者施用BCR-ABL抑制剂。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，不向患者施用与在一段时间内施用的PD-1结合拮抗剂不同的PD-1结合拮抗剂。在本文描述的任何方法的一些实施方案中，不向患者施用与在一段时间内施用的MEK抑制剂不同的MEK抑制剂。在一些实施方案中，在一段时间内不向患者施用RAS抑制剂。在一些实施方案中，在一段时间内不向患者施用CSR-1R抑制剂。

[0016]在一些实施方案中，在一段时间内，“基本上由...组成”可以包括除BRAF激酶抑制剂以外的任何疗法。在一些实施方案中，在一段时间内，“基本上由...组成”包括化学疗法。在一些实施方案中，在一段时间内，“基本上由...组成”可包括选自以下的一种或多种类型的化学治疗剂：烷基化剂、蒽环类、细胞骨架破坏剂(例如紫杉烷)、埃坡霉素、组蛋白脱乙酰基酶抑制剂、拓扑异构酶I抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂、核苷酸类似物、核苷酸前体类似

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物、肽抗生素、基于铂的药物、维甲酸类和长春花生物碱及其衍生物。在一些实施方案中，在一段时间内，“基本上由...组成”可包括使用任何靶向化学治疗剂(例如，除BRAF激酶抑制剂以外的靶向化学治疗剂)的治疗。在一些实施方案中，在一段时间内，“基本上由...组成”可以包括手术治疗和/或化学疗法。在一段时间内，“基本上由...组成”可包括使用除了以下中的一种或多种以外的任何靶向化学治疗剂的治疗：c-MET抑制剂、CDK4/6抑制剂、PI3K抑制剂、BRAF抑制剂、FGFR抑制剂、MEK抑制剂和BCR-ABL抑制剂。在一些实施方案中，在一段时间内，“基本上由...组成”可以包括放射疗法。在一个实施方案中，PD-1结合拮抗剂是抗PD-1抗体。在一个实施方案中，PD-1结合拮抗剂是抗PD-1抗体，其选自纳武单抗、派姆单抗、纳武单抗的生物类似物和派姆单抗的生物类似物。[0017]在另一个实施方案中，本发明提供了一种用于治疗癌症的方法，该方法包括在一段时间内向有此需要的患者施用治疗剂或基本上由其组成，该治疗剂基本上由一定量的PD-1结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂组成或由其组成，所述PD-1结合拮抗剂是纳武单抗或其生物类似物，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗癌症(例如，在一段时间内)。在一个实施方案中，比美替尼是结晶的比美替尼。[0018]在另一个实施方案中，本发明提供了一种用于治疗癌症的方法，该方法包括在一段时间内向有此需要的患者施用治疗剂或基本上由其组成，该治疗剂基本上由一定量的PD-1结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂组成或由其组成，所述PD-1结合拮抗剂是派姆单抗或其生物类似物，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗癌症(例如，在一段时间内)。在一个实施方案中，比美替尼是结晶的比美替尼。[0019]在另一个实施方案中，本发明提供了一种用于治疗癌症的方法，该方法包括在一段时间内向有此需要的患者施用治疗剂或基本上由其组成，该治疗剂基本上由一定量的PD-1结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂组成或由其组成，所述PD-1结合拮抗剂是纳武单抗或其生物类似物，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗癌症(例如，在一段时间内)。在一个实施方案中，比美替尼是结晶的比美替尼。[0020]在另一个实施方案中，本发明提供了一种用于治疗癌症的方法，该方法包括在一段时间内向有此需要的患者施用治疗剂或基本上由其组成，该治疗剂基本上由一定量的PD-1结合拮抗剂和一定量的MEK抑制剂组成或由其组成，所述PD-1结合拮抗剂是派姆单抗或其生物类似物，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗癌症(例如，在一段时间内)。在一个实施方案中，比美替尼是结晶的比美替尼。附图说明

[0021]图1是用各种浓度的IFNγ(0.01ng/mL-1000ng/mL)处理72小时后，A375细胞中IFNγ诱导的I类MHC表达的代表性图。

[0022]图2是用各种浓度的IFNγ(0.01ng/mL-1000ng/mL)处理72小时后，SKMEL-2细胞中IFNγ诱导的I类MHC表达的代表性图。

[0023]图3A是用900nM比美替尼或900nM维莫非尼(vemurafenib)处理后在A375细胞中诱导的I类MHC表达的代表性图。

[0024]图3B是用900nM比美替尼处理72小时后，A375细胞中细胞表面I类MHC表达的FACS图。

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图4A是在存在100ng/mL IFNγ的情况下用900nM比美替尼或900nM维莫非尼处理

后在A375细胞中诱导的I类MHC表达的代表性图。[0026]图4B是在存在100ng/mL IFNγ的情况下用900nM比美替尼处理72小时后，A375细胞中细胞表面I类MHC表达的FACS图。[0027]图5A是用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后MELJUSO(NRAS Q61L)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。稳态Cmax＝1μM(26nM游离部分)；低谷*第15天)＝310nM(8.1nM游离部分)。[0028]图5B是在存在100ng/mL IFNγ的情况下用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后MELJUSO(NRAS Q61L)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。

[0029]图6A是用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后IPC298(NRAS Q61L)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。稳态Cmax＝1μM(26nM游离部分)；低谷*第15天)＝310nM(8.1nM游离部分)。[0030]图6B是在存在100ng/mL IFNγ的情况下用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后IPC298(NRAS Q61L)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。

[0031]图7A是用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后A375(BRAF V600E)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。稳态Cmax＝1μM(26nM游离部分)；低谷*第15天)＝310nM(8.1nM游离部分)。[0032]图7B是在存在100ng/mL IFNγ的情况下用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后A375(BRAF V600E)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。

[0033]图8A是用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后HS936.T(NRAS Q61K,BRAF N581K)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。稳态Cmax＝1μM(26nM游离部分)；低谷*第15天)＝310nM(8.1nM游离部分)。[0034]图8B是在存在100ng/mL IFNγ的情况下用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后HS936.T(NRAS Q61K,BRAF N581K)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。[0035]图9A是用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后MM485(NRAS Q61R)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。稳态Cmax＝1μM(26nM游离部分)；低谷*第15天)＝310nM(8.1nM游离部分)。[0036]图9B是在存在100ng/mL IFNγ的情况下用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后MM485(NRAS Q61R)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。

[0037]图10A是用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后SKMEL-2(NRAS Q61R)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。稳态Cmax＝1μM(26nM游离部分)；低谷*第15天)＝310nM(8.1nM游离部分)。[0038]图10B是在存在100ng/mL IFNγ的情况下用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后SKMEL-2(NRAS Q61R)细胞中诱导的I类MHC

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表达的代表性柱状图。

[0039]图11A是用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后MM415(NRAS Q61L)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。稳态Cmax＝1μM(26nM游离部分)；低谷*第15天)＝310nM(8.1nM游离部分)。[0040]图11B是在存在100ng/mL IFNγ的情况下用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后MM415(NRAS Q61L)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。

[0041]图12A是用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后Malme-3M(BRAF V600E)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。稳态Cmax＝1μM(26nM游离部分)；低谷*第15天)＝310nM(8.1nM游离部分)。[0042]图12B是在存在100ng/mL IFNγ的情况下用比美替尼(0.7nM，2.2nM，7.3nM，24nM，81nM，271nM，902nM，3,003nM或10,000nM)处理后Malme-3M(BRAF V600E)细胞中诱导的I类MHC表达的代表性柱状图。

[0043]图13A是显示在用比美替尼(30mg/kg)、抗PD-1(100μg)处理、比美替尼和抗PD-1的同时处理或抗PD-1和随后比美替尼的顺序处理后BALB/c小鼠中结直肠癌CT26肿瘤生长的图(n＝10)。

[0044]图13B是图13A中小鼠的Kaplan-Meier存活曲线。

[0045]图13C是显示在抗PD-1抗体和随后MEK162(当肿瘤变得对抗PD-1具有抗性)的顺序施用后图13A中的个体小鼠的肿瘤生长的图。[0046]图14A是代表性的FACS图，其显示了4T1肿瘤、B16F10肿瘤、P815肿瘤、CT26肿瘤、EMT6肿瘤、LLC1肿瘤和RENCA肿瘤的CD45+CD3+细胞中活CD4+和CD8+细胞的百分比。[0047]图14B是显示图14A的肿瘤的CD4+CD3+细胞的百分比的图。[0048]图14C是显示图14A的肿瘤的CD8+CD3+细胞的百分比的图。[0049]图14D是显示图14A的肿瘤的CD11b+/hi细胞的百分比的图。[0050]图14E是显示图14A的肿瘤的树突细胞(DC；CD11c+MHC-II+)的百分比的图。[0051]图14F是显示图14A的肿瘤的巨噬细胞(F4/80+CD11b+)的百分比的图。[0052]图14G是显示图14A的肿瘤的单核细胞髓样来源的抑制细胞(mMDSC；Ly6Chi Ly6G-)的百分比的图。

[0053]图14H是显示图14A的肿瘤的粒细胞性髓样来源的抑制细胞(gMDSC；Ly6CloLy6G+)的百分比的图。

[00]图15是显示治疗(比美替尼，抗PD-1，同时组合疗法或顺序组合疗法)后CT26肿瘤内的T细胞克隆性和T细胞分数的柱状图。

[0055]图16A是显示在用比美替尼(30mg/kg)处理、抗PD-1(100μg)处理、比美替尼和抗PD-1的同时处理或比美替尼和抗PD-1的顺序处理后C57BL/6小鼠中黑色素瘤B16F10肿瘤生长的图(n＝10)。

[0056]图16B是图16A中小鼠的Kaplan-Meier存活曲线。[0057]图17A是显示在用比美替尼(30mg/kg)处理、抗PD-1(100μg)处理、比美替尼和抗PD-1的同时处理或比美替尼和抗PD-1的顺序处理后DBA/2小鼠中Cloudman S91黑色素瘤肿瘤生长的图(n＝10)。

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图17B是图17A中小鼠的Kaplan-Meier存活曲线。

[0059]图18A是显示在用比美替尼(30mg/kg)处理、抗PD-1(200μg)处理、比美替尼和抗PD-1的连续处理或比美替尼和抗PD-1的间歇性处理后退休的BALB/c小鼠(23周龄)中肾癌RENCA肿瘤生长的图(n＝12)。

[0060]图18B是图18A中小鼠的Kaplan-Meier存活曲线。[0061]发明详述

[0062]本文发现了包括使用MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂的组合疗法以在患有癌症(例如，表达增加水平的PD-1并且任选地还具有异常的MAPK途径信号传导(例如与对照非癌细胞相比)的癌症)的哺乳动物中提供改善的抗肿瘤免疫应答抑制和总体上改善的抗肿瘤免疫应答。

[0063]通过参考以下对本发明优选实施方案的详细描述和本文包括的实施例，可以更容易地理解本发明。应当理解，本文所使用的术语仅出于描述特定实施方案的目的，并不旨在进行。还应理解的是，除非本文特别定义，否则本文所使用的术语应被赋予其在相关领域中已知的传统含义。[00]一般定义

[0065]为了使本发明更容易被理解，下面具体定义了某些技术和科学术语。除非在本文的其他地方特别定义，否则本文中使用的所有其他技术和科学术语具有本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义。

[0066]当用于修饰数字定义的参数(例如，MEK抑制剂或PD-1结合拮抗剂的剂量，或本文所述的组合疗法的治疗时间长短)时，“约”表示该参数可以在该参数的所述数值以上或以下多至10％上变化。例如，约5mg/kg的剂量可以在4.5mg/kg和5.5mg/kg之间变化。当在参数列表的开头使用时，“约”是指修饰每个参数。例如，约0.5mg、0.75mg或1.0mg是指约0.5mg、约0.75mg或约1.0mg。同样的，约5％或更多、10％或更多、15％或更多、20％或更多以及25％或更多是指约5％或更多、约10％或更多、约15％或更多、约20％或更多和约25％或更多。[0067]短语“在一段时间之前”或“在一段时间前”是指(1)在一段时间内第一次施用治疗剂之前完成对受试者的手术和/或放射治疗的施用和/或(2)在一段时间内第一次施用本文所述的组合疗法中的治疗剂之前，向受试者施用一种或多种治疗剂，使得所述一种或多种治疗剂在于一段时间内执行组合疗法中的治疗剂的第一次施用时以亚治疗和/或不可检测的水平存在于受试者中。在一些实施方案中，短语“在一段时间之前”或“在一段时间前”是指在一段时间内第一次施用组合疗法中的治疗剂之前，向受试者施用一种或多种治疗剂，使得所述一种或多种治疗剂在于一段时间内执行组合疗法中的治疗剂的第一次施用时以亚治疗水平存在于受试者中。在一些实施方案中，短语“在一段时间之前”或“在一段时间前”是指在一段时间内第一次施用组合疗法中的治疗剂之前，向受试者施用一种或多种治疗剂，使得所述一种或多种治疗剂在于一段时间内执行组合疗法中的治疗剂的第一次施用时以不可检测的水平存在于受试者中。在一些实施方案中，短语“在一段时间之前”或“在一段时间前”是指在一段时间内第一次施用组合疗法中的治疗剂之前，向受试者施用一种或多种治疗剂，使得所述一种或多种治疗剂在于一段时间内执行组合疗法中的治疗剂的第一次施用时以亚治疗和/或不可检测的水平存在于受试者中。[0068]短语“药学上可接受的”表示物质或组合物必须与包含制剂的其他组分和/或用其

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治疗的哺乳动物在化学和/或毒理学上相容。一些实施方案涉及本文所述化合物的药学上可接受的盐。术语“药学上可接受的盐”是指化合物的制剂，其不会引起对其施用至的生物体的明显刺激并且不会消除该化合物的生物学活性和特性。在某些情况下，药学上可接受的盐是通过使本文所述的化合物与酸(例如，盐酸、氢溴酸、硫酸、、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸，水杨酸等)反应来获得的。在一些情况下，通过使本文所述的具有酸性基团的化合物与碱反应以形成盐(例如，铵盐、碱金属盐(例如，钠盐或钾盐)、碱土金属盐(例如，钙盐或镁盐)、有机碱(例如，二环己胺、N-甲基-D-葡萄糖胺、三(羟甲基)甲胺)的盐以及含有氨基酸(例如，精氨酸、赖氨酸等)的盐)或通过先前确定的其他方法获得药学上可接受的盐。

[0069]当应用于患者、个体、动物、人、实验受试者、细胞、组织、器官或生物流体时，“施用”、“给药”、“治疗”和“处理”是指外源性药剂、治疗剂、诊断剂或组合物与动物、人、受试者、细胞、组织、器官或生物流体的接触。细胞的处理包括试剂与细胞的接触以及试剂与流体的接触，其中所述流体与所述细胞接触。“施用”和“处理”还指例如通过试剂、诊断剂、结合化合物或另一细胞对细胞进行的体外和离体处理。[0070]在临床环境中使用的“治疗”和“处理”旨在获得有益或期望的临床结果。为了本发明的目的，有益的或期望的临床结果包括但不限于以下一项或多项：减少赘生性或癌细胞的增殖(或破坏赘生性或癌细胞)，抑制赘生性细胞的转移，缩小或减小肿瘤大小，疾病(例如，癌症)的缓解，减轻疾病(例如，癌症)导致的症状，提高罹患疾病(例如，癌症)的患者的生活质量(例如，使用FACT-G或EORTC-QLQC30评估)，减少治疗疾病(例如，癌症)所需的其他药物的剂量，延缓疾病(例如，癌症)的进展，和/或延长患有疾病(例如，癌症)的患者的生存期。例如，治疗可以是减少病症(例如，癌症)的一种或几种症状。在本发明的含义内，术语“治疗”还表示阻止、延迟发作(即疾病的临床表现之前的时期)和/或降低发展或恶化疾病的风险。“治疗”还可以意指与如果未接受治疗所预期的生存期相比延长生存期，例如，与未接受本文所述的治疗的受试者相比总生存期(OS)增加和/或与未接受本文所述的治疗的受试者相比无进展生存期(PFS)增加。术语“治疗”还可以意指患有癌症的受试者的病况的改善，例如，受试者中一个或多个肿瘤的尺寸减小一次或多次，受试者中一个或多个肿瘤的生长速率降低或无实质性改变，受试者中转移减少和受试者的缓解期增加(例如，与未接受治疗或接受了不同的治疗的患有类似癌症的受试者中一种或多种度量相比，或者与治疗前同一受试者中的一种或多种度量相比)。下面公开了本文中用于评估患有癌症的受试者对治疗的反应的其他度量。[0071]术语“受试者”包括任何生物体，优选动物，更优选哺乳动物(例如，大鼠、小鼠、狗、猫和兔子)以及最优选人。

[0072]根据本发明的待治疗的“患者”包括任何温血动物，例如但不限于人，猴子或其他低阶灵长类动物，马，狗，兔，豚鼠或小鼠。在一个实施方案中，患者是人。在一个实施方案中，患者是儿科患者。医学领域的技术人员能够容易地鉴定罹患癌症并且需要治疗的个体。[0073]如本文所使用的术语“儿科患者”是指在诊断或治疗时未满16岁的患者。术语“儿科”可以进一步分为各种亚群，包括：新生儿(从出生到生命的第一个月)；婴儿(1个月至2岁)；儿童(2岁至12岁)；和青少年(12岁至21岁(直至(但不包括)二十二岁生日)。Berhman RE,Kliegman R,Arvin AM,Nelson WE.Nelson Textbook of Pediatrics,第15版

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Philadelphia:W.B.Saunders Company,1996；Rudolph AM,等人Rudolph’s Pediatrics,第21版New York:McGraw-Hill,2002；和Avery MD,First LR.Pediatric Medicine,第2版Baltimore:Williams&Wilkins；1994。[0074]术语“治疗方案”和“给药方案”可互换使用，是指本发明的组合中每种治疗剂的剂量和施用时间。[0075]“改善”是指与不施用治疗相比减轻或改善一种或多种症状。“改善”还包括缩短或减少症状的持续时间。[0076]术语“监管机构”是一个国家的机构，用于批准该国的药剂的医疗用途。例如，监管机构的非性示例是美国食品和药物管理局(FDA)。[0077]“抗体”是一种免疫球蛋白分子，其能够通过位于免疫球蛋白分子的可变区中的至少一个抗原识别位点与靶标(例如，碳水化合物、多核苷酸、脂质、多肽等)特异性结合。如本文所使用的，该术语不仅涵盖完整的多克隆抗体或单克隆抗体，而且还涵盖其抗原结合片段(例如，Fab，Fab'，F(ab’)2，Fv)，单链(scFv)和结构域抗体(包括例如鲨鱼和骆驼科动物抗体)，以及包含抗体的融合蛋白，以及包含抗原识别位点的免疫球蛋白分子的任何其他修饰构型。抗体包括任何类别的抗体，例如，IgG，IgA或IgM(或其亚类)，并且抗体不必是任何特定类别。取决于其重链恒定区的抗体氨基酸序列，免疫球蛋白可分为不同的类别。免疫球蛋白主要分为五类：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，并且其中一些可以进一步分为亚类(同种型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。对应于不同类别的免疫球蛋白的重链恒定区分别称为α、δ、ε、γ和μ。不同种类的免疫球蛋白的亚基结构和三维构型是众所周知的。[0078]如本文所使用的，术语抗体的“抗原结合片段”或“抗原结合部分”是指完整抗体的一个或多个片段，其保留特异性结合至给定抗原(例如，PD-1)的能力。抗体的抗原结合功能可以通过完整抗体的片段来执行。抗体的术语“抗原结合片段”中所包括的结合片段的实例包括Fab；Fab’；F(ab’)2；由VH和CH1结构域组成的Fd片段；由抗体单臂的VL和VH结构域组成的Fv片段；单域抗体(dAb)片段(Ward等人，Nature 341：4-6，19)，和分离的互补决定区(CDR)。

[0079]与靶标(例如，PD-1蛋白)“优先结合”或“特异性结合”(本文可互换使用)的抗体、抗体缀合物或多肽是本领域众所周知的术语，并且确定这样的特异性或优先结合的方法在本领域也是众所周知的。如果分子与特定细胞或物质比与替代细胞或物质相比更频繁、更迅速、以更长的持续时间和/或以更大的亲和力反应或缔合，则该分子被称为表现出“特异性结合”或“优先结合”。如果抗体以比其结合至其他物质更大的亲和力(affinity)、亲合力(avidity)、更容易和/或更长的持续时间结合，则其“特异性结合”或“优先结合”至靶标。例如，与PD-1表位特异性或优先结合的抗体是以比其与其他PD-1表位或非PD-1表位的结合更大的亲和力、亲合力、更容易和/或更长的持续时间结合该表位的抗体。还应理解，通过阅读该定义，例如，特异性结合或优先结合第一靶标的抗体(或部分或表位)可以或可以不特异性或优先结合第二靶标。因此，“特异性结合”或“优先结合”并不一定要求(尽管可以包括)专一结合。通常，但不一定，提及结合意指优先结合。[0080]抗体的“可变区”是指抗体轻链的可变区或抗体重链的可变区(单独地或组合地)。如本领域中已知的，重链和轻链的可变区各自由通过三个互补决定区(CDR)连接的四个框架区(FR)组成，所述互补决定区也称为高变区。每条链中的CDR通过FR紧密结合在一起，并

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且与另一条链中的CDR一起促进抗体的抗原结合位点的形成。至少有两种确定CDR的技术：(1)基于跨物种序列变异性的方法(即Kabat等人Sequences of Proteins of Immunological Interest,(第5版,1991,National Institutes of Health,Bethesda MD))；以及(2)基于抗原-抗体复合物的晶体学研究的方法(Al-lazikani等人,1997,J.Molec.Biol.273:927-948)。如本文所使用的CDR可指通过任何一种方法或通过两种方法的组合定义的CDR。[0081]可变结构域的“CDR”是根据Kabat、Chothia、Kabat和Chothia两者的积累、AbM、接触和/或构象定义或本领域众所周知的任何CDR确定的方法鉴定的可变区内的氨基酸残基。抗体CDR可以被鉴定为最初由Kabat等人定义的高变区。参见，例如，Kabat等人,1992,Sequences of Proteins of Immunological Interest,第5版,Public Health Service,NIH,Washington D.C。CDR的位置也可以被鉴定为最初由Chothia和其他人描述的结构环结构。参见，例如，Chothia等人，Nature 342：877-883，19。CDR鉴定的其他方法包括“AbM定义”，其是Kabat和Chothia之间的折衷，并且使用Oxford Molecular的AbM抗体建模软件(现在为

)或基于观察到的抗原接触的CDR的“接触定义”(在MacCallum等人,

J.Mol.Biol.,262:732-745,1996中示出)导出。在本文中称为CDR的“构象定义”的另一种方法中，可以将CDR的位置鉴定为对抗原结合起焓贡献的残基。参见，例如，Makabe等人，Journal of Biological Chemistry，283：1156-1166，2008。其他CDR边界定义可能不严格遵循上述方法之一，但仍将与Kabat CDR的至少一部分重叠，尽管它们可以根据特定的残基或残基组或甚至整个CDR不显著影响抗原结合的预测或实验结果被缩短或延长。如本文所使用的CDR可指通过本领域已知的任何方法(包括方法的组合)定义的CDR。本文使用的方法可以利用根据这些方法中的任何一种定义的CDR。对于包含多于一个CDR的任何给定实施方案，可以根据Kabat、Chothia、延伸的、AbM、接触和/或构象定义中的任一个来定义CDR。[0082]“分离的抗体”和“分离的抗体片段”是指纯化状态，并且在这种情况下是指所命名的分子基本上不含其他生物分子(例如，核酸、蛋白质、脂质、碳水化合物或其他材料(例如，细胞碎片和生长培养基)。通常，术语“分离的”并不意指完全不存在这样的材料或不存在水、缓冲剂或盐，除非它们的存在量实质上干扰如本文所述的结合化合物的实验或治疗用途。

[0083]如本文所使用的“单克隆抗体”或“mAb”或“Mab”是指基本上同质的抗体群体，即，除了可能以微量存在的可能天然存在的突变以外，抗体分子包含在氨基酸序列上是相同的群体。相反，常规的(多克隆)抗剂通常包括在其可变结构域(特别是其CDR中)具有不同氨基酸序列的多种不同抗体，其通常特异于不同表位。修饰语“单克隆”表示从基本上同质的抗体群体获得的抗体的特征，并且不应解释为要求通过任何特定方法生产抗体。例如，根据本发明使用的单克隆抗体可以通过首先由Kohler等人(1975)Nature 256：495描述的杂交瘤方法来制备，或可以通过重组DNA方法制备(参见，例如，美国专利号4,816,567)。还可以使用例如Clackson等人(1991)Nature 352:624-628和Marks等人(1991)J.Mol.Biol.222:581-597中描述的技术从噬菌体抗体文库中分离“单克隆抗体”。还参见Presta(2005)J.Allergy Clin.Immunol.116:731。[0084]“嵌合抗体”是指这样的抗体，其中重链和/或轻链的一部分与源自特定物种(例如，人)或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而一条或多条链的其

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余部分与源自另一物种(例如，小鼠)或属于另一种抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，以及这样的抗体的片段，只要它们表现出所需的生物学活性。[0085]“人抗体”是指仅包含人免疫球蛋白蛋白序列的抗体。如果在小鼠、小鼠细胞或源自小鼠细胞的杂交瘤中产生，人抗体可能含有鼠类碳水化合物链。类似地，“小鼠抗体”或“大鼠抗体”是指分别仅包含小鼠或大鼠免疫球蛋白序列的抗体。[0086]“人源化抗体”是指包含来自非人(例如，鼠)抗体以及人抗体的序列的抗体形式。这样的抗体含有源自非人免疫球蛋白的最小限度的序列。通常，人源化抗体将包含基本上全部的至少一个并且通常是两个可变结构域，其中全部或基本上全部的高变环对应于非人免疫球蛋白的那些以及全部或基本上全部的FR区是人免疫球蛋白序列的那些。人源化抗体还任选地将包含免疫球蛋白恒定区(Fc)的至少一部分，通常是人免疫球蛋白的恒定区。在需要区分人源化抗体和亲本啮齿动物抗体时，在抗体克隆名称中添加前缀“hum”、“hu”或“h”。啮齿动物抗体的人源化形式通常将包含与亲本啮齿动物抗体相同的CDR序列，尽管可以包括某些氨基酸置换以增加亲和力、增加人源化抗体的稳定性或出于其他原因。[0087]“保守修饰的变体”或“保守置换”是指蛋白质中的氨基酸被具有相似特征(例如，电荷、侧链大小、疏水性/亲水性、主链构象和刚性等)的其他氨基酸置换，使得通常可以在不改变蛋白质的生物学活性或其他所需特性(例如，抗原亲和力和/或特异性)的情况下进行改变。本领域技术人员认识到，通常，多肽的非必需区域中的单个氨基酸置换基本上不会改变生物学活性(参见，例如，Watson等人(1987)Molecular Biology of the Gene,The Benjamin/Cummings Pub.Co.,p.224(第4版))。另外，结构或功能上相似的氨基酸的置换不太可能破坏生物学活性。示例性的保守置换在下表1中列出。[0088]表1.示例性的保守氨基酸置换

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如本文所使用的术语“PD-1结合拮抗剂”是指与PD-1特异性结合并降低PD-1与其

一种或多种结合伴侣(例如，PD-L1和/或PD-L2)的相互作用的分子。例如，PD-1结合拮抗剂包括抗PD-1抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、适配体、融合蛋白和寡肽。在一个实施方案中，PD-1结合拮抗剂减少由或通过T淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白(通过PD-1的信号传导介导)介导的负共刺激信号，从而使功能障碍的T细胞是较少功能障碍的。在一些实施方案中，PD-1结合拮抗剂是抗PD-1抗体。在一个实施方案中，PD-1结合拮抗剂是抗PD-1抗体，其选自纳武单抗、派姆单抗、纳武单抗的生物类似物和派姆单抗的生物类似物。在一个实施方

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案中，PD-1结合拮抗剂是纳武单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，PD-1结合拮抗剂是派姆单抗或其生物类似物。

[0092]如本文所述的抗PD-1抗体也可以是纳武单抗或其生物类似物的抗原结合抗体片段，或派姆单抗或其生物类似物的抗原结合抗体片段。[0093]在一些实例中，抗PD-1抗体可以是纳武单抗的生物类似物或派姆单抗的生物类似物。

[0094]“生物类似物”是指与参考抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)相比具有相同一级氨基酸序列的抗体或抗原结合片段，并且任选地可以在翻译后修饰(例如，糖基化和/或磷酸化)上与参考抗体相比具有可检测的不同(例如，不同的糖型)。[0095]在一些实施方案中，生物类似物是具有与参考抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)相比具有相同的一级氨基酸序列的轻链和与参考抗体相比具有相同的一级氨基酸序列的重链的抗体或其抗原结合片段。在一些实例中，生物类似物是具有轻链和重链的抗体或其抗原结合片段，所述轻链包括与参考抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)相同的轻链可变结构域序列，所述肿瘤包括与参考抗体相同的重链可变结构域序列。在一些实施方案中，生物类似物与参考抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)相比可具有相似的糖基化模式。在其他实施方案中，生物类似物与参考抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)相比可具有不同的糖基化模式。

[0096]下表2提供了用于本发明的治疗方法、药物和用途的示例性PD-1结合拮抗剂的氨基酸序列的列表。mAb7和mAb15的CDR带下划线。mAB7也称为RN888或PF-6801591。在国际专利公开号WO2016/092419中公开了mAb7(aka RN888)和mAb15，其公开内容通过引用整体并入本文。[0097]表2

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抗PD-1抗体的其他实例包括CT-011(pidilizumab，其描述于WO 09/101611)，IBI-308，mDX-400，BGB-108，MEDI-0680，SHR-1210，PF-06801591，PDR-001，GB-226，STI-1110，

MEDI-0680(AMP-514)，PDR001，REGN2810，BGB-108和BGB-A317或任何这些抗体的生物类似物。其他示例性抗PD-1抗体描述于美国专利申请号2017/0349666、2017/0327590、2017/0327582、2017/0320949、2017/0290913、2017/0290808、2017/0275705、2017/0274073、

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2017/0267762、2017/0247456、2017/0239351、2017/0239351、2017/0198037、2017/01661、2017/0121409、2017/0112925、2017/0112925、2017/0088615、2017/0052188、2017/0044260、2017/0044256、2017/0039345、2017/0037127、2017/0037125、2017/0021019、2017/00071、2017/0000885、2016/0376367、2016/0362492、2016/0312297、2016/0312295、2016/0304969、2016/0304606、2016/0303231、2016/02315、2016/0257752、2016/0222118、2016/0222113、2016/0206719、2016/0206719、2016/0193334、2016/0166685、2016/0158360、2016/0130348、2016/0130345、2016/0075783、2016/0068586、2016/0052990、2016/0051672、2016/0039903、2016/0031990、2016/0022814、2016/0002334、2015/0265705、2015/0250837、2015/0232555、2015/0216970、2015/0210772、2015/0210769、2015/0203579、2015/0190506、2015/0152180、2015/0125955、2015/0118245、2015/0118234、2015/0071910、2014/0356363、2014/0348743、2014/0341902、2014/0335093、2014/0294852、2014/0271684、2014/0234296、2014/0227262、2014/0178370、2014/0044738、2013/0230514、2013/01294、2013/0156774、2013/0133091、2013/0109843、2013/0108651、2013/0095098、2013/0022629、2013/0022600、2012/01149、2012/01148、2012/0039906、2011/0280878、2011/0229461、2011/0195068、2011/0171220、2011/0171215、2011/0159023、2011/0123550、2011/0008777、2011/0008369、2010/0285013、2010/0266617、2010/0055102、2009/0263865、2009/0217401、2009/0076250、2009/0028857、2008/0311117、2008/0025979、2007/0092504、2006/0210567、2006/0034826、2004/0241745和2004/0213795。[0108]在一些实施方案中，PD-1结合拮抗剂可以是融合蛋白(例如，免疫粘附素，例如AMP-224，也称为B7-DCIg，其在WO 10/027827和WO 11/066342中进行了描述)。例如，免疫粘附素可包括与抗体恒定区(例如，免疫球蛋白(例如，人免疫球蛋白)的Fc区)融合的PD-L1或PD-L2的细胞外或PD-1结合部分。[0109]在一些实施方案中，PD-1结合拮抗剂可以是适配体。作为适配体的PD-1结合拮抗剂的非性实例描述于例如US 2017/0218369中。Prodeus等人,Mol.Ther.Nucleic Acids 4:e237,2015；Wang等人,doi:10.1016/j.biochi.2017.09.006Biochimie中描述了作为PD-1结合拮抗剂的适配体的其他实例。例如，作为适配体的PD-1结合拮抗剂可以包括以下之一的序列：

[0110]GCTACTGTACATCACGCCTCTCCCC(SEQ ID NO:40),[0111]CTACTGTACATCACGCCTCTCCCC(SEQ ID NO:41),[0112]GTACAGTTCCCGTCCCTGCACTACA(SEQ ID NO:42),或[0113]GTACAGTTCCCGTCCTGCACTACA(SEQ ID NO:43)。

[0114]在本发明的组合疗法中的MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐。比美替尼具有以下结构：

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比美替尼也被称为ARRY-162、MEK162、6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺和5-((4-溴-2-氟苯基)氨基)-4-氟-N-(2-羟基乙

氧基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-6-羧酰胺。制备比美替尼及其药学上可接受的盐的方法在PCT公开号WO 03/077914的实施例18(化合物29III)中进行了描述，其公开内容通过引用整体并入本文。在一个实施方案中，MEK抑制剂是作为游离碱的比美替尼。在一个实施方案中，MEK抑制剂为比美替尼的药学上可接受的盐。在一个实施方案中，MEK抑制剂是结晶的比美替尼。结晶的比美替尼和制备结晶的比美替尼的方法在PCT公开号WO 2014/063024中进行了描述，其公开内容通过引用整体并入本文。[0117]术语“癌症”、“癌性”或“恶性”是指或描述哺乳动物中通常以不受控制的细胞生长为特征的生理病况。癌症的实例包括但不限于癌、淋巴瘤、白血病、母细胞瘤和肉瘤。此类癌症的更具体实例包括鳞状细胞癌、骨髓瘤、小细胞肺癌、非小细胞肺癌(包括转移性非小细胞肺癌)、神经胶质瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性髓细胞样白血病(AML)、多发性骨髓瘤、胃肠(道)癌、肾细胞癌、肾癌(包括晚期肾细胞癌)、卵巢癌、肝癌、成淋巴细胞性白血病、淋巴细胞性白血病、结直肠癌(包括转移性结直肠癌(例如转移性微卫星稳定的结直肠癌))、子宫内膜癌、肾脏癌、前列腺癌、甲状腺癌、黑色素瘤(包括不可切除或转移性黑色素瘤，包括BRAF V600突变型黑色素瘤(例如BRAF V600E突变型黑色素瘤))、软骨肉瘤、神经母细胞瘤、胰腺癌、多形性胶质母细胞瘤、宫颈癌、脑癌、胃癌、尿路上皮癌(包括局部晚期或转移性尿路上皮癌)、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌和头颈癌(包括复发或转移性头颈鳞状细胞癌)。在一个实施方案中，癌症为结直肠癌。在一个实施方案中，癌症为转移性结直肠癌。在一个实施方案中，癌症为转移性微卫星稳定的结直肠癌。在一个实施方案中，癌症为黑色素瘤。在一个实施方案中，癌症为胰腺癌。在一个实施方案中，癌症为甲状腺癌。[0118]在世界范围内，结直肠癌是男性中的第三大常见癌症，而在女性中则是第二大常见癌症，2012年新诊断出约140万例结直肠癌。2012年，结直肠癌导致全球约694,000例死亡。结直肠肿瘤中微卫星稳定性(MSS)的发生率因阶段而异，其中近80％的早期可切除肿瘤和约67％的晚期转移性肿瘤表现出MSS。[0119]如本文所使用的术语“组合疗法”是指两种不同的治疗活性剂(即，组合的组分或组合伴侣)(例如，比美替尼或其药学上可接受的盐和PD-1结合拮抗剂)在一段时间内的给药方案，其中所述治疗活性剂以医疗护理人员规定的方式或根据本文定义的监管机构一起或分开施用。在一个实施方案中，组合疗法基本上由MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂组成，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药物可接受的盐，以及所述PD-1结合拮抗剂是纳武单抗。在一个实施方案中，组合疗法基本上由MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂组成，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药物可接受的盐，所述PD-1结合拮抗剂是派姆单抗。

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如本领域可理解的，可以向患者施用一段时间的组合疗法。在一些实施方案中，所

述一段时间发生在向患者施用不同的癌症治疗性治疗/药剂或癌症治疗性治疗/药剂的不同组合之后。在一些实施方案中，所述一段时间发生在向患者施用不同的癌症治疗性治疗/药剂或癌症治疗性治疗/药剂的不同组合之前。在一些实施方案中，PD-1结合拮抗剂的施用和比美替尼或其药学上可接受的盐的施用基本上同时发生。在一些实施方案中，在所述一段时间内，向患者施用PD-1结合拮抗剂发生在向患者施用比美替尼或其药学上可接受的盐之前。在一些实施方案中，在所述一段时间内，向患者施用比美替尼或其药学上可接受的盐发生在向患者施用PD-1结合拮抗剂之前。在一些实施方案中，在所述一段时间内，向患者施用手术治疗(例如，肿瘤切除和/或淋巴结切除)和/或抗癌治疗(例如，不包括BRAF激酶抑制剂(例如，康奈非尼)的药剂)。在一些实施方案中，在所述一段时间内不向患者施用BRAF激酶抑制剂(例如，康奈非尼)。

[0121]合适的一段时间可以由本领域技术人员(例如，医师)确定。如本领域中可以理解的，本领域技术人员可以基于以下一项或多项来确定合适的一段时间：患者的疾病阶段、患者的体重和性别、临床试验指南(例如，fda.gov网站上的那些)以及批准的药品标签上的信息。例如，合适的一段时间可以是例如1周至2年、1周至22个月、1周至20个月、1周至18个月、1周至16个月、1周至14个月、1周至12个月、1周至10个月、1周至8个月、1周至6个月、1周至4个月1周至2个月、1周至1个月、2周至2年、2周至22个月、2周至20个月、2周至18个月、2周至16个月、2周至14个月、2周至12个月、2周至10个月、2周至8个月、2周至6个月、2周至4个月、2周至2个月、2周至1个月、1个月至2年、1个月至22个月、1个月至20个月、1个月至18个月、1个月至16个月、1个月至14个月、1个月至12个月、1个月至10个月、1个月至8个月、1个月至6个月、1个月至4个月、1个月至2个月、2个月至2年、2个月至22个月、2个月至20个月、2个月至18个月、2个月至16个月、2个月至14个月、2个月至12个月、2个月至10个月、2个月至8个月、2个月至6个月、2个月至4个月、3个月至2年、3个月至22个月、3个月至20个月、3个月至18个月、3个月至16个月、3个月至14个月、3个月至12个月、3个月至10个月、3个月至8个月、3个月至6个月、4个月至2年、4个月至22个月、4个月至20个月、4个月至18个月、4个月至16个月、4个月至14个月、4个月至12个月、4个月至10个月、4个月至8个月、4个月至6个月、6个月至2年、6个月至22个月、6个月至20个月、6个月至18个月、6个月至16个月、6个月至14个月、6个月至12个月、6个月至10个月、6个月至8个月、8个月至2年、8个月至22个月、8个月至20个月、8个月至18个月、8个月至16个月、8个月至14个月、8个月至12个月、8个月至10个月、10个月至2年、10个月至22个月、10个月至20个月、10个月至18个月、10个月至16个月、10个月至14个月、10个月至12个月、12个月至2年、12个月至22个月、12个月至20个月、12个月至18个月、12个月至16个月、或12个月至14个月(含端值)。[0122]如本文所使用的药物、化合物或药物组合物的“有效剂量”或“有效量”或“治疗有效量”是足以实现任何一种或多种有益或期望结果的量。对于预防性用途，有益或期望的结果包括消除或降低疾病风险、减轻疾病严重程度或延缓疾病发作，包括疾病的生化、组织学和/或行为症状，其并发症以及在疾病发展过程中出现的中间病理表型。对于治疗用途，有益或期望的结果包括临床结果，例如降低各种疾病或病况(例如癌症)的一种或多种症状的发生率或改善各种疾病或病况(例如癌症)的一种或多种症状，减少治疗该疾病所需的其他药物的剂量，增强另一种药物的效果和/或延缓疾病的进展。有效剂量可以在一次或多次施

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用中进行施用。为了本发明的目的，药物、化合物或药物组合物的有效剂量是足以直接或间接地完成预防性或治疗性治疗的量。如在临床上下文中所理解的，药物、化合物或药物组合物的有效剂量可以与另一种药物、化合物或药物组合物一起实现。因此，可以在施用一种或多种治疗剂的情况下考虑“有效量”，并且如果与一种或多种其他药剂结合可以实现期望的结果，则可以认为单个药剂是以有效量给予的。关于癌症的治疗，有效量也可以指具有以下效果的量：(1)减小肿瘤的大小，(2)抑制(即减慢至一定程度，优选停止)肿瘤转移的出现；(3)在一定程度上抑制(即减慢至一定程度，优选停止)肿瘤生长或肿瘤侵袭，和/或(4)在一定程度上缓解(或优选消除)与癌症有关的一种或多种体征或症状。剂量和施用方案的治疗性或药理效力也可以表征为在具有这些特定肿瘤的患者中诱导、增强、维持或延长疾病控制和/或总生存期的能力，其可以测量为疾病进展前时间的延长。[0123]如本文所使用的术语“Q2W”是指每两周一次。[0124]如本文所使用的术语“Q3W”是指每三周一次。[0125]如本文所使用的术语“BID”是指一天两次。[0126]当应用于诊断或怀疑患有癌症的受试者时，“肿瘤”是指任何大小的恶性或潜在恶性赘生物或组织块，并且包括原发性肿瘤和继发性赘生物。实体瘤是一种异常组织生长或组织块，其通常不包含囊肿或液体区域。不同类型的实体瘤根据形成它们的细胞类型命名。实体瘤的实例是肉瘤、癌和淋巴瘤。白血病(血液癌症)通常不形成实体瘤(National Cancer Institute,Dictionary of Cancer Terms)。[0127]如本文所使用的术语“晚期”(当其涉及实体瘤时)包括局部晚期(非转移性)疾病和转移性疾病。局部晚期实体瘤(其可以或不可以以治愈性意图治疗)和转移性疾病(其不能以治愈性意图治疗)包括在如本发明中使用的“晚期实体瘤”的范围内。本领域技术人员将能够识别和诊断患者中的晚期实体瘤。[0128]“肿瘤负荷”也称为“肿瘤负载”，是指遍布全身的肿瘤物质的总量。肿瘤负荷是指遍布全身的(包括淋巴结和骨髓)癌细胞的总数或一个或多个肿瘤的总大小。肿瘤负荷可以通过本领域已知的多种方法来确定，例如，通过例如使用卡尺测量从受试者中移出后一个或多个肿瘤的尺寸或使用成像技术(例如，超声、骨扫描、计算机断层扫描(CT)或磁共振成像(MRI)扫描)测量在体内时一个或多个肿瘤的尺寸。[0129]术语“肿瘤大小”是指肿瘤的总大小，其可以被测量为肿瘤的长度和宽度。肿瘤大小可通过本领域已知的多种方法来确定，例如，通过例如使用卡尺测量从受试者中移出后一个或多个肿瘤的尺寸或使用成像技术(例如，超声、骨扫描、计算机断层扫描(CT)或磁共振成像(MRI)扫描)测量在体内时一个或多个肿瘤的尺寸。[0130]“个体反应”或“反应”可以使用表明对个体有益的任何终点来评估，所述终点包括但不限于(1)在某种程度上抑制疾病进展(例如癌症进展)，包括减慢或完全停滞；(2)减小肿瘤大小；(3)抑制(即减少、减慢或完全停止)癌细胞浸润到邻近的周围器官和/或组织中；(4)抑制(即减少、减慢或完全停止)转移；(5)在某种程度上减轻与疾病或病症(例如癌症)相关的一种或多种症状；(6)增加或延长生存期，包括总生存期和无进展生存期；和/或(7)降低治疗后给定时间点的死亡率。[0131]患者的“有效反应”或患者对使用药物治疗的“反应性”和类似措词是指赋予处于疾病或病症(例如癌症)的风险或罹患疾病或病症(例如癌症)的患者的临床或治疗益处。在

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一个实施方案中，这样的益处包括以下任意一项或多项：延长生存期(包括总生存期和/或无进展生存期)；导致客观反应(包括完全反应或部分反应)；或改善癌症的体征或症状。[0132]“客观反应”或“OR”是指可测量的反应，包括完全反应(CR)或部分反应(PR)。“客观反应率”(ORR)是指肿瘤大小减小预定量并保持最低限度的一段时间的患者的比例。通常，ORR是指完全反应(CR)率和部分反应(PR)率的总和。[0133]如本文所使用的“完全反应”或“CR”是指响应于治疗的癌症所有体征的消失(例如，所有靶病变的消失)。这并不总是意味着癌症已经治愈。[0134]如本文所使用的“部分反应”或“PR”是指响应于治疗的一种或多种肿瘤或病变的大小或体内癌症的程度的减小。例如，在一些实施方案中，PR是指以基线SLD为参考，靶病变的最长直径(SLD)的总和至少减小30％。[0135]“持续反应”是指在停止治疗后对减少肿瘤生长的持续作用。例如，与药物施用阶段开始时的大小相比，肿瘤大小可以是相同的大小或更小。在一些实施方案中，持续反应的持续时间至少与治疗持续时间相同，为治疗持续时间的至少1.5倍、2倍、2.5倍或3倍的长度或更长。

[0136]如本文所使用的“无进展生存期”(PFS)是指在治疗期间和之后的时间长度，在该时间长度内所治疗的疾病(例如，癌症)不恶化。无进展生存期可包括患者经历完全反应或部分反应的时间量，以及患者经历稳定疾病的时间量。[0137]如本文所使用的“总生存率”(OS)是指在特定一段时间之后一组中可能存活的个体的百分比。

[0138]为了本发明的目的，“反应持续时间”是指从记录由于药物治疗引起的肿瘤模型生长抑制到获得与治疗前生长速率相似的恢复的生长速率的时间。[0139]“延长生存期”是指相对于未治疗的患者(即，相对于未用药物治疗的患者)，增加治疗的患者的总体或无进展生存期。[0140]如本文所使用的“药物相关毒性”、“输注相关反应”和“免疫相关不良事件”(“irAE”)及其严重性或级别如National Cancer Institute’s Common Terminology Criteria for Adverse Events v 4.0(NCI CTCAE v 4.0)所举例说明和定义。[0141]如本文所使用的“杂合性缺失评分”或“LOH评分”是指个体的肿瘤组织中基因组LOH的百分比。Swisher等人(The Lancet Oncology,18(1):75-87,2017年1月)描述了基因组LOH百分比及其计算方法，其公开内容通过引用整体并入本文。示例性遗传分析包括但不限于DNA测序和Foundation Medicine的基于NGS的T5测定。[0142]如本文所使用的“同源重组缺陷评分”或“HRD评分”是指在个体的肿瘤组织中杂合性缺失(“LOH”)、端粒等位基因不平衡(“TAI”)和大片段迁移(“LST”)的未加权数值总和。HRD评分以及LOH和LOH评分及其计算方法描述于Timms等人,Breast Cancer Res 2014 Dec 5；16(6):475,Telli等人,Clin Cancer Res；22(15)；37–73.2016，其公开内容通过引用整体并入本文。示例性遗传分析包括但不限于DNA测序、Myriad的HRD或HRD Plus测定(Mirza等人,N Engl J Med 2016Dec 1；375(22):21-21,2016)。[0143]如本文所使用的术语“肿瘤比例评分”或“TPS”是指在样品的免疫组织化学测试中显示出部分或全部膜染色的活肿瘤细胞的百分比。如本文所使用的“PD-L1表达的肿瘤比例评分”是指在样品的PD-L1表达免疫组织化学测试中显示出部分或完全膜染色的活肿瘤细

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胞的百分比。示例性样品包括但不限于生物学样品、组织样品、固定石蜡包埋(FFPE)的人组织样品和固定石蜡包埋(FFPE)的人肿瘤组织样品。示例性的PD-L1表达免疫组织化学测试包括但不限于PD-L1 IHC 22C3 PharmDx(FDA批准，Daco)、Ventana PD-L1 SP263测定以及国际专利申请PCT/EP2017/073712中所述的测试。[0144]在一些实施方案中，本文所述方法的抗癌作用(包括但不限于“客观反应”、“完全反应”、“部分反应”、“进行性疾病”、“稳定疾病”、“无进展生存期”、“反应持续时间”)通过研究人员在患有除了转移性去势抵抗性前列腺癌(CRPC)以外的局部晚期或转移性实体瘤的患者中使用RECIST v1.1(Eisenhauer等人，Eur J of Cancer 2009；45(2)：228-47)和在患有转移性CRPC的患者中使用RECIST v1.1和PCWG3(Scher等人,J Clin Oncol 2016Apr 20；34(12):1402-18)来定义和评估。Eisenhauer等人,Eur J of Cancer 2009；45(2):228-47和Scher等人,J Clin Oncol 2016Apr 20；34(12):1402-18的公开内容通过引用整体并入本文。

[0145]在一些实施方案中，本文所述方法的抗癌作用(包括但不限于“免疫相关的客观反应”(irOR)、“免疫相关的完全反应”(irCR)、“免疫相关的部分反应”(irCR)、“免疫相关的进行性疾病”(irPD)、“免疫相关的稳定疾病”(irSD)、“免疫相关的无进展生存期”(irPFS)、“免疫相关的反应持续时间”(irDR))通过免疫相关反应标准(irRECIST，Nishino等人，J Immunother Cancer 2014；2:17)对除了患有转移性CRPC的患者以外的患有局部晚期或转移性实体瘤的患者进行定义和评估。Nishino等人,J Immunother Cancer 2014；2:17的公开内容通过引用整体并入本文。[0146]如本文所使用的“与…组合”是指同时、顺序或间歇地以分开的剂量施用MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐。[0147]术语“累加性”用于意指组合疗法的两种组分的组合结果不大于单独的每种化合物、组分或靶向药剂的总和。术语“累加性”是指单独使用每种组分相比，所治疗的疾病病况或病症与没有改善。

[0148]本文所使用的术语“协同作用”或“协同”是指组合疗法中两种治疗剂的组合的作用大于单独施用时每种药剂的作用的总和。“协同量”或“协同有效量”是产生协同作用的两个组合伴侣的组合的量，如本文所定义的“协同”。确定两个组合伴侣之间的协同相互作用，可以通过在不同的w/w(重量/重量)比率范围和剂量下向需要治疗的患者施用组合伴侣来确定性地测量作用的最佳范围和作用的每种组分的绝对剂量范围。但是，在体外模型或体内模型中观察到的协同作用可以预测人和其他物种中的作用，并且如本文所述，存在体外模型或体内模型以测量协同作用并且此类研究的结果可用于通过应用药代动力学/药效学方法预测人和其他物种所需的有效剂量和血浆浓度比率范围以及绝对剂量和血浆浓度。例如，本文描述的本领域认可的癌症的体外和动物模型是本领域已知的，并且在实施例中进行了描述。示例性协同作用包括但不限于增强治疗功效、减少在相同或增加功效水平下的剂量、减少或延迟耐药性的发展和同时增强或等同的治疗作用以及减少不希望的副作用。[0149]例如，可以通过确定本文所述的本领域认可的任何癌症的体外(例如癌细胞系)或体内(动物模型)模型中的协同作用来鉴定两种治疗剂的协同比率。在实施例中描述了本文描述的癌症的癌细胞系和体内动物模型的非性实例。本领域认可的癌细胞系和体内动物模型的其他实例是本领域已知的。

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在一些实施方案中，如本文所使用的“协同作用”是指MEK抑制剂(其为比美替尼或

其药学上可接受的盐)与PD-1结合拮抗剂的组合产生的作用(例如，任何有益或期望的结果，包括如本文所述的临床结果，例如减慢增生性疾病特别是癌症或其症状的症状进展)大于单独施用MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂时观察到的作用的总和。[0151]在一些实施方案中，本文提供的方法在1天至2年(例如，1天至22个月、1天至20个月、1天至18个月、1天至16个月、1天至14个月、1天至12个月、1天至10个月、1天至9个月、1天至8个月、1天至7个月、1天至6个月、1天至5个月、1天至4个月、1天至3个月、1天至2个月、1天至1个月、1周至2年、1周至22个月、1周至20个月、1周至18个月、1周至16个月、1周至14个月、1周至12个月、1周至10个月、1周至9个月、1周至8个月、1周至7个月、1周至6个月、1周至5个月、1周至4个月、1周至3个月、1周至2个月、1周至1个月、2周至2年、2周至22个月、2周至20个月、2周至18个月、2周至16个月、2周至14个月、2周至12个月、2周至10个月、2周至9个月、2周至8个月、2周至7个月、2周至6个月、2周至5个月、2周至4个月、2周至3个月、2周至2个月、2周至1个月、1个月至2年、1个月至22个月、1个月至20个月、1个月至18个月、1个月至16个月、1个月至14个月、1个月至12个月、1个月至10个月、1个月至9个月、1个月至8个月、1个月至7个月、1个月至6个月、1个月至6个月、1个月至5个月、1个月至4个月、1个月至3个月、1个月至2个月、2个月至2年、2个月至22个月、2个月至20个月、2个月至18个月、2个月至16个月、2个月至14个月、2个月至12个月、2个月至10个月、2个月至9个月、2个月至8个月、2个月至7个月、2个月至6个月、或2个月至5个月、2个月至4个月、3个月至2年、3个月至22个月、3个月至20个月、3个月至18个月、3个月至16个月、3个月至14个月、3个月至12个月、3个月至10个月、3个月至8个月、3个月至6个月、4个月至2年、4个月至22个月、4个月至20个月、4个月至18个月、4个月至16个月、4个月至14个月、4个月至12个月、4个月至10个月、4个月至8个月、4个月至6个月、6个月至2年、6个月至22个月、6个月至20个月、6个月至18个月、6个月至16个月、6个月至14个月、6个月至12个月、6个月至10个月、或6个月至8个月)的一段时间内用组合疗法进行治疗后在患者中导致一种或多种实体瘤的体积减少1％至99％(例如，1％至98％、1％至95％、1％至90％、1％至85％、1％至80％、1％至75％、1％至70％、1％至65％、1％至60％、1％至55％、1％至50％、1％至45％、1％至40％、1％至35％、1％至30％、1％至25％、1％至20％、1％至15％、1％至10％、1％至5％、2％至99％、2％至90％、2％至85％、2％至80％、2％至75％、2％至70％、2％至65％、2％至60％、2％至55％、2％至50％、2％至45％、2％至40％、2％至35％、2％至30％、2％至25％、2％至20％、2％至15％、2％至10％、2％至5％、4％至99％、4％至95％、4％至90％、4％至85％、4％至80％、4％至75％、4％至70％、4％至65％、4％至60％、4％至55％、4％至50％、4％至45％、4％至40％、4％至35％、4％至30％、4％至25％、4％至20％、4％至15％、4％至10％、6％至99％、6％至95％、6％至90％、6％至85％、6％至80％、6％至75％、6％至70％、6％至65％、6％至60％、6％至55％、6％至50％、6％至45％、6％至40％、6％至35％、6％至30％、6％至25％、6％至20％、6％至15％、6％至10％、8％至99％、8％至95％、8％至90％、8％至85％、8％至80％、8％至75％、8％至70％、8％至65％、8％至60％、8％至55％、8％至50％、8％至45％、8％至40％、8％至35％、8％至30％、8％至25％、8％至20％、8％至15％、10％至99％、10％至95％、10％至90％、10％至85％、10％至80％、10％至75％、10％至70％、10％至65％、10％至60％、10％至55％、10％至50％、10％至45％、10％至40％、10％至35％、10％至30％、10％至25％、10％至20％、10％至15％、

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340％、200％至320％、200％至300％、200％至280％、200％至260％、200％至240％、200％至220％、220％至400％、220％至380％、220％至360％、220％至340％、220％至320％、220％至300％、220％至280％、220％至260％、220％至240％、240％至400％、240％至380％、240％至360％、240％至340％、240％至320％、240％至300％、240％至280％、240％至260％、260％至400％、260％至380％、260％至360％、260％至340％、260％至320％、260％至300％、260％至280％、280％至400％、280％至380％、280％至360％、280％至340％、280％至320％、280％至300％、300％至400％、300％至380％、300％至360％、300％至340％、或300％至320％)(例如与患有类似癌症并施用不同治疗或未接收治疗的患者相比)。

[0155]如本文所使用的术语“细胞因子”一般是指由一个细胞群释放的蛋白质，其作为细胞间介体作用于另一细胞或对产生该蛋白质的细胞具有自分泌作用。此类细胞因子的实例包括淋巴因子，单核因子；白细胞介素(“IL”)，例如IL-1，IL-1a，IL-2，IL-3，IL-4，IL-5，IL-6，IL-7，IL-8，IL-9，IL10，IL-11，IL-12，IL-13，IL-15，IL-17A-F，IL-18至IL-29(例如IL-23)，IL-31，包括

rIL-2；肿瘤坏死因子，例如TNF-α或TNF-β，TGF-l-3；和

其他多肽因子，包括白血病抑制因子(“LIF”)，睫状神经营养因子(“CNTF”)，CNTF样细胞因子(“CLC”)，心肌营养蛋白(“CT”)和kit配体(“L”)。[0156]如本文所使用的术语“趋化因子”是指具有选择性诱导白细胞的趋化性和活化的能力的可溶性因子(例如，细胞因子)。它们还触发血管生成、炎症、伤口愈合和肿瘤发生的过程。趋化因子的实例包括IL-8、鼠角质形成细胞化学引诱物(KC)的人类同源物。[0157]除非另有定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同含义。在发生冲突的情况下，以本说明书(包括定义)为准。在整个说明书和权利要求书中，词语“包含”或诸如“包括”或“含有”的变体将被理解为暗示包括陈述的整数或整数组，但不排除任何其他整数或整数组。除非上下文另有要求，否则单数形式应包括复数，复数形式应包括单数。如本文所使用的，除非另外指出，否则单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数形式。例如，“一种”赋形剂包括一种或多种赋形剂。应当理解，本文描述的本发明的方面和变型包括“由方面和变型组成”和/或“基本上由方面和变型组成”。在一些实施方案中，基本上由本文所公开的施用步骤组成的方法包括其中患者先前治疗(在一段时间之前施用至患者)已失败或患者对这样的先前治疗是难治的和/或其中癌症已转移或复发的方法。在一些实施方案中，基本上由本文所公开的施用步骤组成的方法包括其中患者在本文公开的这样的施用步骤之前、基本上同时或之后进行手术、放射和/或其他方案和/或其中在本文公开的这样的施用步骤之后向患者施用其他化学和/或生物学治疗剂的方法。

[0158]尽管在本文中描述了示例性的方法和材料，但是与本文描述的方法和材料相似或等同的方法和材料也可以用于本发明的实践或测试。材料、方法和实例仅是举例说明性的，并不旨在。[0159]方法、用途和药物[0160]在一个实施方案中，将一定量的MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)与一定量的PD-1结合拮抗剂组合使用，其中所述量一起有效治疗癌症。[0161]在一个实施方案中，本发明的组合疗法的治疗有效量的每种组合伴侣单独施用，

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并且可以同时、顺序或间歇地并以任何顺序、以特定或变化的时间间隔(例如，在一段时间内)施用。

[0162]在一个实施方案中，本文提供了一种治疗增生性疾病(包括癌症)的方法，该方法包括在一段时间内向有此需要的患者施用基本上由MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂组成的组合疗法或基本上由其组成，所述MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐，其中以联合治疗有效的量(例如以协同有效的量)施用各个组合伴侣。本发明的组合疗法的各个组合伴侣可以在一段时间内以每日或间歇剂量施用。本发明的组合疗法的各个组合伴侣可以在一段时间内在不同时间和以任何顺序单独施用，或者在一段时间内以分开的组合形式同时施用。在一个实施方案中，在一段时间内，每天(每天一次或每天两次)施用MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)。在一个实施方案中，在一段时间内，每天两次施用MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)。在一个实施方案中，在一段时间内，每周施用PD-1结合拮抗剂。在一个实施方案中，在一段时间内，每2周(Q2W)施用PD-1结合拮抗剂。在一个实施方案中，在一段时间内，每3周(Q3W)施用PD-1结合拮抗剂。因此，本发明应被理解为包括所有在一段时间内的此类同时或交替治疗方案，并且术语“施用”应据此解释。[0163]如本文所使用的术语“联合治疗有效的量”是指将本文所述的组合的治疗剂以它们表现出相互作用(例如，联合治疗作用，例如协同作用)的时间间隔同时或单独地(例如，以时间交错的方式，例如顺序特定的方式)给予患者。这可以尤其通过以下方式来确定是否存在这种情况：跟踪血液水平并显示至少在一定时间间隔内组合组分存在于待治疗的人的血液中。

[01]在一个实施方案中，本文提供了一种治疗患有增生性疾病的受试者的方法，该方法包括在一段时间内以针对增生性疾病联合治疗有效的量向所述受试者施用本文所述的组合疗法，或基本上由其组成或由其组成。在一个实施方案中，所述增生性疾病是癌症。在一个实施方案中，所述癌症选自鳞状细胞癌、骨髓瘤、小细胞肺癌、非鳞状非小细胞肺癌、晚期非小细胞肺癌、非小细胞肺癌(包括转移性非小细胞肺癌)、神经胶质瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性髓细胞样白血病(AML)、多发性骨髓瘤、胃肠(道)癌、肾癌(包括晚期肾细胞癌)、卵巢癌、肝癌、成淋巴细胞性白血病、淋巴细胞性白血病、结直肠癌(包括转移性结直肠癌(例如转移性微卫星稳定的结直肠癌))、子宫内膜癌、肾脏癌、前列腺癌、甲状腺癌、黑色素瘤(包括不可切除或转移性黑色素瘤、包括BRAF V600突变型黑色素瘤)、晚期黑色素瘤、微卫星高不稳定性癌症、软骨肉瘤、神经母细胞瘤、胰腺癌、多形胶质母细胞瘤、宫颈癌、脑癌、胃癌、尿路上皮癌(包括局部晚期或转移性尿路上皮癌)、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、头颈鳞状细胞癌和头颈癌(包括复发或转移性头颈鳞状细胞癌)。在一个实施方案中，癌症是结直肠癌。在一个实施方案中，癌症是转移性结直肠癌。在一个实施方案中，癌症是转移性微卫星稳定的结直肠癌。在一个实施方案中，癌症是黑色素瘤。在一个实施方案中，癌症是胰腺癌。在一个实施方案中，癌症是甲状腺癌。[0165]在一个实施方案中，所述癌症选自非小细胞肺癌、胰腺癌、卵巢癌、结直肠癌、胃癌、黑色素瘤、乳腺癌、膀胱癌、非小细胞肺癌、头颈癌、子宫癌、宫颈癌、肝癌、甲状腺癌、肾脏癌、脑癌、皮肤癌和间皮瘤。[0166]在一个实施方案中，癌症是胰腺癌。在一个实施方案中，胰腺癌是MMS/MMR熟练的胰腺导管腺癌。在一个实施方案中，癌症是卵巢癌。在一个实施方案中，癌症是结直肠癌。在

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一个实施方案中，癌症是转移性结直肠癌。在一个实施方案中，癌症是胃癌。在一个实施方案中，癌症是黑色素瘤。在一个实施方案中，癌症是晚期的不可切除或转移性黑色素瘤。在一个实施方案中，癌症是乳腺癌。在一个实施方案中，癌症是三阴性乳腺癌。在一个实施方案中，癌症是膀胱癌。在一个实施方案中，癌症是非小细胞肺癌。在一个实施方案中，癌症是晚期或转移性PD-L1阳性非小细胞肺癌。[0167]在一些实施方案中，在一段时间之前，用一种或多种治疗剂先前治疗受试者，例如，使用地选自以下的至少一种抗癌治疗的治疗：化学疗法、靶向治疗剂(例如，Keytruda、Opdivo或比美替尼或其药学上可接受的盐)作为单一疗法；或MEK抑制剂(例如，比美替尼或其药学上可接受的盐)和BRAF激酶抑制剂(例如，康奈非尼)的组合、放射疗法和手术。

[0168]如本文所使用的术语“化学疗法”或“化学治疗剂”是指用于治疗癌症的化学治疗剂或两种、三种、四种或更多种化学治疗剂的组合。当化学疗法由多于一种化学治疗剂组成时，可以在同一天或同一治疗周期中的不同天将化学治疗剂施用至患者。[0169]“化学治疗剂”是可用于治疗癌症的化合物。化学治疗剂的实例包括烷基化剂，例如噻替哌(thiotepa)和环磷酰胺

烷基磺酸盐，例如白消安

(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶类(aziridines)，例如苯并多巴(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、meturedopa和uredopa；乙撑亚胺类(ethylenimines)和甲基蜜胺类(methylamelamines)，包括六甲蜜胺(altretamine)、曲他胺(triethylenemelamine)、三亚乙基磷酰胺(trietylenephosphoramide)、三亚乙基硫代磷酰胺(triethiylenethiophosphoramide)和三羟甲基蜜胺(trimethylolomelamine)；多聚乙酰(acetogenins)(特别是布拉他辛(bullatacin)和布拉他辛酮(bullatacinone))；δ-9-四氢大麻酚(屈大麻酚(dronabinol)，康(topotecan)

)；β-拉帕醌(beta-lapachone)；

)、乙酰

拉帕醇(lapachol)；秋水仙碱；桦木酸(betulinic acid)；喜树碱(包括合成类似物托泊替

CPT-11(伊立替康，

喜树碱、scopolectin和9-氨基喜树碱)；苔藓抑素(bryostatin)；培美曲塞(pemetrexed)；callystatin；CC-1065(包括其阿多来新(adozelesin)、卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成类似物)；鬼臼毒素(podophyllotoxin)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；替尼泊苷(teniposide)；念珠藻素(cryptophycins)(特别是念珠藻素1和念珠藻素8)；多拉司他汀(dolastatin)；倍癌霉素(duocarmycin)(包括合成类似物KW-21和CB1-TM1)；eleutherobin；水鬼蕉碱(pancratistatin)；TLK-286；sarcodictyin；spongistatin；氮芥(nitrogen mustards)，例如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、cholophosphamide、雌莫司汀(estramustine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)、盐酸氧氮芥(mechlorethamine oxide hydrochloride)、美法仑(melphalan)、新氮芥(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)；亚硝基脲(nitrosureas)，例如卡莫司汀(carmustine)、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素，例如烯二炔抗生素(例如卡奇霉素(calicheamicin)，特别是卡奇

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霉素γI I和卡奇霉素ωl l(参见，例如Nicolaou等人,Angew.Chem Intl.Ed.Engl.,33:183-186(1994))；dynemicin，包括dynemicin A；埃斯波霉素(esperamicin)；以及新制癌菌素(neocarzinostatin)发色团和相关的色蛋白烯二炔抗生素发色团)、aclacinomysins、放线菌素、authramycin、重氮丝氨酸、博来霉素(bleomycins)、放线菌素C、carabicin、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌霉素(carzinophilin)、色霉素(chromomycinis)、更生霉素(dactinomycin)、柔红霉素、地托比星(detorubicin)、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、多柔比星(包括

吗啉代-多柔比星、氰基吗啉代-多柔比星、2-吡咯啉-多柔

和脱氧多柔比星)、表柔比星

比星、多柔比星HCl脂质体注射剂

(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素，例如丝裂霉素C、霉酚酸(mycophenolic acid)、诺加霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycins)、培洛霉素(peplomycin)、potfiromycin、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑霉素(streptonigrin)、链脲霉素(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、新制癌菌素(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物，例如甲氨蝶呤、吉西他滨

替加氟

卡培他滨

埃博霉素和含氟嘧啶的化学治疗剂，例如5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类

似物，例如二甲叶酸(denopterin)、甲氨蝶呤、蝶罗呤(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物，例如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯基嘌呤(6-mercaptopurine)、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物，例如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮尿苷(6-azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷、双脱氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；抗-肾上腺类，例如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂，例如亚叶酸；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；依达曲沙(edatraxate)；defofamine；秋水仙胺；地吖醌(diaziquone)；elfornithine；依利醋铵(elliptinium acetate)；依托格鲁(etoglucid)；镓；羟基脲；香菇多糖(lentinan)；lonidainine；美登木素生物碱(maytansinoids)，例如美登素(maytansine)和安丝菌素(ansamitocins)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；mopidanmol；nitraerine；喷司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；2-乙基酰肼(2-ethylhydrazide)；丙卡巴肼(procarbazine)；

多糖复合物(JHS Natural 

Products,Eugene,OR)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西佐喃(sizofiran)；螺旋锗(spirogermanium)；细格孢氮杂酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2\"-三氯三乙胺；单端孢霉烯(trichothecenes)(特别是T-2毒素、verracurin A、杆孢菌素A和anguidine)；乌拉坦(urethan)；长春地辛(vindesine)

达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀

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(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(“Ara-C”)；噻替派(thiotepa)；紫杉烷类(taxoids)，例如紫杉醇

紫杉醇的白蛋白工程化纳米颗粒制剂，也称为nab-紫杉醇

苯丁酸氮芥

(ABRAXANETM)和多西他赛(doxetaxel)

(chloranbucil)；6-硫鸟嘌呤(6-thioguanine)；巯基嘌呤(mercaptopurine)；甲氨蝶呤(methotrexate)；铂类似物，例如顺铂和卡铂；长春花碱

铂；依托泊苷

(etoposide)(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌(mitoxantrone)；长春新碱

奥沙利铂；leucovovin；长春瑞滨

诺消灵

(novantrone)；依达曲沙(edatrexate)；道诺霉素(daunomycin)；氨基蝶呤；伊班膦酸盐(ibandronate)；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；维甲酸类，例如视黄酸；上述任何一种的药学上可接受的盐、酸或衍生物；以及上述两种或更多种的组合，例如CHOP(环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松龙(prednisolone)的组合疗法的缩写)、FOLFOX(使用与5-FU和leucovovin组合的奥沙利铂(ELOXATINTM)的治疗方案的缩写)以及FOLFOXIRI(使用伊立替康、奥沙利铂和5-氟尿嘧啶的治疗方案的缩写)。[0170]化学治疗剂的其它实例包括用于调节、减少、阻断或抑制可促进癌症生长的激素的作用并且通常呈系统或全身治疗的形式的抗激素剂。它们可能是激素本身。实例包括抗雌激素和选择性雌激素受体调节剂(SERM)，包括例如他莫昔芬(tamoxifen)(包括

他莫昔芬)、雷洛昔芬(raloxifene)

(onapristone)和托瑞米芬(toremifene)

调剂(ERD)；雌激素受体拮抗剂，如氟维司群(fulvestrant)(leuprolide acetate)(

和

屈洛昔芬

抗孕酮类；雌激素受体下

用于抑

)、醋酸戈舍瑞林(goserelin 

(droloxifene)、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、keoxifene、LY117018、奥那司酮

制或关闭卵巢的药剂，例如促黄体激素释放激素(LHRFI)激动剂，例如醋酸亮丙瑞林acetate)、醋酸布舍瑞林(buserelin acetate)和tripterelin；抗雄激素类，例如氟他胺(fiutamide)、尼鲁米特(nilutamide)和比卡鲁胺(bicalutamide)；和抑制调节肾上腺中的雌激素产生的芳香酶的芳香酶抑制剂，例如4(5)-咪唑、氨鲁米特(aminoglutethimide)、醋酸甲地孕酮

依西美坦(exemestane)

来曲唑此外，

或

formestanie、法倔唑(fadrozole)、伏氯唑(vorozole)(letrozole)

和阿那曲唑(anastrozole)

化学治疗剂的这种定义包括双膦酸盐，例如氯膦酸盐(例如

)、依替膦酸盐

阿伦膦酸盐替鲁膦酸盐

NE-58095、唑来膦酸/唑来膦酸盐帕米膦酸盐或利塞膦酸盐

以及曲沙他滨(troxacitabine)(1,3-二氧戊环核苷胞嘧啶类似物)；疫苗，例如

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疫苗和基因治疗疫苗，例如疫苗和

疫苗；拓扑异构酶1抑制剂(例如

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疫苗、

)；抗雌激素，例如氟维司群(fulvestrant)；伊立替康；rmRH(例如)；17AAG(作为热休克蛋白(Hsp)90毒物的格尔德霉素衍生物)，以及上述

任何一种的药学上可接受的盐、酸或衍生物。

[0171]如本文所使用的“基于铂的化学疗法”是指其中至少一种化学治疗剂是铂的配位络合物的化学疗法。示例性的基于铂的化学疗法包括但不限于顺铂，卡铂，奥沙利铂，奈达铂(nedaplatin)，与顺铂组合的吉西他滨，与培美曲美(pemetremed)组合的卡铂。[0172]如本文所使用的“靶向治疗剂”包括指通过干扰致癌和肿瘤生长所需的特定靶向分子而不是简单地干扰所有快速的细胞(例如，采用传统化学疗法)来阻断癌细胞生长的分子，包括但不限于受体酪氨酸激酶靶向治疗剂(例如，卡博替尼(cabozantinib)、克唑替尼(crizotinib)、厄洛替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、伊马替尼(imatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、尼洛替尼(nilotinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、雷戈非尼(regorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)和曲妥珠单抗(trastuzumab))，信号转导途径抑制剂(例如，Ras-Raf-MEK-ERK途径抑制剂(例如，索拉非尼(sorafenib)、曲美替尼(trametinib)、维莫非尼)，PI3K-Akt-mTOR-S6K途径抑制剂(例如，依维莫司(everolimus)、雷帕霉素(rapamycin)、哌立福新(perifosine)、替西罗莫司(temsirolimus))和细胞凋亡途径的调节剂(例如，obataclax)和靶向血管生成的疗法(例如，阿柏西普(aflibercept)和贝伐单抗(bevacizumab))。在一个实施方案中，在一段时间之前向患者施用的一种或多种治疗剂是化学疗法。在一个实施方案中，化学疗法选自基于铂的化学疗法和含氟嘧啶的疗法中的一种或多种。在一个实施方案中，在一段时间之前向患者施用的一种或多种治疗剂是基于铂的化学疗法。在一个实施方案中，在一段时间之前向患者施用的一种或多种治疗剂是含氟嘧啶的化学疗法(例如，氟尿嘧啶(5-FU))。在一个实施方案中，在一段时间之前向患者施用的一种或多种治疗剂是FOLFIRINOX(亚叶酸(甲酰四氢叶酸)、氟尿嘧啶(5-FU)、伊立替康和奥沙利铂的化学疗法治疗方案)。在一个实施方案中，在一段时间之前向患者施用的一种或多种治疗剂是FOLFOXIRI(伊立替康和奥沙利铂加5-氟尿嘧啶的化学疗法方案)。在一个实施方案中，癌症在用基于铂的化学疗法预先治疗后已进展。

[0173]在本文描述的任何方法的一些实施方案中，在一段时间之前向患者施用的一种或多种治疗剂是不成功的(例如，如由医师确定的治疗不成功)。[0174]在一个实施方案中，在一段时间之前向患者施用的一种或多种治疗剂包括血管生成靶向剂。

[0175]在一个实施方案中，在一段时间之前已对患者施用手术。手术的非性实例包括例如开放手术或微创手术。手术可以包括例如去除整个肿瘤、肿瘤的减瘤或去除引起受试者的疼痛或压力的肿瘤。对患有癌症的受试者进行开放手术和微创手术的方法是本领域已知的。

[0176]在一个实施方案中，在一段时间之前患者已接受放射疗法。放射疗法的非性实例包括外部放射束疗法(例如，使用千伏X射线或兆伏X射线的外部束疗法)或内部放射疗

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法。内部放射疗法(也称为近距离放射疗法)可包括使用例如低剂量内部放射疗法或高剂量内部放射疗法。低剂量内部放射疗法包括例如将小的放射性颗粒(也称为种子)插入受试者的癌组织中或癌组织附近。高剂量内部放射疗法包括例如将细管(例如，导管)或植入物插入受试者的癌组织中或癌组织附近，并使用放射仪将高剂量的放射传送至细管或植入物。对患有癌症的受试者进行放射疗法的方法是本领域已知的。[0177]在一个实施方案中，MEK抑制剂是作为游离碱的比美替尼。在一个实施方案中，MEK抑制剂为比美替尼的药学上可接受的盐。在一个实施方案中，MEK抑制剂是结晶的比美替尼。在一个实施方案中，在一段时间内口服施用比美替尼。在一个实施方案中，在一段时间内将比美替尼作为片剂施用。在一个实施方案中，比美替尼的片剂包含约5mg至约50mg(例如，5mg至约45mg、约5mg至约40mg、约5mg至约35mg、约5mg至约30mg、约5mg至约25mg、约5mg至约20mg、约5mg至约18mg、约5mg至约16mg、约5mg至约14mg、约5mg至约12mg、约5mg至约10mg、约5mg至约8mg、约10mg至约50mg、约10mg至约45mg、约10mg至约40mg、约10mg至约35mg、约10mg至约30mg、约10mg至约25mg、约10mg至约20mg、约10mg至约18mg、约10mg至约16mg、约10mg至约14mg、约10mg至约12mg、约12mg至约50mg、约12mg至约45mg、约12mg至约45mg、约12mg至约40mg、约12mg至约35mg、约12mg至约30mg、约12mg至约25mg、约12mg至约20mg、约12mg至约18mg、约12mg至约16mg、约12mg至约14mg、约14mg至约50mg、约14mg至约45mg、约14mg至约40mg、约14mg至约35mg、约14mg至约30mg、约14mg至约25mg、约14mg至约20mg、约14mg至约18mg、约14mg至约16mg、约16mg至约50mg、约16mg至约45mg、约16mg至约40mg、约16mg至约35mg、约16mg至约30mg、约16mg至约25mg、约16mg至约20mg、约16mg至约18mg、约18mg至约50mg、约18mg至约45mg、约18mg至约40mg、约18mg至约35mg、约18mg至约30mg、约18mg至约25mg、约18mg至约20mg、约20mg至约50mg、约20mg至约45mg、约20mg至约40mg、约20mg至约35mg、约20mg至约30mg、约20mg至约25mg、约25mg至约50mg、约25mg至约45mg、约25mg至约40mg、约25mg至约35mg、约25mg至约30mg、约30mg至约50mg、约30mg至约45mg、约30mg至约40mg、约30mg至约35mg、约35mg至约50mg、约35mg至约45mg、约35mg至约40mg、约40mg至约50mg、约40mg至约45mg、约45mg至约50mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg或约50mg)比美替尼或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，比美替尼的片剂包含约5mg至约50mg(例如，本文所述的该范围内的任何子范围或值，例如约15mg)的结晶的比美替尼。在一个实施方案中，在一段时间内每天两次口服施用比美替尼。在一个实施方案中，在一段时间内每天两次口服施用比美替尼，其中在一段时间内，比美替尼的第二剂量在比美替尼的第一剂量后约1小时、约2小时、约3小时、约4小时、约5小时、约6小时、约7小时、约8小时、约9小时、约10小时、约11小时或约12小时(例如，12小时±2小时)施用。在一个实施方案中，在一段时间内，以每天两次约10mg至约100mg(例如，约10mg至约95mg、约10mg至约90mg、约10mg至约85mg、约10mg至约80mg、约10mg至约75mg、约10mg至约70mg、约10mg至约65mg、约10mg至约60mg、约10mg至约55mg、约10mg至约50mg、约10mg至约45mg、约10mg至约40mg、约10mg至约35mg、约10mg至约30mg、约10mg至约25mg、约10mg至约20mg、约10mg至约15mg、约15mg至约100mg、约15mg至约95mg、约15mg至约90mg、约15mg至约85mg、约15mg至约80mg、约15mg至约75mg、约15mg至约70mg、约15mg至约65mg、约15mg至约60mg、约15mg至约55mg、约15mg至约50mg、约15mg至约45mg、约15mg至约40mg、约15mg至约35mg、约15mg至约30mg、约15mg至约25mg、约15mg至约20mg、约20mg至约

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100mg、约20mg至约95mg、约20mg至约90mg、约20mg至约85mg、约20mg至约80mg、约20mg至约75mg、约20mg至约70mg、约20mg至约65mg、约20mg至约60mg、约20mg至约55mg、约20mg至约50mg、约20mg至约45mg、约20mg至约40mg、约20mg至约35mg、约20mg至约30mg、约20mg至约25mg、约25mg至约100mg、约25mg至约95mg、约25mg至约90mg、约25mg至约85mg、约25mg至约80mg、约25mg至约75mg、约25mg至约70mg、约25mg至约65mg、约25mg至约60mg、约25mg至约55mg、约25mg至约50mg、约25mg至约45mg、约25mg至约40mg、约25mg至约35mg、约25mg至约30mg、约30mg至约100mg、约30mg至约95mg、约30mg至约90mg、约30mg至约85mg、约30mg至约80mg、约30mg至约75mg、约30mg至约70mg、约30mg至约65mg、约30mg至约60mg、约30mg至约55mg、约30mg至约50mg、约30mg至约45mg、约30mg至约40mg、约30mg至约35mg、约35mg至约100mg、约35mg至约95mg、约35mg至约90mg、约35mg至约85mg、约35mg至约80mg、约35mg至约75mg、约35mg至约70mg、约35mg至约65mg、约35mg至约60mg、约35mg至约55mg、约35mg至约50mg、约35mg至约45mg、约35mg至约40mg、约40mg至约100mg、约40mg至约95mg、约40mg至约90mg、约40mg至约85mg、约40mg至约80mg、约40mg至约75mg、约40mg至约70mg、约40mg至约65mg、约40mg至约60mg、约40mg至约55mg、约40mg至约50mg、约40mg至约45mg、约45mg至约100mg、约45mg至约95mg、约45mg至约90mg、约45mg至约85mg、约45mg至约80mg、约45mg至约75mg、约45mg至约70mg、约45mg至约65mg、约45mg至约60mg、约45mg至约55mg、约45mg至约50mg、约50mg至约100mg、约50mg至约95mg、约50mg至约90mg、约50mg至约85mg、约50mg至约80mg、约50mg至约75mg、约50mg至约70mg、约50mg至约65mg、约50mg至约60mg、约50mg至约55mg、约55mg至约100mg、约55mg至约95mg、约55mg至约90mg、约55mg至约85mg、约55mg至约80mg、约55mg至约75mg、约55mg至约70mg、约55mg至约65mg、约55mg至约60mg、约60mg至约100mg、约60mg至约95mg、约60mg至约90mg、约60mg至约85mg、约60mg至约80mg、约60mg至约75mg、约60mg至约70mg、约60mg至约65mg、约65mg至约100mg、约65mg至约95mg、约65mg至约90mg、约65mg至约85mg、约65mg至约80mg、约65mg至约75mg、约65mg至约70mg、约70mg至约100mg、约70mg至约95mg、约70mg至约90mg、约70mg至约85mg、约70mg至约80mg、约70mg至约75mg、约75mg至约100mg、约75mg至约95mg、约75mg至约90mg、约75mg至约85mg、约75mg至约80mg、约80mg至约100mg、约80mg至约95mg、约80mg至约90mg、约80mg至约85mg、约85mg至约100mg、约85mg至约95mg、约85mg至约90mg、约90mg至约100mg、约90mg至约95mg、约95mg至约100mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、约75mg、约80mg、约85mg、约90mg、约95mg、或约100mg)BID的量每天口服施用比美替尼。在一个实施方案中，在一段时间内每天两次口服施用30mg比美替尼。在一个实施方案中，在一段时间内每天两次口服施用45mg比美替尼。在一个实施方案中，在一段时间内，在至少一个28天的治疗周期内，以约10mg至约100mg(例如，本文所述的该范围内的任何子范围或值，例如约30mg或约45mg)BID的量每天口服施用比美替尼持续三周，然后不施用比美替尼一周、两周或三周。在一个实施方案中，在一段时间内，在至少一个28天的治疗周期中，以约30mg BID的量每天口服施用比美替尼持续三周，然后不施用比美替尼一周。在一个实施方案中，在一段时间内，在至少一个28天的治疗周期中，以约45mg BID的量每天口服施用比美替尼持续三周，然后不施用比美替尼一周。在一个实施方案中，在一段时间内，每天两次口服施用45mg比美替尼直至观察到不良反应，此后每天两次施用30mg比美替尼。在一个实施方案中，在一段时间内，如果导致剂量降低的不良反应改善至基线并在例

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如长达14天或长达三周或长达四周的时间内保持稳定，则降低剂量至每天两次30mg的患者可以重新增加至每天两次45mg，前提是没有阻止药物重新增加的与比美替尼有关的其他伴随毒性。

[0178]在一些实施方案中，PD-1结合拮抗剂是纳武单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内，以约1mg/mg至约40mg/mg(例如，约1mg/kg至约38mg/kg、约1mg/kg至约36mg/kg、约1mg/kg至约34mg/kg、约1mg/kg至约32mg/kg、约1mg/kg至约30mg/kg、约1mg/kg至约28mg/kg、约1mg/kg至约26mg/kg、约1mg/kg至约24mg/kg、约1mg/kg至约22mg/kg、约1mg/kg至约20mg/kg、约1mg/kg至约18mg/kg、约1mg/kg至约16mg/kg、约1mg/kg至约14mg/kg、约1mg/kg至约12mg/kg、约1mg/kg至约10mg/kg、约1mg/kg至约8mg/kg、约1mg/kg至约6mg/kg、约1mg/kg至约4mg/kg、约2mg/kg至约40mg/kg、约2mg/kg至约38mg/kg、约2mg/kg至约36mg/kg、约2mg/kg至约34mg/kg、约2mg/kg至约32mg/kg、约2mg/kg至约30mg/kg、约2mg/kg至约28mg/kg、约2mg/kg至约26mg/kg、约2mg/kg至约24mg/kg、约2mg/kg至约22mg/kg、约2mg/kg至约20mg/kg、约2mg/kg至约18mg/kg、约2mg/kg至约16mg/kg、约2mg/kg至约14mg/kg、约2mg/kg至约12mg/kg、约2mg/kg至约10mg/kg、约2mg/kg至约8mg/kg、约2mg/kg至约6mg/kg、约2mg/kg至约4mg/kg、约4mg/kg至约40mg/kg、约4mg/kg至约38mg/kg、约4mg/kg至约36mg/kg、约4mg/kg至约34mg/kg、约4mg/kg至约32mg/kg、约4mg/kg至约30mg/kg、约4mg/kg至约28mg/kg、约4mg/kg至约26mg/kg、约4mg/kg至约24mg/kg、约4mg/kg至约22mg/kg、约4mg/kg至约20mg/kg、约4mg/kg至约18mg/kg、约4mg/kg至约16mg/kg、约4mg/kg至约14mg/kg、约4mg/kg至约12mg/kg、约4mg/kg至约10mg/kg、约4mg/kg至约8mg/kg、约4mg/kg至约6mg/kg、约6mg/kg至约40mg/kg、约6mg/kg至约38mg/kg、约6mg/kg至约36mg/kg、约6mg/kg至约34mg/kg、约6mg/kg至约32mg/kg、约6mg/kg至约30mg/kg、约6mg/kg至约28mg/kg、约6mg/kg至约26mg/kg、约6mg/kg至约24mg/kg、约6mg/kg至约22mg/kg、约6mg/kg至约20mg/kg、约6mg/kg至约18mg/kg、约6mg/kg至约16mg/kg、约6mg/kg至约14mg/kg、约6mg/kg至约12mg/kg、约6mg/kg至约10mg/kg、约6mg/kg至约8mg/kg、约8mg/kg至约40mg/kg、约8mg/kg至约38mg/kg、约8mg/kg至约36mg/kg、约8mg/kg至约34mg/kg、约8mg/kg至约32mg/kg、约8mg/kg至约30mg/kg、约8mg/kg至约28mg/kg、约8mg/kg至约26mg/kg、约8mg/kg至约24mg/kg、约8mg/kg至约22mg/kg、约8mg/kg至约20mg/kg、约8mg/kg至约18mg/kg、约8mg/kg至约16mg/kg、约8mg/kg至约14mg/kg、约8mg/kg至约12mg/kg、约8mg/kg至约10mg/kg、约10mg/kg至约40mg/kg、约10mg/kg至约38mg/kg、约10mg/kg至约36mg/kg、约10mg/kg至约34mg/kg、约10mg/kg至约32mg/kg、约10mg/kg至约30mg/kg、约10mg/kg至约28mg/kg、约10mg/kg至约26mg/kg、约10mg/kg至约24mg/kg、约10mg/kg至约22mg/kg、约10mg/kg至约20mg/kg、约10mg/kg至约18mg/kg、约10mg/kg至约16mg/kg、约10mg/kg至约14mg/kg、约10mg/kg至约12mg/kg、约12mg/kg至约40mg/kg、约12mg/kg至约38mg/kg、约12mg/kg至约36mg/kg、约12mg/kg至约34mg/kg、约12mg/kg至约32mg/kg、约12mg/kg至约30mg/kg、约12mg/kg至约28mg/kg、约12mg/kg至约26mg/kg、约12mg/kg至约24mg/kg、约12mg/kg至约22mg/kg、约12mg/kg至约20mg/kg、约12mg/kg至约18mg/kg、约12mg/kg至约16mg/kg、约12mg/kg至约14mg/kg、约14mg/kg至约40mg/kg、约14mg/kg至约38mg/kg、约14mg/kg至约36mg/kg、约14mg/kg至约34mg/kg、约14mg/kg至约32mg/kg、约14mg/kg至约30mg/kg、约14mg/kg至约28mg/kg、约14mg/kg至约26mg/kg、约14mg/kg至约24mg/kg、约14mg/kg至约22mg/kg、约

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14mg/kg至约20mg/kg、约14mg/kg至约18mg/kg、约14mg/kg至约16mg/kg、约16mg/kg至约40mg/kg、约16mg/kg至约38mg/kg、约16mg/kg至约36mg/kg、约16mg/kg至约34mg/kg、约16mg/kg至约32mg/kg、约16mg/kg至约30mg/kg、约16mg/kg至约28mg/kg、约16mg/kg至约26mg/kg、约16mg/kg至约24mg/kg、约16mg/kg至约22mg/kg、约16mg/kg至约20mg/kg、约16mg/kg至约18mg/kg、约18mg/kg至约40mg/kg、约18mg/kg至约38mg/kg、约18mg/kg至约36mg/kg、约18mg/kg至约34mg/kg、约18mg/kg至约32mg/kg、约18mg/kg至约30mg/kg、约18mg/kg至约28mg/kg、约18mg/kg至约26mg/kg、约18mg/kg至约24mg/kg、约18mg/kg至约22mg/kg、约18mg/kg至约20mg/kg、约20mg/kg至约40mg/kg、约20mg/kg至约38mg/kg、约20mg/kg至约36mg/kg、约20mg/kg至约34mg/kg、约20mg/kg至约32mg/kg、约20mg/kg至约30mg/kg、约20mg/kg至约28mg/kg、约20mg/kg至约26mg/kg、约20mg/kg至约24mg/kg、约20mg/kg至约22mg/kg、约22mg/kg至约40mg/kg、约22mg/kg至约38mg/kg、约22mg/kg至约36mg/kg、约22mg/kg至约34mg/kg、约22mg/kg至约32mg/kg、约22mg/kg至约30mg/kg、约22mg/kg至约28mg/kg、约22mg/kg至约26mg/kg、约22mg/kg至约24mg/kg、约24mg/kg至约40mg/kg、约24mg/kg至约38mg/kg、约24mg/kg至约36mg/kg、约24mg/kg至约34mg/kg、约24mg/kg至约32mg/kg、约24mg/kg至约30mg/kg、约24mg/kg至约28mg/kg、约24mg/kg至约26mg/kg、约26mg/kg至约40mg/kg、约26mg/kg至约38mg/kg、约26mg/kg至约36mg/kg、约26mg/kg至约34mg/kg、约26mg/kg至约32mg/kg、约26mg/kg至约30mg/kg、约26mg/kg至约28mg/kg、约28mg/kg至约40mg/kg、约28mg/kg至约38mg/kg、约28mg/kg至约36mg/kg、约28mg/kg至约34mg/kg、约28mg/kg至约32mg/kg、约28mg/kg至约30mg/kg、约30mg/kg至约40mg/kg、约30mg/kg至约38mg/kg、约30mg/kg至约36mg/kg、约30mg/kg至约34mg/kg、约30mg/kg至约32mg/kg、约32mg/kg至约40mg/kg、约32mg/kg至约38mg/kg、约32mg/kg至约36mg/kg、约32mg/kg至约34mg/kg、约34mg/kg至约40mg/kg、约34mg/kg至约38mg/kg、约34mg/kg至约36mg/kg、约36mg/kg至约40mg/kg、约36mg/kg至约38mg/kg、约38mg/kg至约40mg/kg、约1mg/kg、约2mg/kg、约3mg/kg、约4mg/kg、约5mg/kg、约6mg/kg、约7mg/kg、约8mg/kg、约9mg/kg、约10mg/kg、约11mg/kg、约12mg/kg、约13mg/kg、约14mg/kg、约15mg/kg、约16mg/kg、约17mg/kg、约18mg/kg、约19mg/kg或约20mg/kg)的剂量以约7天(±2天)、约14天(±2天)或约21天(±2天)或约30天(±2天)的间隔静脉内施用纳武单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内，以约3mg/kg的剂量静脉内施用纳武单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内，以约20mg至约500mg(例如，约20mg至约480mg、约20mg至约460mg、约20mg至约440mg、约20mg至约420mg、约20mg至约400mg、约20mg至约380mg、约20mg至约360mg、约20mg至约340mg、约20mg至约320mg、约20mg至约300mg、约20mg至约280mg、约20mg至约260mg、约20mg至约240mg、约20mg至约220mg、约20mg至约200mg、约20mg至约180mg、约20mg至约160mg、约20mg至约140mg、约20mg至约120mg、约20mg至约100mg、约20mg至约80mg、约20mg至约60mg、约20mg至约40mg、约40mg至约500mg、约40mg至约480mg、约40mg至约460mg、约40mg至约440mg、约40mg至约420mg、约40mg至约400mg、约40mg至约380mg、约40mg至约360mg、约40mg至约340mg、约40mg至约320mg、约40mg至约300mg、约40mg至约280mg、约40mg至约260mg、约40mg至约240mg、约40mg至约220mg、约40mg至约200mg、约40mg至约180mg、约40mg至约160mg、约40mg至约140mg、约40mg至约120mg、约40mg至约100mg、约40mg至约80mg、约40mg至约60mg、约60mg至约500mg、约60mg至约480mg、约

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60mg至约460mg、约60mg至约440mg、约60mg至约420mg、约60mg至约400mg、约60mg至约380mg、约60mg至约360mg、约60mg至约340mg、约60mg至约320mg、约60mg至约300mg、约60mg至约280mg、约60mg至约260mg、约60mg至约240mg、约60mg至约220mg、约60mg至约200mg、约60mg至约180mg、约60mg至约160mg、约60mg至约140mg、约60mg至约120mg、约60mg至约100mg、约60mg至约80mg、约80mg至约500mg、约80mg至约480mg、约80mg至约460mg、约80mg至约440mg、约80mg至约420mg、约80mg至约400mg、约80mg至约380mg、约80mg至约360mg、约80mg至约340mg、约80mg至约320mg、约80mg至约300mg、约80mg至约280mg、约80mg至约260mg、约80mg至约240mg、约80mg至约220mg、约80mg至约200mg、约80mg至约180mg、约80mg至约160mg、约80mg至约140mg、约80mg至约120mg、约80mg至约100mg、约100mg至约500mg、约100mg至约480mg、约100mg至约460mg、约100mg至约440mg、约100mg至约420mg、约100mg至约400mg、约100mg至约380mg、约100mg至约360mg、约100mg至约340mg、约100mg至约320mg、约100mg至约300mg、约100mg至约280mg、约100mg至约260mg、约100mg至约240mg、约100mg至约220mg、约100mg至约200mg、约100mg至约180mg、约100mg至约160mg、约100mg至约140mg、约100mg至约120mg、约120mg至约500mg、约120mg至约480mg、约120mg至约460mg、约120mg至约440mg、约120mg至约420mg、约120mg至约400mg、约120mg至约380mg、约120mg至约360mg、约120mg至约340mg、约120mg至约320mg、约120mg至约300mg、约120mg至约280mg、约120mg至约260mg、约120mg至约240mg、约120mg至约220mg、约120mg至约200mg、约120mg至约180mg、约120mg至约160mg、约120mg至约140mg、约140mg至约500mg、约140mg至约480mg、约140mg至约460mg、约140mg至约440mg、约140mg至约420mg、约140mg至约400mg、约140mg至约380mg、约140mg至约360mg、约140mg至约340mg、约140mg至约320mg、约140mg至约300mg、约140mg至约280mg、约140mg至约260mg、约140mg至约240mg、约140mg至约220mg、约140mg至约200mg、约140mg至约180mg、约140mg至约160mg、约160mg至约500mg、约160mg至约480mg、约160mg至约460mg、约160mg至约440mg、约160mg至约420mg、约160mg至约400mg、约160mg至约380mg、约160mg至约360mg、约160mg至约340mg、约160mg至约320mg、约160mg至约300mg、约160mg至约280mg、约160mg至约260mg、约160mg至约240mg、约160mg至约220mg、约160mg至约200mg、约160mg至约180mg、约180mg至约500mg、约180mg至约480mg、约180mg至约460mg、约180mg至约440mg、约180mg至约420mg、约180mg至约400mg、约180mg至约380mg、约180mg至约360mg、约180mg至约340mg、约180mg至约320mg、约180mg至约300mg、约180mg至约280mg、约180mg至约260mg、约180mg至约240mg、约180mg至约220mg、约180mg至约200mg、约200mg至约500mg、约200mg至约480mg、约200mg至约460mg、约200mg至约440mg、约200mg至约420mg、约200mg至约400mg、约200mg至约380mg、约200mg至约360mg、约200mg至约340mg、约200mg至约320mg、约200mg至约300mg、约200mg至约280mg、约200mg至约260mg、约200mg至约240mg、约200mg至约220mg、约220mg至约500mg、约220mg至约480mg、约220mg至约460mg、约220mg至约440mg、约220mg至约420mg、约220mg至约400mg、约220mg至约380mg、约220mg至约360mg、约220mg至约340mg、约220mg至约320mg、约220mg至约300mg、约220mg至约280mg、约220mg至约260mg、约220mg至约240mg、约240mg至约500mg、约240mg至约480mg、约240mg至约460mg、约240mg至约440mg、约240mg至约420mg、约240mg至约400mg、约240mg至约380mg、约240mg至约360mg、约240mg至约340mg、约240mg至约320mg、约240mg至约300mg、约240mg至约280mg、约240mg至约260mg、约260mg至约500mg、约260mg至约480mg、约260mg至约460mg、约260mg至约440mg、约

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260mg至约420mg、约260mg至约400mg、约260mg至约380mg、约260mg至约360mg、约260mg至约340mg、约260mg至约320mg、约260mg至约300mg、约260mg至约280mg、约280mg至约500mg、约280mg至约480mg、约280mg至约460mg、约280mg至约440mg、约280mg至约420mg、约280mg至约400mg、约280mg至约380mg、约280mg至约360mg、约280mg至约340mg、约280mg至约320mg、约280mg至约300mg、约300mg至约500mg、约300mg至约480mg、约300mg至约460mg、约300mg至约440mg、约300mg至约420mg、约300mg至约400mg、约300mg至约380mg、约300mg至约360mg、约300mg至约340mg、约300mg至约320mg、约320mg至约500mg、约320mg至约480mg、约320mg至约460mg、约320mg至约440mg、约320mg至约420mg、约320mg至约400mg、约320mg至约380mg、约320mg至约360mg、约320mg至约340mg、约340mg至约500mg、约340mg至约480mg、约340mg至约460mg、约340mg至约440mg、约340mg至约420mg、约340mg至约400mg、约340mg至约380mg、约340mg至约360mg、约360mg至约500mg、约360mg至约480mg、约360mg至约460mg、约360mg至约440mg、约360mg至约420mg、约360mg至约400mg、约360mg至约380mg、约380mg至约500mg、约380mg至约480mg、约380mg至约460mg、约380mg至约440mg、约380mg至约420mg、约380mg至约400mg、约400mg至约500mg、约400mg至约480mg、约400mg至约460mg、约400mg至约440mg、约400mg至约420mg、约420mg至约500mg、约420mg至约480mg、约420mg至约460mg、约420mg至约440mg、约440mg至约500mg、约440mg至约480mg、约440mg至约460mg、约460mg至约500mg、约460mg至约480mg、约480mg至约500mg、约80mg、约150mg、约160mg、约200mg、约240mg、约250mg或约300mg)的固定剂量(flat dose)以约7天(±2天)、约14天(±2天)或约21天(±2天)或约30天(±2天)的间隔静脉内施用纳武单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内，以约240mg的固定剂量静脉内施用纳武单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内，每两周在60分钟内静脉内施用纳武单抗或其生物类似物。[0179]在一些实施方案中，PD-1结合拮抗剂是派姆单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内，以约1mg/mg至约40mg/mg(例如，或本文所述的该范围内的任何子范围，例如约1、2、3，4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20mg/kg)以约7天(±2天)、约14天(±2天)或约21天(±2天)或约30天(±2天)的间隔静脉内施用派姆单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内，以约2mg/kg的剂量静脉内施用派姆单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内，以约20mg至约500mg(例如，或本文所述的该范围内的任何子范围，例如约80、150、160、200、240、250或300mg)的固定剂量以约7天(±2天)、约14天(±2天)或约21天(±2天)或约30天(±2天)的间隔静脉内施用派姆单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内，以约200mg的固定剂量静脉内施用派姆单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内，每三周静脉内施用派姆单抗或其生物类似物。

[0180]在一个实施方案中，本发明提供了一种用于治疗癌症的方法，该方法包括在一段时间内向有此需要的患者施用组合疗法或基本上由其组成，所述组合疗法基本上由地或组合地治疗有效量的MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂组成或由其组成，其中MEK抑制剂为比美替尼或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，MEK抑制剂是作为游离碱的比美替尼。在一个实施方案中，MEK抑制剂是结晶的比美替尼。在一个实施方案中，在一段时间内，每天两次(BID)以(i)约10mg至约100mg(例如，本文所述的该范围内的任何子范围或值)约30mg或约45mg)的量每天口服施用比美替尼或(ii)在至少一个28天的治疗周期中以约10mg至约

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100mg(例如，本文所述的该范围内的任何子范围或值，例如约30mg或约45mg)BID的量每天口服施用比美替尼持续3周然后不施用比美替尼1周。在一个实施方案中，PD-1结合拮抗剂是纳武单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，PD-1结合拮抗剂是派姆单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂的量一起在癌症的治疗中(例如，在一段时间内)实现协同作用。在一个实施方案中，在一段时间之前，患者先前用一种或多种治疗剂治疗(例如使用另一种抗癌治疗的至少一种治疗)。[0181]在一个实施方案中，用于治疗癌症的方法包括在一段时间内向有此需要的患者施用组合疗法或基本上由其组成，所述组合疗法基本上由地或组合地治疗有效量的(a)MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)和(b)PD-1结合拮抗剂(其是纳武单抗或其生物类似物)组成或由其组成，其中纳武单抗或其生物类似物在一段时间内每两周静脉内施用。在一个实施方案中，在一段时间内，以约3mg/kg的剂量静脉内施用纳武单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内，以约240mg的固定剂量静脉内施用纳武单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，比美替尼和纳武单抗或其生物类似物的量一起在癌症的治疗中(例如，在一段时间内)实现协同作用。在一个实施方案中，在一段时间之前，患者先前用一种或多种治疗剂治疗(例如使用另一种抗癌治疗的至少一种治疗)。[0182]在一个实施方案中，用于治疗癌症的方法包括在一段时间内向有此需要的患者施用组合疗法或基本上由其组成，所述组合疗法基本上由地或组合地治疗有效量的(a)MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)和(b)PD-1结合拮抗剂(其是派姆单抗或其生物类似物)组成或由其组成，其中派姆单抗或其生物类似物在一段时间内每三周静脉内施用。在一个实施方案中，在一段时间内，以约2mg/kg的剂量静脉内施用派姆单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内，以约200mg的固定剂量静脉内施用派姆单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，比美替尼和纳武单抗或其生物类似物的量一起在癌症的治疗中(例如，在一段时间内)实现协同作用。在一个实施方案中，在一个实施方案中，在一段时间之前，患者先前用一种或多种治疗剂治疗(例如使用另一种抗癌治疗的至少一种治疗)。

[0183]在一个实施方案中，用于治疗癌症的方法包括在一段时间内向有此需要的患者施用组合疗法或基本上由其组成，所述组合疗法基本上由地或组合地治疗有效量的(a)MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)和(b)PD-1结合拮抗剂(其为纳武单抗或其生物类似物)组成或由其组成，其中在一段时间内，以(i)约30mg BID或约45mg每天两次(BID)的量每天口服施用比美替尼或(ii)在至少一个28天的治疗周期中以约30mg BID或约45mg BID的量每天口服施用比美替尼持续3周然后不施用比美替尼1周，其中在一段时间内以约3mg/kg的剂量或以约240mg的固定剂量每两周静脉内施用纳武单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，比美替尼和纳武单抗或其生物类似物的量一起在癌症的治疗中(例如，在一段时间内)实现协同作用。在一个实施方案中，在一段时间之前，患者先前用一种或多种治疗剂治疗(例如使用另一种抗癌治疗的至少一种治疗)。[0184]在一个实施方案中，用于治疗癌症的方法包括在一段时间内向有此需要的患者施用组合疗法或基本上由其组成，所述组合疗法基本上由地或组合地治疗有效量的(a)MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)和(b)PD-1结合拮抗剂(其为派姆单抗或其生物类似物)组成或由其组成，其中在一段时间内，每天两次(BID)以(i)约10mg至约

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100mg(例如，本文所述的该范围内的任何子范围或值，例如约30mg或约45mg)的量每天口服施用比美替尼或(ii)在至少一个28天的治疗周期中以约10mg至约100mg(例如，本文所述的该范围内的任何子范围或值，例如约30mg或约45mg)BID的量每天口服施用比美替尼持续3周然后不施用比美替尼1周，其中在一段时间内每三周静脉内施用派姆单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内以约2mg/kg的剂量静脉内施用派姆单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，在一段时间内以约200mg的固定剂量静脉内施用派姆单抗或其生物类似物。在一个实施方案中，比美替尼和派姆单抗或其生物类似物的量一起在癌症的治疗中(例如，在一段时间内)实现协同作用。在一个实施方案中，在一段时间之前，患者先前用一种或多种治疗剂治疗(例如使用另一种抗癌治疗的至少一种治疗)。[0185]在一个实施方案中，本发明涉及一种用于治疗癌症的方法，该方法包括在一段时间内向有此需要的患者施用组合疗法或基本上由其组成，所述组合疗法基本上由一定量的MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)和有效治疗癌症的一定量的PD-1结合拮抗剂组成或由其组成。在另一个实施方案中，本发明涉及一种组合治疗方法，该方法基本上由在一段时间内向有此需要的患者施用MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)和PD-1结合拮抗剂组成。在另一个实施方案中，本发明涉及一种用于治疗癌症的方法，该方法包括在一段时间内向有此需要的患者施用组合疗法或基本上由其组成，所述组合疗法基本上由一定量的MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)和一定量的PD-1结合拮抗剂组成或由其组成，其中所述量一起在癌症的治疗中(例如，在一段时间内)实现协同作用。在另一个实施方案中，本发明涉及一种组合治疗方法，该方法基本上由在一段时间内向有此需要的患者施用MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)和PD-1结合组成，其中所述量提供协同作用(例如，在体内或体外，例如在合适的模型细胞系或动物模型(例如在实施例中描述的那些)中)。在一个实施方案中，本发明的方法或用途涉及基本上由与PD-1结合拮抗剂组合的MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)组成的协同组合疗法。在此段落的所有实施方案的一方面，所述PD-1结合拮抗剂是纳武单抗。在此段落的所有实施方案的一方面，所述PD-1结合拮抗剂是派姆单抗。

[0186]本领域技术人员将能够根据已知方法确定向患者施用的本发明的组合中所用的每种化合物的适当量、剂量或用量，并考虑例如以下因素：年龄、体重、总体健康、施用的化合物、施用途径、需要治疗的癌症的性质和进展以及其他药物的存在。[0187]本发明方法的实践可以通过各种施用或给药方案来完成。本发明的组合的化合物可以同时、顺序或间歇地以任何顺序施用。

[0188]可以根据需要重复施用或给药方案以达到所需的效果。如本文所使用的“连续给药方案”是在没有剂量中断的情况下(例如没有未治疗的天数)的施用或给药方案。在治疗周期之间没有剂量中断的情况下的21天或28天治疗周期的重复是连续给药方案的一个实例。在一个实施方案中，本发明的组合的一种或两种组分可以以连续给药方案施用。[01]在本文所述的组合疗法的任何给药方案的一个实施方案中，在一段时间内，在施用第一剂量的MEK抑制剂后约12小时，施用第二治疗有效剂量的MEK抑制剂。如本文所使用的短语“在施用第一剂量的MEK抑制剂后约12小时”是指在一段时间内，在施用第一剂量的MEK抑制剂后10小时至14小时施用第二剂量的MEK抑制剂。[0190]在一个实施方案中，在本文所述的组合疗法的任何给药方案中，在一段时间内，在

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施用PD-1结合拮抗剂的日子中，在施用治疗有效量的第一治疗有效剂量的MEK抑制剂后至少30分钟施用PD-1结合拮抗剂，其中在一段时间内每天两次施用MEK抑制剂。如本文所使用的短语“至少30分钟后”是指在一段时间内在施用第一剂量的MEK抑制剂后至少5分钟、或至少10分钟、或至少15分钟、或至少20分钟、或至少25分钟、或至少30分钟、或至少35分钟、或至少40分钟、或至少45分钟、或至少50分钟、或至少55分钟、或至少60分钟、或至少65分钟、或至少70分钟、或至少75分钟、或至少80分钟、或至少85分钟、或至少90分钟的一段时间内施用PD-1结合拮抗剂。

[0191]在本文所述的组合疗法的任何给药方案的一个实施方案中，在一段时间内，在施用PD-1结合拮抗剂的日子中，在一段时间内，在施用治疗有效量的第一治疗有效剂量的MEK抑制剂前至少30分钟施用PD-1结合拮抗剂。如本文所使用的短语“至少30分钟后”是指在一段时间内在施用第一剂量的MEK抑制剂之前至少5分钟、或至少10分钟、或至少15分钟、或至少20分钟、或至少25分钟、或至少30分钟、或至少35分钟、或至少40分钟、或至少45分钟、或至少50分钟、或至少55分钟、或至少60分钟、或至少65分钟、或至少70分钟、或至少75分钟、或至少80分钟、或至少85分钟、或至少90分钟的一段时间内施用PD-1结合拮抗剂。[0192]在一个实施方案中，在一段时间内逐步增加MEK抑制剂的剂量直至达到最大耐受剂量，并在一段时间内以固定剂量施用PD-1结合拮抗剂。备选地，可以在一段时间内以固定剂量施用MEK抑制剂，并且在一段时间内可以逐步增加PD-1结合拮抗剂的剂量直至达到最大耐受剂量。

[0193]在一个实施方案中，本文所述的任何组合疗法可进一步包括在一段时间内在施用PD-1结合拮抗剂之前施用一种或多种前药。在一个实施方案中，在MEK抑制剂施用后不超过1小时的一段时间内施用一种或多种前药。在一个实施方案中，在一段时间内，在施用PD-1结合拮抗剂之前30-60分钟施用一种或多种前药。在一个实施方案中，在一段时间内，在施用PD-1结合拮抗剂之前30分钟施用一种或多种前药。在一个实施方案中，所述一种或多种前药选自H1拮抗剂(例如，抗组胺药(例如苯海拉明))和对乙酰氨基酚中的一种或多种。[0194]在一个实施方案中，在一段时间之前向患者施用的一种或多种治疗剂是或包括化学疗法。在一个实施方案中，在一段时间之前向患者施用的一种或多种治疗剂是或包括基于铂的化学疗法。在一个实施方案中，在一段时间之前向患者施用的一种或多种治疗剂是或包括含氟嘧啶的化学疗法。在一个实施方案中，在一段时间之前向患者施用的一种或多种治疗剂是或包括FOLFIRINOX(亚叶酸(甲酰四氢叶酸)、氟尿嘧啶(5-FU)、伊立替康和奥沙利铂的化学疗法方案)。在一个实施方案中，在一段时间之前向患者施用的一种或多种治疗剂是或包括FOLFOXIRI(伊立替康和奥沙利铂加5-氟尿嘧啶的化学疗法)。在一个实施方案中，癌症在用基于铂的化学疗法治疗后已经进展。

[0195]癌症或癌症相关疾病的改善可以表征为完全或部分反应。“完全反应”或“CR”是指临床可检测疾病的不存在，其伴随任何先前异常的放射照像研究、骨髓和脑脊液(CSF)或异常的单克隆蛋白质测量的正常化。“部分反应”是指在没有新病变的情况下，所有可测量的肿瘤负荷(即受试者中存在的恶性细胞的数量，或测量的肿瘤块体积或异常单克隆蛋白的量)减少至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。[0196]可以通过一个或多个临床终点来评估治疗，例如通过疾病进展的抑制，肿瘤生长的抑制，原发性肿瘤的减少，肿瘤相关症状的减轻，肿瘤分泌因子(包括本文已鉴定的检查

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点蛋白的表达水平)的抑制，原发性或继发性肿瘤的延迟出现，原发性或继发性肿瘤的减慢的发展，原发性或继发性肿瘤的降低的发生率，疾病的继发性效应的减慢或降低的严重程度，停滞的肿瘤生长和肿瘤的消退，增加的进展时间(TTP)，改善的肿瘤反应时间(TTR)，增加的反应持续时间(DR)，增加的无进展生存期(PFS)，增加的总生存期(OS)，客观反应率(ORR)等。本文所用的OS是指从治疗开始到因任何原因死亡的时间。本文所使用的TTP是指从治疗开始到肿瘤进展的时间；TTP不包括死亡。如本文所使用的，对于具有确定的客观反应(CR或PR)的患者定义TTR为从随机日期或研究治疗的第一剂量的日期到客观肿瘤反应的第一次记录的时间。如本文所使用的DR是指从记录到肿瘤反应到疾病进展的时间。如本文所使用的PFS是指从治疗开始到肿瘤进展或死亡的时间。如本文所使用的ORR是指肿瘤大小减小预定量并保持最小一段时间的患者的比例，其中反应持续时间通常是从初始反应时间直到记录的肿瘤进展为止进行测量的。在极端情况下，完全抑制在本文中被称为预防或化学预防。

[0197]因此，本文提供了用于实现与使用本文所述的组合疗法来治疗癌症相关的一个或多个临床终点的方法。在一个实施方案中，本文所述的患者在用本文所述的组合进行治疗后可显示出阳性的肿瘤反应(例如，肿瘤生长的抑制或肿瘤大小的减小)。在某些实施方案中，在施用有效量的本文所述的组合疗法后，本文所述的患者可以实现完全反应、部分反应或稳定疾病的实体瘤反应评估标准(例如，RECIST 1.1)。在某些实施方案中，本文所述的患者可显示出增加的存活率而没有肿瘤进展。在一些实施方案中，本文所述的患者可显示出疾病进展的抑制、肿瘤生长的抑制、原发性肿瘤的减少、肿瘤相关症状的减轻、肿瘤分泌因子(包括肿瘤分泌激素，例如促成类癌综合征的那些)的抑制、原发性或继发性肿瘤的延迟出现、原发性或继发性肿瘤的减慢的发展、原发性或继发性肿瘤的降低的发生率、疾病的继发性效应的减慢或降低的严重程度、停滞的肿瘤生长和肿瘤的消退、降低的肿瘤反应时间(TTR)、增加的反应持续时间(DR)、增加的无进展生存期(PFS)、增加的进展时间(TTP)和/或增加的总生存期(OS)等。

[0198]在另一个实施方案中，提供了用于减少患有本文所述癌症的患者的肿瘤反应时间(TTR)、增加反应持续时间(DR)、增加无进展生存期(PFS)的方法，其包括施用有效量的如本文所述的组合疗法。在一个实施方案中，提供了用于减少患有本文所述癌症的患者的肿瘤反应时间(TTR)的方法，其包括施用有效量的本文所述的组合疗法。在一个实施方案中，是用于增加患有本文所述癌症的患者的无进展生存期(PFS)的方法，其包括施用有效量的如本文所述的组合疗法。在一个实施方案中，是用于增加患有本文所述癌症的患者的无进展生存期(PFS)的方法，其包括施用有效量的如本文所述的组合疗法。[0199]在一个实施方案中，根据本发明的治疗癌症的方法还包括手术或放射疗法。手术的非性实例包括例如开放手术或微创手术。手术可以包括例如去除整个肿瘤、肿瘤的减瘤或去除引起受试者的疼痛或压力的肿瘤。对患有癌症的受试者进行开放手术和微创手术的方法是本领域已知的。放射疗法的非性实例包括外部放射束疗法(例如，使用千伏X射线或兆伏X射线的外部束疗法)或内部放射疗法。内部放射疗法(也称为近距离放射疗法)可包括使用例如低剂量内部放射疗法或高剂量内部放射疗法。低剂量内部放射疗法包括例如将小的放射性颗粒(也称为种子)插入受试者的癌组织中或癌组织附近。高剂量内部放射疗法包括例如将细管(例如，导管)或植入物插入受试者的癌组织中或癌组织附近，并

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使用放射仪将高剂量的放射传送至细管或植入物。对患有癌症的受试者进行放射疗法的方法是本领域已知的。

[0200]通过已建立的测试模型可以表明，本文所述的组合疗法导致了本文之前所述的有益效果。本领域技术人员完全能够选择相关的测试模型来证明这种有益效果。本文所述的组合疗法的药理活性可以例如在动物模型和/或临床研究或测试程序(例如如下文所述的)中证明。

[0201]合适的临床研究是例如在患有增生性疾病的患者中进行的开放标签、剂量递增研究。这样的研究可以特别证明本文所述的组合疗法的治疗剂的协同作用。可以直接通过这些研究的结果确定对增生性疾病的有益作用。这样的研究尤其适合于比较使用MEK抑制剂和/或PD-1结合拮抗剂的单一疗法的效果与包含MEK抑制剂和PD-1结合拮抗剂的组合疗法的效果。

[0202]在此类研究中，可以例如在6、12、18或24周后(例如，每6周)，通过评估症状评分来确定治疗的有效性。

[0203]在本文描述的任何方法的一些实施方案中，患者被鉴定为患有具有增加的PD-L1和/或PD-L2蛋白水平(例如与非癌细胞相比)的肿瘤或癌细胞。确定肿瘤(例如，活检样品)或癌细胞中PD-L1和PD-L2的水平的方法是本领域已知的。这样的方法包括例如免疫印迹、蛋白质阵列、质谱、免疫荧光显微镜检查和荧光辅助细胞分选(FACS)。用于确定肿瘤(例如，活检样品)或癌细胞中PD-L1和PD-L2的水平的其他方法是本领域已知的。本文描述的任何方法的一些实施方案还包括将患者鉴定为患有具有增加的PD-L1和/或PD-L2水平的肿瘤或癌细胞，以及选择所鉴定的患者用于使用本文所述的任何方法进行治疗。本文描述的任何方法的一些实施方案可进一步包括选择被鉴定为患有具有增加的PD-L1和/或PD-L2水平的肿瘤或癌细胞的受试者并使用本文所述的任何方法治疗患者的步骤。[0204]在本文描述的任何方法的一些实施方案中，患者被鉴定为患有具有以下的肿瘤或癌细胞：升高的MEK水平、与野生型MEK相比具有增加的活性的突变的MEK、升高的MEK激酶上游的激酶(例如，Ras(KRAS，HRAS和/或NRAS)和/或Raf)的水平或与相应的MEK上游的野生型激酶相比具有增加的活性的突变的MEK上游的激酶(例如，Ras和/或Raf)。[0205]在一些实施方案中，与野生型MEK相比，具有增加的活性的突变的MEK可以例如在选自56(例如，Q56P)和72(例如，S72G)的氨基酸位置处具有一个或多个氨基酸置换。[0206]在一些实施方案中，与野生型KRAS相比，具有增加的活性的突变的KRAS可以例如在氨基酸位置12(例如，G12A、G12R、G12S、G12C、G12D或G12V)、13(例如，G13D或G13C)上具有一个或多个氨基酸置换。

[0207]在一些实施方案中，与野生型HRAS相比，具有增加的活性的突变的HRAS可以例如在氨基酸位置12(例如，G12V)和61(例如，Q61L或Q61R)上具有一个或两个氨基酸置换。[0208]在一些实施方案中，与野生型NRAS相比，具有增加的活性的突变的NRAS可以例如在氨基酸位置12(例如，G12D、G12S或G12V)、13(例如，G13R或G13V)和61(例如，Q61H、Q61K、Q61L或Q61R)中的一个或多个位置上具有氨基酸置换。[0209]在一些实施方案中，与野生型BRAF相比，具有增加的活性的突变BRAF可以例如在氨基酸位置600处(例如，V600E或V600K)具有氨基酸置换。[0210]用于检测肿瘤(例如，活检样品)或癌细胞中MEK、Ras和/或Raf的升高的水平或与

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相应的野生型激酶相比具有升高的活性的突变的MEK、Ras和/或Raf的表达的方法是本领域已知的，并且包括例如核酸测序(例如，PCR)、与标记的DNA探针的荧光原位杂交(FISH)、免疫荧光显微镜检查、免疫印迹、蛋白质组学、质谱和荧光辅助细胞分选。用于检测肿瘤(例如，活检样品)或癌细胞中MEK、Ras和/或Raf的升高的水平或与相应的野生型激酶相比具有升高的活性的突变的MEK、Ras和/或Raf的表达的其他方法是本领域已知的。

[0211]本文描述的任何方法的一些实施方案还包括将患者鉴定为患有具有增加的MEK、Ras和/或Raf水平或表达与相应的野生型激酶相比具有增加的活性的突变的MEK、Ras和/或Raf的肿瘤或癌细胞，以及选择所鉴定的患者用于使用本文描述的任何方法进行治疗。本文描述的任何方法的一些实施方案可以进一步包括选择被鉴定为患有具有增加的MEK、Ras和/或Raf水平或表达与相应的野生型激酶相比具有增加的活性的突变的MEK、Ras和/或Raf的肿瘤或癌细胞的受试者和使用本文描述的任何方法治疗患者的步骤。[0212]在本文描述的任何方法的一些实施方案中，患者被鉴定为患有具有例如与非癌细胞相比降低的I类MHC的水平的肿瘤或癌细胞。用于确定肿瘤(例如，活检样品)或癌细胞中I类MHC的水平的方法是本领域已知的。这样的方法包括例如免疫印迹、蛋白质阵列、质谱、免疫荧光显微镜检查和荧光辅助细胞分选(FACS)。确定肿瘤(例如，活检样品)或癌细胞中I类MHC的水平的其他方法是本领域已知的。本文描述的任何方法的一些实施方案进一步包括将患者鉴定为患有具有降低的I类MHC的水平的肿瘤或癌细胞，以及选择所鉴定的患者用于使用本文描述的任何方法进行治疗。本文描述的任何方法的一些实施方案可以进一步包括选择被鉴定为患有具有降低的I类MHC的水平的肿瘤或癌细胞的受试者并使用本文描述的任何方法治疗患者的步骤。[0213]在一些实施方案中，癌症选自：胰腺癌、乳腺癌(例如，三阴性乳腺癌)、套细胞淋巴瘤、非小细胞肺癌、黑色素瘤、结肠癌、食管癌、脂肪肉瘤、多发性骨髓瘤、T细胞白血病、肾细胞癌、胃癌、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、肝细胞肿瘤、肺癌、结直肠癌、横纹肌样瘤、视网膜母细胞瘤蛋白阳性癌症、胆囊癌、胆管癌、星形细胞瘤、多形胶质母细胞瘤、Bannayan-Zonana综合征、考登病、Lhermitte-Duclos病、威尔姆瘤、尤因肉瘤、横纹肌肉瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、头颈癌、肾脏癌、卵巢癌、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨巨细胞瘤、甲状腺癌、慢性粒细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、毛细胞白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性骨髓性白血病、AML、慢性中性粒细胞白血病、浆细胞瘤、免疫母细胞大细胞白血病、套细胞白血病、巨核细胞白血病、急性巨核细胞白血病、早幼粒细胞白血病、红白血病、恶性淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、成淋巴细胞性T细胞淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、神经母细胞瘤、膀胱癌、尿路上皮癌、晚期尿路上皮膀胱癌、尿路上皮肿瘤、肺癌、外阴癌、宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌、间皮瘤、唾液腺癌、鼻咽癌、颊癌、口腔癌、GIST(胃肠道间质瘤)、NSCLC和睾丸癌。在一些实施方案中，癌症是T细胞浸润性癌症。[0214]在本文描述的任何方法的一些实施方案中，癌症是乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、宫颈癌、急性髓细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、骨髓增生异常、肝细胞癌、特发性骨髓纤维化、髓单核母细胞性白血病、色素沉着的绒毛状滑膜炎、腱鞘巨细胞瘤、多发性骨髓瘤、肺癌、前列腺癌、胃癌、膀胱癌、卡波西肉瘤或卵巢癌。[0215]在本文描述的任何方法的一些实施方案中，癌症是肺癌、非小细胞肺癌(NSCL)、细支气管肺泡细胞肺癌、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内黑色素瘤、子宫癌、卵巢

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癌、直肠癌、肛门区域癌、胃癌、胃肿瘤、结肠癌、乳腺癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、霍奇金病、食管癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、膀胱癌、肾脏或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、间皮瘤、肝细胞癌、胆管癌、中枢神经系统(CNS)赘生物、脊柱肿瘤、脑干神经胶质瘤、多形胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、神经鞘瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、脑膜瘤、鳞状细胞癌、垂体腺瘤、淋巴瘤或淋巴性白血病，包括以上任何癌症的难治性形式。[0216]在一些实施方案中，癌症选自：肾癌、肺癌、头颈癌、经典霍奇金淋巴瘤、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、脑癌、卵巢癌、宫颈癌、睾丸癌、肾癌、淋巴瘤、白血病、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、结肠癌、结肠肿瘤、结直肠癌(例如，微卫星高不稳定性/错配修复缺陷结直肠癌)、皮肤癌、转移性黑色素瘤、乳腺癌、肝癌、肝细胞瘤、胃癌、头颈癌、膀胱癌、血液癌、淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤、骨肉瘤、神经母细胞瘤、神经胶质瘤、多形胶质母细胞瘤、上皮样癌、食管癌和直肠癌。

[0217]本发明的方法或组合的化合物可以在施用前配制。该制剂将优选适合于特定的施用方式。这些化合物可以用本领域已知的药学上可接受的载体配制，并以本领域已知的多种剂型施用。在制备本发明的药物组合物的过程中，通常将活性组分与药学上可接受的载体混合，或用载体稀释或包封在载体中。此类载体包括但不限于固体稀释剂或填充剂、赋形剂、无菌水性介质和各种无毒有机溶剂。剂量单位形式或药物组合物包括包装在适合于细分为单独剂量的容器中的片剂、胶囊剂(例如，明胶胶囊剂)、丸剂、粉剂、颗粒剂、水性和非水性口服溶液和混悬剂、糖锭、锭剂、硬糖剂、喷雾剂、乳膏、药膏、栓剂、果冻剂、凝胶剂、糊剂、洗剂、软膏、可注射溶液、酏剂、糖浆剂和肠胃外溶液。

[0218]肠胃外制剂包括药学上可接受的水性或非水性溶液、分散液、悬浮液、乳剂和用于其制备的无菌粉末。载体的实例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇，聚乙二醇)、植物油和可注射的有机酯(例如，油酸乙酯)。可以通过使用包衣(例如，卵磷脂、表面活性剂)或者保持适当的粒径来维持流动性。示例性肠胃外施用形式包括本发明的化合物在无菌水溶液中的溶液或悬浮液，例如丙二醇水溶液或右旋糖溶液。如果需要，可以适当地缓冲此类剂型。[0219]另外，润滑剂(例如，硬脂酸镁、月桂基硫酸钠和滑石粉)通常可用于压片目的。相似类型的固体组合物也可以用于软和硬填充的明胶胶囊中。因此，优选的材料包括乳糖或奶糖和高分子量聚乙二醇。当需要水性悬浮液或酏剂用于口服施用时，其中的活性化合物可以与各种甜味剂或调味剂、着色剂或染料以及(如果需要)乳化剂或悬浮剂以及稀释剂(例如，水、乙醇、丙二醇、甘油或其组合)一起混合。[0220]用特定量的活性化合物制备各种药物组合物的方法对于本领域技术人员是已知的或将是显而易见的。

[0221]在一个实施方案中，将MEK抑制剂(其为比美替尼或其药学上可接受的盐)配制为用于口服施用。在一个实施方案中，将MEK抑制剂配制为片剂或胶囊剂。在一个实施方案中，将MEK抑制剂配制为片剂。在一个实施方案中，片剂是包衣片剂。在一个实施方案中，MEK抑制剂是作为游离碱的比美替尼。在一个实施方案中，MEK抑制剂为比美替尼的药学上可接受的盐。在一个实施方案中，MEK抑制剂是结晶的比美替尼。制备比美替尼的口服制剂的方法在PCT公开号WO 2014/063024中进行了描述。在一个实施方案中，比美替尼的片剂包含15mg比美替尼。在一个实施方案中，比美替尼的片剂包含15mg结晶的比美替尼。在一个实施方案

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中，比美替尼的片剂包含45mg比美替尼。在一个实施方案中，比美替尼的片剂包含45mg结晶的比美替尼。

[0222]本发明还涉及试剂盒，其包含本发明的组合的治疗剂和用于施用治疗剂的书面说明。在一个实施方案中，书面说明详述和限定了治疗剂的施用方式，例如，用于同时或顺序施用本发明的治疗剂。在一个实施方案中，书面说明详述和限定了治疗剂的施用方式，例如，通过指定在28天的周期中每种治疗剂的施用天数。[0223]尽管已经参考各种应用、方法、试剂盒和组合物描述了所公开的教导，但是应当理解，在不脱离本文的教导和以下要求保护的发明的情况下，可以进行各种改变和修改。提供前述示例以更好地举例说明所公开的教导，并不旨在本文所呈现的教导的范围。尽管已经根据这些示例性实施方案描述了本教导内容，但是本领域技术人员将容易理解，可以对这些示例性实施方案进行多种变化和修改而无需过多的实验。所有这些变化和修改都在当前教导的范围内。

[0224]本文所引用的所有参考文献，包括专利、专利申请、论文、教科书等以及其中所引用的参考文献，就其尚未被引用而言，通过引用整体并入本文。如果所并入的文献和类似材料中的一个或多个与本申请不同或相矛盾，包括但不限于所定义的术语、术语用法、所描述的技术等，则以本申请为准。

[0225]前面的描述和实例详述了本发明的某些特定实施方案，并描述了发明人所考虑的最佳模式。但是，应当理解，不论前面的内容多么详细地出现在文本中，都可以以许多方式来实践本发明，并且应当根据所附权利要求及其任何等同物来解释本发明。实施例

实施例1.比美替尼对黑色素瘤细胞系中I类MHC表达的影响

[0227]这项研究的目的是测量比米替尼对各种黑色素瘤细胞系中细胞表面I类MHC表达的影响。在这项研究中，评估了八种黑色素瘤细胞系：MEL-JUSO(NRAS Q61L突变)、IPC-298(NRAS Q61L突变)、A375(BRAF V600E、纯合子突变)、HS936.T(NRAS Q61K突变和BRAF N581K突变)、MM485(NRAS Q61R突变)、SK-MEL-2(NRAS Q61R突变)、MM415(NRAS Q61L突变)、Malme-3M(BRAF V600E、杂合突变)。将细胞系以每孔5000个细胞的密度接种到平底96孔组织培养板中，并使其粘附过夜。第二天，将细胞用媒介物对照(0.25％DMSO)或比美替尼的不同稀释液(0.7nM–25000nM)处理1小时。然后将细胞用媒介物对照或100ng/ml IFNγ(R&D systems)处理72小时。洗涤细胞，用胰蛋白酶消化，并用Alexa

7抗人HLA-A,B,C

抗体(W6/32，eBioscience)进行染色，并在BD FACSCanto II流式细胞仪上进行分析。进行IFNg滴定和时间过程以优化测定。该研究的结果显示在图1-12中。在～100ng/mL的IFNγ观察到I类MHC表达的最大诱导(参见，例如图1和2)。如图5A所示，比美替尼处理导致MELJUSO(NRAS Q61L)细胞中I类MHC表达增加2.5倍，而在100ng/mL IFNg存在的情况下，比美替尼处理导致IFNγ诱导的I类MHC表达增强4-5倍。在8种黑色素瘤细胞系中的6种中，比美替尼处理导致I类MHC细胞表面表达增加(增加～1.5-3倍)，以及在所有测试的细胞系中IFNg诱导的I类MHC增强(增加～1.5-4倍)(表3)。[0228]表3.I类MHC表达的最大倍数增加

[0226]

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[0229]

实施例2.评估比美替尼和α-PD-1组合功效对BALB/c小鼠中KRas突变CT26鼠结肠

同基因肿瘤的生长的顺序依赖性的探索性研究

[0231]PD-1/PDL-1途径通过多种机制(诱导T细胞凋亡、促进T细胞衰竭、抑制T细胞增殖等)调节免疫表达。通过PD-1的信号传导阻止功能性CD8+T效应记忆细胞转换为CD8+记忆细胞。这会减少长期免疫记忆(其可能会保护免受未来的转移性疾病)。因此，PD-1/PD-L1途径的抑制可能会增强长期免疫记忆。在同基因小鼠肿瘤模型中评估抗PD-1处理后用肿瘤细胞再攻击的非临床研究表明，响应于活肿瘤细胞的重新引入，肿瘤生长被完全抑制(Lu等人,Journal of Translational Medicine 2014,12:36-47；Sagiv-Barfia等人,PNAS 2015,112:E966-972；Shindo等人,Anticancer research 2015,35:129-136)。[0232]这项研究旨在确定在具有免疫能力的KRas突变性结直肠癌的模型中，MEK162(比美替尼)是否可以与抗PD1组合施用(同时或顺序地)。[0233]实验方法[0234]化合物

[0230]

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通过将960mL蒸馏水加入底部带有搅拌棒的1000mL玻璃瓶中来制备1％

CMC/0.5％Tween-80(CMCT)，并将其用作口服媒介物。将水温热至50-60℃，然后加入5mL的

80(聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯，Sigma P2287，批次#0K01)和15.6mL的苯

甲醇(Sigma 402834，批次#00296PK)。在一小时内缓慢加入羧甲基纤维素(5g，CMC，低粘度，Sigma C5678，批次#033K0008)。搅拌溶液直到CMC溶解并且溶液澄清。将30mg/kg的MEK162(比美替尼，100％活性)制备成白色均匀的CMCT悬浮液。MEK162以10mL/kg施用，并通过口服管饲以30mg/kg(3.0mg/mL)给药。为了制备，称量干燥的测试化合物(90mg)，并添加30mL CMCT。超声处理剂量悬浮液直到获得良好的悬浮液(～15分钟)。在活性期期间将最终剂量悬浮液储存在4℃，并在剂量施用前进行超声处理以重悬。每4-5天或根据需要制备剂量悬浮液。100μgαPD-1RMP1-14、大鼠IgG2a同种型(BioXCell目录号BP0146，批次#5792x2/1015)–7.12mg/mL储备浓度。通过用5.157mL注射用无菌盐水稀释0.843储备液来制备RMP1-14。通过腹膜内注射以100μg/动物(100μL的1mg/mL剂量溶液)施用抗体。[0236]实验动物[0237]从Charles River(Wilmington,MA)获得6-8周龄的雄性BALB/c小鼠，并以每组5只进行饲养。在两周的适应期后，在靠近腋窝区域的动物右侧腹皮下植入在100μL体积盐水中的1x105个细胞的悬浮液。然后将动物随机分配至处理组。在接种CT26肿瘤细胞后第4天开始处理，以允许足够的处理窗口。通过口服管饲(PO)以30mg/kg每天一次(QD)连续14天施用MEK162，并且通过腹膜内注射(IP)每周两次施用抗PD1抗体(表4)。[0238]表4.处理方案

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[0239]

[0240]

将该组合评估为同时施用或顺序施用(其中在抗PD1处理出现肿瘤抗性时开始

MEK162处理)。对于顺序处理组，当抗PD1抗体处理开始后肿瘤达到350-400mm3时，将动物纳入MEK162处理。

[0242]基于生长动力学，每周2-3次监测动物的肿瘤生长和体重。用数字卡尺测量肿瘤直径，并通过以下公式计算以mm3为单位的肿瘤体积：体积＝((宽度)2×长度)/2。在第15天计算TGI。如果发现垂死或如果肿瘤体积超过1400mm3，则将动物从研究中移出。在那时，收获肿瘤组织并冷冻以用于以后通过免疫测序(Adaptive Biotech,San Diego,CA)分析T细胞克隆性。食物、水、温度和湿度均符合药理学测试设施性能标准(SOP)，该标准符合1996年的实验动物护理和使用指南(NRC)和AAALAC-International。

[0243]通过将BALB/c小鼠暴露于N-亚硝基-N-甲基氨基甲酸酯-(NNMU)，于1975年开发出鼠CT26细胞系(又称结肠26或结肠肿瘤#26)(Corbett等人，1975)。从BALB/c小鼠中分离出具有成纤维细胞形态的未分化的结肠癌细胞系。该细胞系可提供广泛的基因组学、免疫表型和治疗背景(信息摘自Bhadury等人,2013,Castle等人,2014)。据报道该细胞系带有KRas 

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G12D突变，并对内部细胞系进行了测序，发现与报道的突变相匹配(BGI,Cambridge,MA)。文献报道了I类MHC但不是MHC II类的表达以及1688个非同义点突变的突变负荷；1个在表达的基因和预测结合MHC的肽中都存在。据报道，这些细胞还具有高表达的突变体gp70(鼠白血病病毒(MuLV)相关的细胞表面抗原(其是研究抗原特异性免疫应答的已知模型抗原)的包膜基因的产物)。

[0244]细胞在5％CO2的潮湿气氛中并使用补充有10％胎牛血清(HyClone SH30088.03，Logan，UT)、100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素(Gibco Life Technologies，15140-122)和2mM Glutamax(Gibco Life Technologies，35050)的RPMI-10生长培养基(Gibco Life Technologies，11875-093)进行生长。植入前，确认细胞为鼠病毒和支原体阴性(IDEXX Laboratories Inc,Westminster,CO)。

[0245]绘制每个实验组按研究日的肿瘤体积和体重的平均值，包括平均值的标准误差的误差棒。肿瘤生长抑制百分比(％TGI)：％TGI＝100(1-Wt/Wc)；Wt是第X天处理组的平均肿瘤体积；Wc是第X天对照的平均肿瘤体积，其中X是对照组作为一个整体可用的最后一天。根据发病、死亡或肿瘤大小超过1400mm3来定义存活。删去因与肿瘤或研究药物施用无关的原因(例如，管饲创伤等)而濒死或被发现死亡的动物。治愈：研究结束时没有可触及的肿瘤的动物被评为治愈。最大体重减轻百分比(％BWL)：％BWL＝100(1-BWt/BW0)；BW0是研究开始时的组平均体重，以及BWt是观察到最大体重减轻的当天的组平均或中位体重。Tx相关的死亡：在生命阶段期间发生的死亡，特别是由于药物施用且不归因于其他原因(例如，管饲创伤、与肿瘤相关的发病等)的死亡。

[0246]向携带KRas突变CT26同基因肿瘤的雄性BALB/c小鼠以单药或组合的形式施用测试物品MEK162和抗PD1(抗鼠PD-1，RMP1-14)。通过口服管饲(PO)以30mg/kg每天一次(QD)连续14天施用MEK162，并通过腹膜内注射(IP)每周两次施用抗PD1。将该组合评估为同时施用或顺序施用(其中在抗PD1处理出现肿瘤抗性时开始MEK162处理)。本研究中采用的剂量和方案以＜1％的最大体重减轻在所有组中耐受良好，并且没有归因于测试物品施用的死亡。[0247]MEK162和抗PD1作为单药在该模型中的不是非常有效，导致些许的肿瘤生长抑制(<50％肿瘤生长抑制(TGI))和中位生存期改善(26天相对媒介物对照的18天)(表5)。MEK162处理导致43％的肿瘤生长抑制(TGI)，26天的中位生存期(与媒介物处理的动物的18天相比)且无治愈(图13A-B)。抗PD1抗体处理与41％TGI相似，中位生存期为26天，但2/10只动物在研究结束时没有可触及的肿瘤(治愈)。[0248]当以同时组合施用时，活性明显改善(85％TGI，32天的中位生存期)。当顺序施用时(抗PD1，然后在肿瘤重新生长至400mm3时，抗MEK162)，活性类似于单药组(44％TGI，26天的生存期，1/10治愈)。当在抗PD1抗体耐药性出现后施用时，MEK162活性对个体动物肿瘤生长的特异性作用是适中的。在开始MEK162治疗时，只有3只动物显示肿瘤大小有任何减小(图13C)。在研究结束时，同时组合还具有最高数量的动物，所有组中没有可触及的肿瘤(图13A-B)。

[0249]表5.CT26肿瘤的结果总结

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实施例3.比美替尼对T细胞库的影响

[0252]进行流式细胞术分析以对各种同基因模型中的浸润的肿瘤免疫进行分型：发展4T1肿瘤、B16F10肿瘤、P815肿瘤、CT26肿瘤、EMT6肿瘤、LLC1肿瘤和RENCA肿瘤的小鼠。如图14A-H所示，免疫浸润的分型鉴定出同基因小鼠模型中的异质性。

[0253]通过免疫测序分析来自各组的5/10个肿瘤中的T细胞分数和克隆性来研究组合活性的机制(图15)。为了确定比美替尼对CT26肿瘤的T细胞库的作用，通过使用mmTCRB测定对小鼠肿瘤样品进行调查水平测序，进行小鼠T细胞多样性、克隆性和潜在的生物标志物的丰度的分析。通过测量克隆频率分布的形状来量化单克隆或寡克隆扩增的程度来确定克隆性。值的范围是0到1，其中值接近1表示几乎是单克隆群(克隆性＝1–Pielou均匀度)。[02]如图15所示，结果表明抗PD1和顺序组合组中T细胞分数增加的趋势。相比之下，MEK162单药和与抗PD1抗体的同时疗法显示出T细胞克隆性和T细胞分数降低的趋势。这些数据不支持在该模型中MEK162与抗PD1组合地由于活性的驱动机制改善T细胞克隆性的假设。总体而言，这些数据表明在KRas突变CT26肿瘤中，MEK162与抗PD1的同时施用优于顺序施用，而且进一步地，观察到的活性并非直接由于T细胞分数或克隆性的改善。

[0255]实施例4.程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)/程序性死亡配体(PD-L1)途径的抑制增加免疫介导的抗肿瘤活性

[0256]还使用B16F10黑色素瘤细胞、Cloudman S91黑色素瘤细胞和RENCA肾癌细胞进行了实施例2中所述的研究(图16-18和表6-8)。对于皮下注射RENCA细胞的小鼠，使用退休的雌性繁殖者(23周龄)。在第1、4、8和11天施用200μgαPD-1。所有其他实验步骤与实施例2中使用的相同。

[0257]表6.B16F10肿瘤的结果总结

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[0258]

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表7.Cloudman S91肿瘤的结果总结

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表8.使用退休小鼠(23周龄)的RENCA肿瘤的结果总结

[0263]

[02]

这些研究总结了实施例2的发现，表明用MEK162抑制MEK增加了肿瘤对免疫疗法的

反应性。通过抑制激活诱导的细胞死亡(Ebert等人，Immunity 2016，44：609-621)，用MEK162抑制MEK可以增加肿瘤中活性免疫细胞(例如，CD8+细胞)的数量。用MEK162抑制MEK还可降低肿瘤微环境中免疫抑制因子的表达、增加HLA I类分子的表达并增强肿瘤细胞杀伤，这可能导致肿瘤抗原的释放。

[0265]这些数据支持用MEK162抑制MEK可以增强抗肿瘤免疫应答的假设。因此，当MEK抑制在免疫肿瘤学(IO)疗法后进行或与之组合时，用MEK162抑制MEK导致抗肿瘤活性的增强。

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