维普资讯 http://www.cqvip.com ２００７年１０月 刘凤喜等．Ｆｅｎｔｏｎ法中羟基自由基的测定技术进展 ５ｌ Ｆｅｎｔｏｎ法中羟基自由基的测定技术进展 刘凤喜 李志东 李 娜 孙 娜 肖新程 曲丹丹 （１．大连市环境科学设计研究院，大连１１６０２３；２．沈阳师范大学实验中心，沈阳１１００３４） 摘要Ｆｅｎｔｏｎ法是一种高级氧化技术，简要介绍了羟基自由基（・ＯＨ）的形成及反应机理，并 着重介绍了测定羟基自由基的方法及其发展趋势。 关键词Ｆｅｎｔｏｎ法羟基自由基测定技术废水处理 Ｆｅｎｔｏｎ法是目前废水处理研究较多的一种高 二价铁离（Ｆｅ２ ）和Ｈ Ｏ 间的链式反应催化生成 ・级氧化技术，属于湿式氧化，具有广阔的前景。 Ｆｅｎｔｏｎ法可有效处理酚类、芳胺类、芳烃类、农药 ＯＨ，使苹果酸及其他有机物最终氧化为ＣＯ２和 Ｈ，Ｏ。在反应体系内・ＯＨ首先与有机污染物ＲＨ 反应生成游离基Ｒ・，Ｒ・进一步氧化生成ＣＯ２和 及核废料等难降解有机废水，与其他高级氧化工 艺相比，Ｆｅｎｔｏｎ法具有反应快速、操作简单、可自 动产生絮凝等优点。 羟基自由基（・ＯＨ）是氧化性最强的活性氧自 Ｈ，Ｏ，使有机污染物最终得以降解。 １．３羟基自由基降解废水中有机物的反应机 理［ ～。） 由基。由于・ＯＨ的反应活性大、寿命短（小于 ｌＯ ｓ）、存在浓度低，因此，在有关・ＯＨ的研究 中，其分析测试方法很重要。一些探针试剂如： ２一脱氧一Ｄ一核糖（ＤＲ）、苯甲酸、芳基水杨酸、 ＤＭＳＯ以及自旋捕捉剂等，被用于羟基自由基转 化为易于测定的物质后测定。本文简要介绍了几 Ｆｅｎｔｏｎ试剂法是一种均相催化氧化法。在含 亚铁离子的酸性溶液中投加过氧化氢时，在Ｆｅ 催化剂作用下，Ｈ２Ｏ２能产生２种活泼的氢氧自由 基，从而引发和传播自由基链反应，加快有机物和 还原性物质的氧化。 羟基自由基比其他常用的强氧化剂（如 ＭｎＯ４一，Ｃ１０２）具有更高的电极电势，且电子亲和 能较高。因此，・ＨＯ，、・ＯＨ自由基可与废水中有 机物发生反应，使其分解或改变其电子云密度和 结构，有利于凝聚和吸附过程的进行。 ２羟基自由基测定方法进展 ２．１电子自旋共振法 种常用的测定羟基自由基的方法及其发展趋 势［ ， 。 １羟基自由基的形成及反应机理 １．１羟基自由基的性质 羟基自由基（・ＯＨ）是一种氧化能力很强的自 由基。在已知的氧化剂中，・ＯＨ氧化电位为 ２．８０ Ｖ，仅次于氟的２．８７ ｖ【３－５ ９。它是一种非选 电子自旋共振法（ＥＳＲ）或电子顺磁共振法 择性的氧化剂，易氧化各种有机物和无机物，氧化 效率高，反应速度快。在废水均相和非均相氧化 降解过程中，起氧化作用的主要因素是・ＯＨ。在 生物体内，需氧代谢的氧化还原反应所产生的羟 自由基，可以引发不饱和脂肪酸发生脂质过氧化、 （ＥＰＲ）是１９４５年发展起来的，其主要研究对象为 具有未成对电子的自由基和过渡金属离子及其化 合物。自旋捕捉技术为化学反应中自由基中间体 和生命过程中的短寿命自由基的ＥＳＲ检测技术 开辟了新的途径【８Ｊ。此方法是利用捕捉剂与短寿 核酸断裂、蛋白质和多糖分解，损伤膜结构及功 能 ］。因此，在环境科学、生命科学等领域，已对・ ＯＨ开展了广泛的研究。 １．２羟基自由基的形成机理 命自由基结合转变为相对稳定的自旋加合物，然 后进行ＥＳＲ测定。Ｐｏｕ等【９］用紫外线照射Ｈ２Ｏ２ 产生・ＯＨ，・ＯＨ与ＣＨ３ＣＨ２ＯＨ反应产生ＣＨ３ＣＨＯＨ， 再用自旋捕捉剂ＰＯＢＮ捕获ＣＩ－Ｉ３ＣＨＯＨ，用ＥＳＲ测 收稿日期：２００７．０７—１０。 作者简介：刘风喜，高级工程师，本科，主要从事环境科学 的研究。 过氧化氢与催化剂Ｖｅ２ 构成的氧化体系通 常称为Ｆｅｎｔｏｎ试剂。Ｆｅｎｔｏｎ试剂是１８９４年由 Ｆｅｎｔｏｎ发现，并应用于苹果酸的氧化 ］，其实质是 维普资讯 http://www.cqvip.com 精 细５２ 石油 化工进展 第８卷第１Ｏ期 ＡＤＶＡＮＣＥＳ ＩＮ ＦＩＮＥ ＰＥＴＲＯＣＨＥＭＩＣＡＬＳ 定自旋加合物，该方法可用于生物体内・ＯＨ的检 测。Ｓｔｏｋｅｓ等【１。］用浸渍有该捕捉剂的滤纸捕集空 气中的・ＯＨ，用甲苯萃取后，进行ＥＳＲ测定，检测限 为５×１０４个／ｃｍ３。潘循皙等【１１］采用４一ＰＯＢＮ（ａ一 吡啶基一Ｎ一叔丁基氮碳基．－ａ一氧化物）为自旋 捕集剂，与・ＯＨ自由基反应生成４一ＰＯＢＮ—ＯＨ￣ｔｌ 合物，该加合物的氮氧基团中的Ｎ，将产生初级超 精细，在ＥＳＲ谱中显示为三重峰。８位的Ｈ 与自由基上单电子的相互作用将出现次级。 根据ＥＳＲ谱中超精细常数及谱峰强度，对大 气中・ＯＨ自由基进行定量分析，测定结果的相对 误差约为３５％，比Ｗａｔａｎａｂｅ［１２］的３０％略大。马先 勇等ｕ 用ｔ—ｃ３Ｈ９ＮＯ作自旋捕获剂，用Ｓｅｐ—ｐａｋＣ１８ 作分离柱，用甲醇／水的混合液按不同配比对柱子 进行梯度的洗脱，收集每一洗脱梯度的溶液组分， 然后进行ＥＳＲ测定研究了胞嘧啶水溶液中辐解 的・ＯＨ加合物。由于自旋加合物的寿命仍然很 短，只有几分钟或几十分钟，因此，必须在捕捉自 由基后立即进行ＥＳＲ测定，从而了许多实验 研究。丛建波等【１ ｊ采用液氮（一１９６ ｏＣ）保存・ＯＨ 和・０２一与捕捉剂形成的自旋加合物，从而延长了 自旋加合物的寿命。结果表明，在低温下贮存３— ４ ｃ垢，自旋加合物的浓度基本不变。对于没有 ＥＳＲ测定条件而不能实施ＥＳＲ测定的短寿命自 由基，可选用本方法，选择合适的捕捉剂，捕捉后 立即置于液氮中保存，需要时即取出解冻测定。 杨正红等ｌｌ 】设计了一套无氧装置与电子自旋共 振仪的谐振腔相连，实现了在无氧状态下对活性 自由基中间体的ＥＳＲ研究。该技术克服了连续 流动法消耗样品量过大及低温冷冻法可能造成冷 冻前后顺磁物质的变化。并且不能用于有机自由 基代谢的研究缺点。Ｓｔｏｉｃ等【１６］建立了一种可用 于ＥＳＲ的快速取样技术，用一管状的不锈钢切割 器，切下一个圆柱型的生物组织，将管子推入仪器 中，样品就可直接转移到ＥＳＲ样品管中。该法简 便、快速，取样准确，可根据需要调整样品量，也可 避免外来物，如自旋捕捉剂的使用。 ２．２高效液相色谱法 高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定自由基，在分离 检测前需先用捕捉剂捕集自由基，因此，捕捉剂不 但要能捕获所需测定的自由基，反应产物应具有 一定的稳定性，还要有利于ＨＰＬＣ分离和检测。 Ｒａｏ等【１ 用二甲亚砜（ＤＭＳＯ）和二甲基硫脲作捕 捉剂，在甲硫氨酸或催化酶作用下，与・ＯＨ和 ＨＯ２・作用，Ｒａｄｉｃａｌ—Ｐａｋ Ｃ１８柱，５％甲醇作流动相 （流速为２ ｍＬ／ｍｉｎ）分离，２１４ ｎｍ和２４０ ｎｍ检测，检 测限为５０ ｎｇ／ｍＬ的ＨＯ，・和２００ ｎｇ／ｍＬ・ＯＨ。Ｆｕｋｕｉ 等【１ ８Ｊ用ＤＭＳＯ捕获・ＯＨ生成甲基亚磺酸，再同坚 牢黄ＧＣ盐反应生成２一氯苯重氮甲砜。用乙酸 乙酯萃取后，Ｃａｐｃｅｌｌ—Ｐａｋ ＮＨ２柱，乙醇／正己烷 （体积比为３：ｍｏ）作流动相分离，２８５ ｎｍ检测。用 甲基亚磺酸表示，检测限为８ ｎｇ／ｍｔ。该法适用于 Ｆｅｎｔｏｎ反应和次黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶系统中产 生的・ＯＨ的测定。Ｇａｍｏｈ等【１ ９Ｊ用ＤＭＳＯ捕获・ＯＨ 生成甲基亚磺酸，再同坚牢蓝ＢＢ盐反应生成偶 氮砜。在４０℃，ＳＴＲ—ＯＤＳＩＩ柱，８０％乙腈作流动 相分离，４２０ ｎｍ检测，线性范围达到０．０１ ｍｏｌ／Ｌ。 该法用于Ｆｅｎｔｏｎ反应和紫外光解Ｈ２Ｏ２产生的 ・ＯＨ，也可用于生物体系中・ＯＨ的测定。Ｍｉｃｈｅｌｅ Ｅ．Ｌｉｎｄｓｅｙ等 ］分别用安息香酸作捕捉剂，以 ＰｒＯＨ作猝灭剂，用ＰｒＯＨ作捕捉剂，以含５ ｍＭ二 硝基苯腙（ＤＮＰＨ）的甲基亚砜（ＤＭＳＯ）为猝灭剂， Ｓｐｈｅｆｉｓ ｏｒｂ ＯＤＳ一２柱，ｌ５％一１００％不同配比的乙 腈／水混合溶液梯度洗脱（流速为１．０ ｍＬ／ｍｉｎ）， ２５４ ｎｍ检测，分析了二次蒸馏水、含不同体积比 Ｍａｕｒｅｐａｓ湖水配制的Ｆｅｎｔｏｎ体系中・ＯＨ的含量。 Ｚｈｏｕ等ｌ２ｌｊ利用具有高灵敏ａ—Ｈ分子的甲醇作捕 捉剂，以４５％乙腈作流动相分离，３７０ ｎｍ检测，以 安息香酸为捕捉剂，反相Ｃ１８ ｒａｄｉｃａｌ Ｐａｋ柱，用乙 腈／水按１５％ １００％不同的配比进行梯度洗脱， ２５５ ｎｍ、３００ ｎｍ检测，分析了新鲜水和海水在光化 学条件下产生的・ＯＨ自由基。Ｋａｕｒ等ｌ２ ｊ用苯丙 氨酸捕获・ＯＨ生成酪氨酸，Ｎｕｅｌｅｏｓｉｌ Ｃ１８柱，含 １０％甲醇的５００ ｍｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４一Ｈ３Ｐ０４缓冲液（ｐＨ 值为３）作流动相分离，２７４ ｎｍ检测。邻、间、对位 的酪氨羧（・ＯＨ攻击产物）和苯丙氨酸及其代谢 产物得到很好的分离。此法已用于ｐＨ值为７．４ 的臭氧化水溶液和早产儿血液中・ＯＨ的测定。 此外，还有人通过测定水杨酸盐与・ＯＨ的反应产 物２，３一和２，５一二羟基苯甲酸的浓度预测・ＯＨ 的浓度。Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ等（∞］用水杨酸来捕获・ＯＨ。 在水杨酸盐中加入ＥＤＴＡ、ＦｅＳＯ４和次黄嘌呤，通过 添加黄嘌呤氧化酶来启动反应。ＨＰＬＣ分离，流动 相为４０％甲醇（含０．１％乙酸），流速为 ０．６ ｍｌＪｍｉｎ，３６５ ｎｍ激发，４６０ ｎｍ荧光检测。２，５一 二羟基苯甲酸盐的检测限为０．６ ｎｇ／ｍＬ。Ｄａｓ 维普资讯 http://www.cqvip.com ２００７年ｌ０月 刘凤喜等．Ｆｅｎｔｏｎ法中羟基自由基的测定技术进展 ５３ 等［２４ 为了测定在心肌局部缺血再灌注时可能产 生的・ＯＨ，采用１．ａｎｇｅｎｄｏｒｆ技术灌注离体的老鼠 心脏。将水杨酸加入到灌注通路中，用来捕捉 ・贵，操作也较复杂，一般实验室难以应用。用分光 光度法测・ＯＨ，方法简便实用，易为一般实验室所 采用。Ｓａｔｏ等 用ＤＭ—ＳＯ捕获・ＯＨ形成甲基 亚磺酸，在４３０ ｎｍ比色测定Ｆｅｎｔｏｎ反应、水的 射 线辐解、Ｈ２Ｏ２的紫外光解３个体系产生的・ＯＨ。 贾之慎等【３¨用水杨酸捕获・ＯＨ后，与Ｎａ２ＷＯ４和 ＮａＮＯ，显色，５１０ ｎｍ比色测定，间接测定羟自由基 ＯＨ形成２，５一和２，３一二羟基苯甲酸。Ａｌｔｅｘ Ｕ１． ｔｒａ ｓｐｈｅｒｅ ＯＤＳ柱，含醋酸钠和柠檬酸的缓冲液作 流动相，Ｍｏｄｅｌ４６０电化学检测器，Ａｇ／ＡｇＣ１作参比电 极，在０．６ Ｖ检测。Ｃｏｍｅｌｉｓ等 ］利用一种改进的带 电化学检测器的液相色谱法评估老鼠体内的・ＯＨ。 ２．３化学发光法 化学发光法（ＣＬ）也是一种检测自由基的灵 敏、准确的方法，其原理是发光剂被活性氧自由基 氧化成激发态，当其返回基态时放出大量光子，从 而对ｃｌ起放大作用。自由基产生越多，其发光值 就越大，反之亦然。根据发光值的大小可反映系 统中自由基的量。与电子自旋共振和高效液相色 谱两种方法相比，化学发光法操作简便，不需昂贵 设备，测定快速。陈秀武等【２ ］用酵母扩增，化学 发光法测定抗坏血酸一ｃｕ 一Ｉ－Ｉ２Ｏ，体系产生的・ ＯＨ。体系中Ｈ２ ｏ２是・ＯＨ的前体，酵母是很好的 发光底物，能有效地扩增化学发光。反应中生成 的・ＯＨ攻击酵母，从酵母壁中获取电子，同时伴 随着化学发光。当体系中存在着有机物，上述反 应生成的・ＯＨ进一步和有机物发生作用，生成Ｒ・ 和ｘ・，其进一步与・ＯＨ．、Ｉ－Ｉ２Ｏ２、ｏ２一・和ＨＯ２・反 应，使有机物发生分解，同时伴随着化学发光的减 弱。徐向荣等ｌ２ 在陈秀武实验的基础上，用化学 发光法测定了Ｆｅｎｔｏｎ反应中产生的ＯＨ，并用于 Ｆｅｎｔｏｎ反应处理模拟染料废水所产生的・ＯＨ的测 定。Ｈｕ等ｌ２引研制了一种用化学放大来测试对流 层中自由基的检测器，该系统由一个管状的聚氟 乙烯反应室组成，内有一张卷着的聚四氟乙烯滤 纸，外面罩着一张电镀过的金属网。Ｎ２ （４００ ｍＬ／ｍｉｎ）和试剂气体（如ＮＯ和ＣＯ）通过该反 应室，反应混合物被转移进ＮＯ２检测器，并用鲁 米诺溶液处理，用光电倍增管测定化学发光。该 法适用于空气中ＲＯ 自由基（如・ＨＯ、ＨＯ２・、ＲＯ・ 和ＲＯ２・）的原位测定。Ａｎａｓｔａｓｉ等ｌ２ 用化学放大 法，测定了大气中超氧自由基和羟自由基。该法 利用・ＯＨ和ＨＯ２・能与乙醇、二甲醚、乙烯和丙烯 发生链反应，与烯发生的反应很快，但受Ｏ 干扰， 与醇或醚的反应很慢但不受Ｏ 干扰。 ２．４分光光度法 用ＥＳＲ、ＨＰＬＣ等方法测定・ＯＨ，所需仪器昂 含量。王成莲等ｌ３ ］根据・ＯＨ氧化浅红色的还原 型细胞色素ｃ为浅黄色的氧化型细胞色素ｃ，在 ５５０ ｎｍ比色测定抗坏血酸一ｃｕ２ 一Ｈ２Ｏ２体系产生 的・ＯＨ。金鸣等［３３］根据邻二氮菲一Ｆｅ 被羟自 由基氧化为邻二氮菲一Ｆｅ。 后，其５３６ ｎｍ最大吸 收峰消失，比色法测定Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的・ＯＨ。 徐向荣等 ］用ＤＭＳＯ捕获・ＯＨ形成甲基亚磺酸， 在４２０ ｎｍ比色测定Ｆｅ“一Ｉ－Ｉ２Ｏ２体系产生的・ＯＨ， 通过对测定条件的研究，得到最佳实验方案。同 时测定了核桃、黑芝麻等十种天然食物的水提取 物消除・ＯＨ的能力，该法可用于羟自由基清除剂 的筛选。张乃东等【３ Ｊ用甲基紫褪色法测定了 Ｆｅｎｔｏｎ体系产生的羟基自由基（・ＯＨ）。甲基紫光 度法测・ＯＨ基本原理是：Ｉ－Ｉ２Ｏ２和Ｆｅ２ 发生Ｆｅｎｔｏｎ 产生・ＯＨ。・ＯＨ容易进攻高电子云密度点，会与甲 基紫中具有高电子云密的ｃ—ｃ基团发生亲电加 成反应，而使甲基紫褪色。通过测定甲基紫在 ５８０ ａｍ处吸光度值的变化可间接测定出・ＯＨ的生 成量。刘立明等ｌ３６Ｊ也用此方法测定了Ｆｅｎｔｏｎ体 系中的・ＯＨ的含量。谷学新等【３ 用ＤＭＳＯ作为 ・ＯＨ的探针试剂，采用Ｆｅｎｔｏｎ体系产生・ＯＨ，其与 二甲亚矾（ＤＭＳＯ）反应产生甲醛，然后与乙酞丙 酮、氨发生Ｈａｎｔｚｓｅｈ反应生成３，５一二乙酰一 １，４一二氢吡啶，其最大激发波长和发射波长分别 为４１９．４ ａｍ和５０５．５ ａｍ。通过测定荧光强度的变 化可以间接定量羟基自由基的产生量。 顺磁性氮氧化合物能有效地清除自由基，同 时也是一种芳烃单重激发态的有效淬灭剂。当顺 磁性氮氧化合物与荧光分子共价结合，所形成的 荧光分子一氮氧自由基复合物（即自旋标记荧光 分子）仍保留对自由基反应的活性，但由于复合物 分子内氯氧自由基对荧光体单重激发态的猝灭作 用，导致荧光体的荧光量子产率下降与荧光寿命 缩短，复合物中氮氧自由基极易与体系中待测的 目标自由基反应。当复合物中氮氧自由基与待测 的目标自由基反应生成抗磁性分子后，消除了顺 维普资讯 http://www.cqvip.com 精 细 ５４ 由化 工 展ＡＤＶＡＮＣＥＳ ＩＮ ＦＩＮＥ ＰＥＴＲＯＣ ＥＭＩＣＡＬＳ Ｈ ＣＡ第８卷第ｌ０期 磁性基团对荧光体单重激发态的淬灭作用，导致 荧光量子产率恢复。杨小峰等（３ｓ 基于这一原理， 设计利用哌啶类氮氧自由基自旋标记荧光探针来 表征・ＯＨ，・ＯＨ先与二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）反应，定 量生成甲基自由基，然后甲基自由基被自旋标记 荧光探针捕捉，形成强荧光产物，荧光强度的增量 化工科技市场，２００６，２９（６）：２８ ３３ ３钱易．水体颗粒物和难降解有机物的特性与控制技术原理．北 京：中国环境科学出版社。２０００．６ ４ Ｂｒｉｌｌａｓ Ｅ，Ｍｕｒ Ｅ，Ｓａｕｌｅｄａ Ｒ．Ａｎｉｌｉｎｅ Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｕｎｄｅｒ Ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉ． ｃａｌ ａｎｄ Ｐｈｏｔｏ Ｃａｔａｌｙｔｉｃ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．Ｊ Ａｄｖ Ｏｘｉｄ Ｔｅｃｈｎｏｌ，１９９９。４（１）： １０９一ｌｌ４ ５宋卫峰，吴斌，马前．电解法降解有机污染物机理及动力学的 研究．化工环保，２００１，２１（３）：１３１—１３６ ６杨润昌，周书天，谢磊．高浓度甲基橙低压湿式催化氧化及动 ＡＦ与反应生成的甲基自由基的量成正比，也与参 加反应的・ＯＨ的量成正比。基于上述原理建立 的表征・ＯＨ的实验方法，具有操作简单、专一性 好、灵敏度较高的特点。 ２．５其他方法 腐植酸是地球上分布最广的天然复杂有机大 分子，腐植物质是自然界中生物残体经过长期复 杂的化学和生物作用而生成的，在水体环境中起 着非常重要的作用。腐植酸是一种元定形、结构 非常复杂、组成极不均一、相对分子质量高度分散 的天然有机物。为了进一步研究腐植酸的特性， 吴忠等【３ 用电位滴定法测定了腐植酸中羧基自 由基、酸性自由基和酚羟基自由基。 ３结语 由上述可知，虽然国内外已建立了多种测定 自由基的方法，但除少数（如ＥＳＲ、激光荧光光谱 和长光程吸收光谱）可直接测定自由基外，多数方 法属于间接测定法。间接测定自由基的方法干扰 大，有的方法所测得的物质是否是自由基还有待 于确证。由于自由基的高度活泼性、浓度低和存 在寿命短，即使属于直接测定方法，其干扰因素也 不少。 无论是定性还是定量，都有待于进一步提高 其可靠性。在国外，自由基的测定主要是采用 ＥＳＲ法和ＨＰＬＣ法；而国内受仪器条件和经费的 ，相当一部分工作是用分光光度法来测定自 由基。大气化学中，激光荧光光谱和长光程吸收 光谱将进一步得到发展和完善；在生命科学领域， ＥＳＲ仍属于相对可靠的方法；在天然水体和废水 深度氧化处理等领域的自由基研究中，需结合自 己的特点，多借鉴其它研究领域的自由基测定 方法。 参考文献 ｌ朱琳娜，吴超，何争光．Ｆｅｎｔｏｎ试剂法处理难生物降解有机废水 最新进展．能源技术与管理，２００６，（２）：５９—６２ ２李金莲，金永峰，钱慧娟．Ｆｅｎｔｏｎ试剂在水处理中的应用研究． 力学研究．湘潭大学自然科学学报，２０００，２２（３）：５９—６３ ７陈琳，杜瑛，雷乐成．ＵＶ／Ｈ２０２光化学氧化降解对氯苯酚废水 的反应动力学．环境科学，２００３，２４（５）：１０６—１０９ ８徐向蓉，王文华，李华斌．Ｆｅｎｔｏｎ试剂与染料溶液的反应．环境 科学，１９９９，２０（３）：７２—７４ ９ Ｐｏｕ Ｓ，Ｒａｍｏｓ Ｃ Ｌ，Ｇｌａｄｗｅｌｌ Ｔ Ａ．Ｋｉｎｅｔｉｃ Ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ｔｈｅ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ａ Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ Ｓｐｉｎ Ｔｒａｐｐｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｙｄｒｏｘｙｌ Ｒａｄｉ— ｃａ１．Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ。１９９４，２１７（１）：７６—８３ １０ Ｎｅｉｌ Ｊ Ｓ，Ｂｒｉａｎ Ｊ Ｔ，Ｈｅｗｉｔｔ Ｃ Ｎ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆＨｙｄｒｏｘｙｌ Ｒａｄｉｃａｌ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｃｈａｍｂｅｒｓ Ｕｓｉｎｇ Ｅｌｅｃｔｒｏｎ ＳＦ。ｉｎ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ．Ｃｈｅｍｏｓｐｈｅｒｅ，１９９４，２８（５）１９９９—１００８ １１潘循皙．大气环境中ＯＨ自由基测定．上海环境科学，１９９９，１８ （２）：５９—６ｌ １２ Ｗａｔａｎａｂｅ Ｔ．Ｓｐｉｎ Ｔｒａｐｐｉｎｇ ｏｆ Ｈｙｄｒｏｘｙｌ—ｒａｄｉｃａｌ ｉｎ ｔｈｅ Ｔｒｏｐｏｓｐｈｅｒｅ ｆｏｒ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｂｙ Ｅｌｃｅｔｏｒｎ Ｓｐｉｎ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ａｎｄ Ｇａｓ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａ— ｐｈｙ／ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｏｒｍｅｔｒｙ．Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ，１９８２，（５４）：２４７０—２４７４ ｌ３马先勇．自旋捕获／ｓｏｐ—ｐａｋ Ｃｌｓ分离／ＥＳＲ法研究胞嘧啶水溶 液辐解的ＯＨ・加合物．生物物理学报，１９９７，１３（２）：３０５—３０８ ｌ４丛建波．自由基捕捉剂的选择．生物化学与生物物理进展， １９９３，２０（４）：３２６—３２７ ｌ５杨正红．活性自由基中间体的ＥＳＲ研究．生物化学与生物物 理进展，１９９１，１８（３）：２４１—２４２ １６ Ｓｔｏｉｃ Ｓｅｔａｌ，Ｌａｄｉｓｌａｖ Ｖａｌｋｏ．Ａ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｆａｓｔ Ｓａｍｐｌｉｎｇ ｏｆ Ｂｉ— ｏｌｏｇｉｃａ１．Ｔｉｓｓｕｅｓ ｆｏｒ Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｃ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ Ｓｐｅｃｔｏｒｓｃｏｐｙ． Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃａｌ ＢｉｏｌＭｅｄ，１９９６，２０（１）：８９—９ｌ １７ Ｐａｒｉｎａｍ Ｓ Ｒａｏ，Ｎｉｓａ Ｒｕｊｉｋａｒｎ，Ｊｏｈｎ Ｍ Ｌｕｂｅｒ Ｊｒ．Ｈｉｉｓｈ—ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ Ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｄｉｒｃｅｔ Ｑｕａｎｔｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｏｘｙ Ｒａｄｉｃａｌｓ ｉｎ Ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ ａｎｄ Ｂｌｏｏｄ ｂｙ Ｍｅａｎｓ ｏｆ １，３一Ｄｉｍｅｔｈｙｌｈｔ— ｉｏｕｒｎａ ａｎｄ Ｄｉｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｆｆｉｘｅｄ．Ｊ Ｃｈｒｏ￣ｇｒ，１９８８，４５９：２６９—２７３ ｌ８ Ｓｈｏｗ Ｆｕｋｕｉ，Ｙｕｋｉｋｏ Ｈａｎａｓａｋｉ，Ｓｈｕｎｊｉｒｏ Ｏｇａｗａ．Ｈｉｓｈ—ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｉＬｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｐｈｉｎｉｃ Ａｃｉｄ ａｓ ａ Ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｙｄｒｏｘｙｌ Ｒａｄｉｃａｌｓ．１ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ， １９９３，６３０（１—２）：１８７—１９３ １９ Ｇａｍｏｈ Ｋ．Ｌｉｕｑｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ａｓｓａｙ ｏｆ ｂｒａｓｓｉｎｏｓｔｅｒｏｉｄｓ ｉｎ ｐｌｎａｔｓ Ｂｕｎｓｅｋｉ Ｋａｇａｋｕ。１９９４，４３（９）：６９１—６９６ ２０ Ｈｎｄｗｙ Ｍ Ｅ．Ｑｕａｎｔｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌ ｄｕｒｉｎｇ Ｆｅｎｔｏｎ ｏｙ‘２ａ— ｔｉｏｎ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ａ ｓｉｎｇｌｅ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｉｒｏｎ ａｎｄ ｐｅｒｏｘｉｄｅ．Ｃｈｅｍｏｓｐｈｅｒｅ， ２０００，４１：４Ｏ９—４１７ ２１ Ｚｈｏｕ Ｘ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｈｏｔｏ Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ Ｐｒｏｄｕｃｅｄ Ｈｙｄｒｏｘｙｌ Ｒａｄｉ— ｃａｌｓ ｉｎ Ｓｅａｗａｔｅｒ ａｎｄ Ｆｒｅｓｈｗａｔｅｒ．Ｍａｒ Ｃｈｅｍ．１９９０，３０：７１—７８ ２２ Ｋａｕｒ Ｈ，Ｈａｌｌｉｗｅｌｌ Ｂ．Ａｒｏｍａｔｉｃ Ｈｙｄｒｏｘｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ ａｓ ａｎ Ａｓｓａｙ ｆｏｒ Ｈｙｄｒｏｘｙｌ Ｒａｄｉｃａｌｓ：Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｙｄｒｏｘｙｌ Ｒａｄｉｃａｌ Ｆｏｒ— 维普资讯 http://www.cqvip.com ２００７年１０月 刘凤喜等．Ｆｅｎｔｏｎ法中羟基自由基的测定技术进展 ５５ ｍａｔｉｏｎ ｆｒｏｍ Ｏｚｏｎｅ ａｎｄ ｉｎ Ｂｌｏｏｄ ｆｒｏｍ Ｐｒｅｍａｔｕｒｅ Ｂａｂｉｅｓ Ｕｓｉｎｇ Ｉｍ－ ３０ Ｓｔｅｉｎｅｒ Ｍ Ｇ．Ｃｈａｒａｅｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ Ｆａｓｃｉｅｌｉｎ Ｉ—ｌｉｋｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ ｗｉｔｈ Ｃｅｌｌ ｐｒｏｖｅｄ ＨＰＬＣ Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ Ａｎａ１．Ｂｉｏｃｈｅｍ，１９９４，２２０（１）：１１一ｌ５ Ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｆｒｏｍ Ｓｅａ Ｕｒｃｈｉｎ．Ａｒｃｈ Ｂｉｃｅｈｅｒａ Ｂｉｏｐｈｙｓ，１９９０， ２３ Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ，Ｅｎｄｏｈ Ｙ Ｓ．ＰＩａｓｍａ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｌａｃｅｎｔａｌ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ２７８（２）：４７８—４８１ ｏｆ Ｂｒｏｍｏｆｅｎｏｆｏｓ ｉｎ Ｒａｔｓ．Ａｎａｌ Ｓｃｉ，１９８９，５（２）：１６１—１６８ ３ｌ贾之慎，邬建敏．唐孟成．比铯法测定Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的羟自 ２４ Ｄｉｐａｋ Ｋ Ｄａｓ，Ｇｅｒａｌｄ Ａ，ＣｏｒｄｉｓＰａｓｌｎａｍ Ｓ．Ｈｉｇｈ—ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ 由基生．物化学与生物物理进展，１９９６，２３（２）：１８４—１８６ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｙｄｒｏｘｙｌ Ｔｅｄ Ｂｅｎｚｏｉｃ Ａｃｉｄｓ ａｓ Ａｎ Ｉｎ－ ３２王成莲．抗坏血酸一Ｃｕ２ 一 体系中的ＯＨ・的测定．生物 ｄｉｒｅｃｔ Ｍｅａｓｕｒｅ ｏｆ Ｈｙｄｒｏｘｙｌ Ｒａｄｉｃａｌ ｉｎ Ｈｅａｒｔ：Ｉｔｓ Ｐｏｓｓｉｂｌｅ Ｌｉｎｋ ｗｉｔｈ 化学与生物物理进展，１９８９，１６（６）：４７３—４７５ ｔｈｅ Ｍｙｏｃａｒｄｉｌａ Ｒｅｐｅｒｕｓｉｏｎ Ｉｎｊｕｒｙ．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ，１９９１，５３６：２７３— ３３金鸣，蔡亚欣．李金荣．邻二氮菲一Ｆｅ（ＩＩ）氧化法检测Ｈ２０２／ ２８２ Ｆｅ 产生的羟自由基．生物化学与生物物理进展，１９９６，２３ ２５ Ｃｏｍｅｌｉｓ Ｊａｋｏｂｓ，Ｅｉｖｉｎｄ Ｓｏｌｅｍ，Ｊｏｈａｎ Ｅ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ （６）：５５３—５５６ Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ Ｐａｔｔｅｒｎ ｉｎ Ｍａｐｌｅ Ｓｙｒｕｐ Ｕｒｉｎｅ Ｄｉｓｅａｓｅ ｂｙ Ｍｅａｎｓ ｏｆ Ｇｌａｓｓ ３４徐向荣，王文华，李华斌．比色法测定Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的羟自 Ｃａｐｉｌｌａｒｙ Ｇａｓ ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄＭａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒ 由基及其应用．生物化学与生物物理进展，１９９８，２５（４）：４３２— Ｂ：Ｂｉｏｍｅｄ Ａｐｐｌ，１９９７，６９（１）：２３—３２ ４３５ ２６陈秀武．化学发光法测定抗坏血酸一Ｃｕ２’一 ｏ２体系产生的 ３５张乃东，郑威，彭永臻．褪色光度法测定芬顿体系中产生的羟 ・ＯＨ．生物化学与生物物理进展，１９９２，１９（２）：１３６ １４０ 自由基．分析化学，２００３，３１（５）：５５２—５５４ ２７徐向荣，王文华．化学发光法测定Ｆｅｎｔｏｎ反应中的羟自由基 ３６刘立明，刘丽虹，宋功武．分光光度法测定Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的 及其应用．环境科学，１９９８，１９（２）：５１ ５４ 羟自由基．湖北大学学报，２００２，２４（４）：３２６—３２８ ２８ Ｗｅｎｚｋｉ Ｈｕ，Ｈｉｒｏａｋｉ Ｔａｏ，Ｍａｍｏｒｕ ｔｏｍｉｎａｇａ，ｅｔ ａ１．Ａ Ｎｅｗ Ａｐｐｒｏａｃｈ ３７谷学新，邰超，邹洪．一个新的测定Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的・ＯＨ及 ｆｏｒ ｔｈｅ Ｓｉｍｕｌｔｎａｅｏｕｓ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｎｏｒｇａｎｉｃ Ｃａｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ａｎｉｏｎｓ 清除的荧光方法．分析科学学报，２００２，１８（１２）：１１２—１１４ Ｕｓｉｎｇ Ｉｏｎ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ａｎａ／Ｈｅｍ，１９９４，６６（２ｏ）：３３８４—３３９３ ３８杨小峰，郭祥群．一种表征羟自由基的新型探针．高等学校化 ２９ Ｋｏｊｉ Ｓａｔｏ，Ｎｏｆｉｏ Ｎｉｓｈｉ，Ｍａｍｏｍ Ｔｏｍｉｎａｇａ，ｅｔ ａ１．Ｒｏｂｅｒｔ Ｖ Ｇｌａｄｓｔｏｎｅ， 学学报，２００１，２２（３）：３９６—３９８ Ｍｉｃｈａｅｌ Ｇ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｍｐｌｉｉｆｅｒｓ ｆｏｒ Ｄｅｔｃｅｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｅｒｏｘｙ Ｒａｄｉｃａｌｓ ｉｎ ３９吴忠．电位滴定法测定腐植酸中羧基自由基．广东医药学院 ｔｈｅ Ａｔｍｏｓｐｈｅｒｅ．Ｅｎｖｉｒｏｎ＆ｆ Ｔｅｃｈｎｏｌ，１９９３，２７（３）：４７４—４８２ 学报，１９９４，１０（３）：１６４—１６５ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｎ Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｈｙｄｒｏｘｙｌ Ｒａｄｉｃａｌ ｆｏｒ Ｆｅｎｔｏｎ Ｍｅｔｈｏｄ Ｌｉｕ Ｆｅｎｇｘｉ Ｌｉ Ｚｈｉｄｏｎｇ Ｌｉ Ｎａ：Ｓｕｎ Ｎａ Ｘｉａｏ Ｘｉｎｃｈｅｎｇ Ｑｕ Ｄａｎｄａｎ （１．Ｄａｌｉａｎ Ｍｕｎｉｃｉｐａｌ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｄａｌｉａｎ １ １６０２３； ２．Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏ Ｅｘｐｅｒｉｅｍｎｔａｔｉｏｎ ｆｏ Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ １ １００３４） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆｅｎｔｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｂｅｌｏｎｇｓ ｔｏ ａｎ ａｄｖａｎｃｅｄ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ａｂｏｕｔ ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌ ｗｅｒｅ ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ ｂｒｉｅｆｌｙ，ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｔｒｅｎｄ ｗｅｒｅ ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ ｍａｉｎｌｙ． Ｋｅｙ Ｗｏｒｄｓ Ｆｅｎｔｏｎ ｍｅｔｈｏｄ，ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌ，ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，ｗａｓｔｗａｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ： （上接５０第页） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｔｈｅ ｄｅｃｏｌｏｒｉｚｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｆｒｅｓｈ Ｍｎ０２ ｏｎ ｘｙｌｅｎｏｌ ｏｒａｎｇｅ ａｎｄ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｂｌｕｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎｆｌｕ－ ｅｎｃｉｎｇ ｔｈｅ ｄｅｃｏｌｏｒｉｚｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｆｒｅｓｈ Ｍｎ０２ ｈａｄ ｇｏｏｄ ｄｅｃｏｌｏｒｉｚｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｘｙｌｅｎｏｌ ｏｒａｎｇｅ，ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｍｏｖａｌ ｒａｔｅ ｗａｓ ｕｐ ｔｏ ９５％ ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｘｙｌｅｎｏｌ ｏｒａｎｇｅ ｗａｓ ４０ ｍｇ／Ｌ，ｐＨ ｗａｓ ５，ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆｆｒｅｓｈ Ｍｎ０２ ｗａｓ ５０ ｍｇ，ａｎｄ ｓｈａｋｉｎｇ ｔｉｍｅ ｗａｓ ３０ ｍｉｎ ａｔ ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ．Ｆｒｅｓｈ ＭｎＯ２ ｈａｄ ｐｏｏｒ ｄｅｃｏｌｏｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｎ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｂｌｕｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｍｏｖａｌ ｒａｔｅ ｗａｓ ｏｎｌｙ ７６％ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ． Ｋｅｙ Ｗｏｒｄｓ ｍａｎｇａｎｅｓｅ ｄｉｏｘｉｄｅ，ｘｙｌｅｎｏｌ ｏｒａｎｇｅ，ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｂｌｕｅ，ｄｅｃｏｌｏｒｉｚａｔｉｏｎ
