万方数据第２５卷第２期西安交通大学学报（医学版） Ｖｏｌ． ２５ Ｎｏ． ２２００４年４月Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｘｉ＇ａｎ Ｊｉａｏｔｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ （Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）Ａｐｒ． ２００４肾小球疾病患者血清血管内皮生长因子的变化及其意义申燕，尹爱萍，冯学亮（西安交通大学第一医院肾脏内科，陕西西安７１００６１）摘要：４的研究原发和继发性肾小球疾病（ＧＤ）患者血清血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的质量浓度变化及免疫抑制剂对其影响，分析其与相关临床指标的关系。方法采用双抗体夹心ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测患者及对照者血清ＶＥＧＦ质量浓度。结果ＧＤ患者血清ＶＥＧＦ显著高于对照组。ＧＤ临床分组中的慢性肾小球肾炎组（ＣＧＮ），隐匿性肾小球肾炎组（ＬＧＮ） ，紫瘫性肾炎组（ＨＳＰＮ）、狼疮性肾炎组（ＬＮ）患者血清ＶＥＧＦ均高于对照组，而各组之间无明显差异。未服用免疫抑制剂患者血清ＶＥＧＦ高于对照组，服用者与对照相比无显著性差异；ＧＤ患者免疫抑制剂冲击治疗后与冲击前对比血清ＶＥＧＦ显著下降。肾病综合征组（ＮＳ）患者肾病期血清ＶＥＧＦ高于缓解期；膜性肾病（ＭＧＮ）患者血清ＶＥＧＦ与２４ ｈ尿蛋白排泄量呈正相关。ＬＮ患者血清ＶＥＧＦ与血浆Ｙ－球蛋白、血抗一ｄｓＤＮＡ抗体滴度呈正相关。ｉｔ抢ＶＥＧＦ参与ＧＤ的发病机制，与蛋白尿的发生发展有关。免疫抑制剂可降低血清ＶＥＧＦ质量浓度。ＬＮ患者血清ＶＥＧＦ质量浓度与ＬＮ的活动有关。关键词：肾小球肾炎；血管内皮生长因子；酶联免疫吸附法中图分类号：Ｒ６９２文献标识码：Ａ文章编号；１６７１－８２５９（２００４）０２－０１４７－０４Ａｌｔｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒｉ ｎ ｔｈｅｓｅｒｕｍ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅｓ Ｓｈｅｎ Ｙａｎ， Ｙｉｎ Ａｉｐｉｎｇ， Ｆｅｎｇ Ｘｕｅｌｉａｎｇ（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ， Ｆｉｒｓｔ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｘｉ＇ａｎ Ｊｉａｏｔｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｘｉ＇ａｎ ７１００６１，Ｃｈｉｎａ）ＡＢＳＴＲＡＣＴ： Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ（ＶＥＧＦ） ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｒｉｍａｒｙ ａｎｄ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅｓ （ＧＤ），ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｎ ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ， ａｎｄ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ＶＥＧＦ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｏｍｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｎｄｅｘｅｓ． ＭｅｔｈｏｄｓＳｅｒｕｍ ＶＥＧＦ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＧＤ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｓａｎｄｗｉｃｈ ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ａｌｌ ｏｆ ｔｈｅ ＧＤｐａｔｉｅｎｔｓ ｈａｄ ｈｉｇｈｅｒ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ＶＥＧＦ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ． Ｏｆ ｔｈｅ ５ ｇｒｏｕｐｓ ｄｉｖｉｄｅｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ， ｐａｔｉｅｎｔｓ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ（ＣＧＮ）ｇｒｏｕｐ， ｌａｔｅｎｔ ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ（ＬＧＮ）ｇｒｏｕｐ，Ｈｅｎｏｃｈ－Ｓｃｈｏｎｌｅｉｎ ｐｕｒｐｕｒａ ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ （ＨＳＰＮ） ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｌｕｐｕｓ ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ （ＬＮ） ｇｒｏｕｐ ｈａｄ ｈｉｇｈｅｒ ｓｅｒｕｍ ＶＥＧＦ ｌｅｖｅｌｔｈａｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ， ｗｉｔｈ ｎｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ａｂｏｖｅ ｇｒｏｕｐｓ． Ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈｏｕｔ ｔａｋｉｎｇｉｍｍｕｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｈａｄ ｈｉｇｈｅｒ ｓｅｒｕｍ ＶＥＧＦ ｌｅｖｅｌ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｗｈｉｌｅ ｎｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｔａｋｉｎｇ ｉｍｍｕｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ． Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ ｈａｄ ａｓ ｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒ ｓｅｒｕｍ ＶＥＧＦ ｌｅｖｅｌ ａｆｔｅｒ ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｇｇｒｅｓｓｉｖｅ ｔｈｅｒａｐｙ ｔｈａｎ ｂｅｆｏｒｅ． Ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ＶＥＧＦ ｌｅｖｅｌｏｆ ｎｅｐｈｒｏｔｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｉｎ ｎｅｐｈｒｏｔｉｃ ｐｈａｓｅ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｉｎ ｒｅｍｉｓｓｉｏｎ ｓｔａｇｅ． Ｉｎ ｍｅｍｂｒａｎｏｕｓ ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓｓｅｒｕｍ ＶＥＧＦ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ ｗｉｔｈ ２４－ｈｏｕｒ ｐｒｏｔｅｉｎｕｒｉａ ｅｘｃｒｅｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ＶＥＧＦ ｌｅｖｅｌ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｗｉｔｈ ａｎｔｉ－ｄｓＤＮＡ Ａｂ ｔｉｔｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｙ ｇｌｏｂｕｌｉｎｓ ｉｎ ＬＮ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ＶＥＧＦ ｉｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ， ａｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｕｒｉａ． Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｔｈｅｒａｐｙ ｃａｎ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＶＥＧＦ． Ｉｎ ＬＮ ｐａｔｉｅｎｔｓ， ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ＶＥＧＦ ｌｅｖｅｌ ｉｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ＬＮ ａｃｔｉｖｉｔｙ．ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ： ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ； ＶＥＧＦ； ｅｎｚｙｍｅ ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ血管内皮生长因子（ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ胞增殖转移、血管生成维持和细胞聚钙等作用，ｆａｃｔｏｒ， ＶＥＧＦ），又称血管通透性因子和血管调理素，是调节血管通透性的重要因子。近年来研究发现，是细胞因子的一种，具有增加血管通透性、促内皮细ＶＥＧＦ的异常表达与肾小球疾病（ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ ｄｉｓｅａ－ｓｅｓ， ＧＤ）密切相关Ｅｅｌ。我们拟通过观察ＧＤ患者血收稿日期：２００３－０５－０８修回日期：２００３－０６－３０作者简介：申燕（１９７６－），女（汉族），硕士，住院医师．清ＶＥＧＦ的变化及其与一些临床指标的相关性，探西安交通大学学报（医学版）第２５卷万方数据讨其在ＧＤ发病机制中的作用，为ＧＤ的诊治提供新的思路１对象和方法１． １研究对象实验组：为２００１年５月一２００１年１２月本院肾内科住院患者，共１１１例。原发性ＧＤ共９４例，临床分型：肾病综合征（ＮＳ）组３９例，其中肾病期２２例、缓解期１７例，慢性肾小球肾炎（ＣＧＮ ）组２４例，隐匿性肾小球肾炎（ＬＧＮ）组７例。原发性ＧＤ病理分型中膜性肾病／膜性肾小球肾炎（ＭＮ／ＭＧＮ） ５例。继发性ＧＤ共１７例，包括紫瘫性肾炎（ＨＳＰＮ）组１１例、狼疮性肾炎（ＬＮ）组６例。根据标本采集前２月内是否接受过免疫抑制剂治疗将患者分为无免疫抑制治疗组５８例和免疫抑制治疗组５３例。另外，对８例ＧＤ患者，在行肾上腺糖皮质激素及细胞毒药物冲击治疗「非ＬＮ：地塞米松６０ ｍｇ Ｘ３ｄ或甲基强的松龙０．５ｇＸ３ｄ＋环磷酞胺０． ４ ｇ Ｘ２ ｄ；ＬＮ：激素用法同前，环磷酞胺０． ６第１天），０． ４（第２天）〕前及后２ ｄ ＶＥＧＦ的浓度进行动态监测。对照组：共２０例，来自本院肾内科工作人员及健康供者，与实验组在年龄、性别（除ＬＮ组）构成比上无统计学差异。１．２方法１．２．１标本采集及保存对照者及患者采晨起空腹肘静脉血５ｍ以不抗凝），于４℃冰箱静置３ｈ，离心分离血清（２ ５００ ｒ・ｍｉｎ－＇ Ｘ １０ ｍｉｎ），置一４０℃冰箱低温保存，同批测定血清ＶＥＧＦ质量浓度。１． ２．２ ＶＥＧＦ水平侧定采用双抗体夹心ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法（人ＶＥＧＦ定量ＥＩＡ试剂盒购自上海森雄科技实业有限公司）。分别将标本及不同浓度标准品加人相应孔中，１００ ｔｔＬ・孔一’，置３７℃水浴箱孵育１２０ ｍｉｎ，洗板。每孔中加人第一抗体工作液５０ ｐＬ，充分混匀后置３７℃水浴箱孵育６０ ｍｉｎ，洗板。每孔加酶标抗体工作液１００ ｔＡＬ，置３７℃水浴箱孵育６０ｍｉｎ，洗板。每孔加人底物工作液１００ ｔ．Ｌ，置３７℃暗处反应５＾－１０ ｍｉｎ，每孔加人１滴终止液混匀，终止反应５ ｍｉｎ内用自动酶标仪以４９２ ｎｍ波长读板，并打印出实验结果。１．３统计学处理所测ＶＥＧＦ浓度经常用对数转换后服从正态分布，计量资料结果均以均数士标准差（．Ｙ士、）表示。成组资料均数间的比较采用单因素方差分析（ｏｎｅ ｗａｙ ＡＮＯＶＡ）及ｔ检验；配对资料均数间比较采用配对资料ｔ检验；两因素之间关系采用ｐｅａｒｓｏｎ相关分析及ｓ． ｐｅ户、ａｒｍａｎ等级相关分析。所有数据均采用ＳＰＳＳ １０． ０统计软件进行统计分析。２结果２．１对照组与ＧＤ患者血清ＶＥＧＦ的比较结果显示，１３．９７） 对照组血清Ｖｎｇ ＂Ｌ－＇，低于ＧＤ患者（５７．８９士９３．８７） ＥＧ乡辱‘量浓度为‘２１．３２士ｎｇ・Ｌ－＇，两组间存在显著性差异（Ｐ＜０．．０１） ９２． ２ ＧＤ各临床分组间血清ＶＥＧＦ的比较ＧＤ临床分组中的ＣＧＮ， ＬＧＮ， ＨＳＰＮ， ＬＮ组患者血清ＶＥＧＦ高于对照组（Ｐ＜０． ０５或Ｐ＜０．０１），ＮＳ组与对照组无明显差异（Ｐ＞０． ０５），且低于其他各临床分组（Ｐ＜０． ０５或Ｐ＜０． ０１）；除ＮＳ组，其余各临床分组间血清ＶＥＧＦ浓度均无显著性差异（Ｐ＞０．０５，表１）。表１对照组与ＧＤ各临床分组间及ＧＤ各组间血清ＶＥＧＦ质ｔ浓度的比较Ｔａｂｌｅ １ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ＶＥＧＦ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ＧＤ ｏｒ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ＧＤ（ｘ士ｓ） ＧｒｏｕｐＣａｓｅＶＥＧＦ／ｎｇ・Ｌ－Ｐ｀ Ｐ．份Ｃｏｎｔｒｏｌｑ乙〔日２１．３２士１３． ９７ＮＳＱ〕ｎ吕３１． ７３士４２．１１ｎ０，甘 ． ‘月０．工 ＣＧＮ０‘Ｊ任４７．６１士５２． ２３八〕八Ｕ０Ｊ自４｝门０１．￣日 ． ．工 』 ＬＧＮ叮产８２．４５士８６．３６八曰ＣＣ…Ｕ六口ｔ了ｎ口…八ＵＪＵＵ任ＨＳＰＮ（．立，１６３．５６士３２．８５八Ｃ〕卜Ｕ，Ｕ自行ＵＣ￣１１｝．甘１ＬＮ及Ｕ７５．９０士９２．８６ｎ门ＯＯｎｑ甘甘口内０〕自八Ｕ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ； ＇ ｀ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ＮＳ２． ３ ＧＤ息者免疫抑制剂冲击治疗前后血清ＶＥＧＦ的变化８例ＧＤ患者冲击治疗后血清ＶＥＧＦ质量浓度为（２３． ０１士２１． ８３） ｎｇ ＂Ｉ ．－＇，低于冲击前血清ＶＥＧＦ质量浓度（２９． ６６士２３． ２８） ｎｇ・Ｌ－＇，冲击前后存在显著性差异（Ｐ＜０． ０１）．是否服用免疫抑制剂对ＧＤ患者血清ＶＥＧＦ的影响未服用免疫抑制剂ＧＤ患者血清ＶＥＧＦ质量浓度〔（６２．１８士１０７． ８４） ｎｇ ＂ Ｌ－＇〕显著高于对照组［（２１． ３２士１３． ９７） ｎｇ ＂Ｌ－＇， Ｐ＜０． Ｏ１］，服用者Ｅ（５３． ２０士７６． ４８） ｎｇ ＂ Ｌ－＇］与对照组相比无显著性差异（Ｐ＞０． ０５） ｏ肾病期ＮＳ患者血清ＶＥＧＦ质量浓度［（４２． ５３士５２． ７０） ｎｇ・Ｌ－１］高于缓解期患者［（１７． ７５士１４．０８）ｎｇ・Ｌ－＇，Ｐ＜０． ０５］，肾病期和缓解期血清ＶＥＧＦ质２．４２．５肾病期及缓解期ＮＳ患者血清ＶＥＧＦ的比较ｚ期申燕，尹爱萍，冯学亮．血管内皮生长因子在肾小球疾病患者血清中的浓度变化及其意义万方数据量浓度与对照组〔（２１．３２士１３． ９７） ｎｇ ＂ Ｌ－＇」相比均无显著性差异（Ｐ＞Ｏ． ０５）．２．６ ＭＧＮ患者血清ＶＥＧＦ质，浓度与２４ ｈ尿蛋白定，的关系ＭＧＮ患者血清ＶＥＧＦ质量浓度与２４ ｈ尿蛋白定量的等级相关分析呈正相关（ｒ， ＿０．９００，Ｐ＜Ｏ． ０５）。２．７ ＬＮ患者血清ＶＥＧＦ水平与血浆７一球蛋白、抗－ｄｓＤＮＡ抗体滴度的相关分析ＬＮ患者血清ＶＥＧＦ水平与血浆７－球蛋白正相关（ｒ，＝０．９０４， Ｐ＜Ｏ．０５），与抗双链ＤＮＡ抗体滴度也呈正相关（ｒ，＝０．８９３， Ｐ＜０． ０５）。３讨论 ＶＥＧＦ是一种特异性作用于血管内皮细胞的多功能性细胞因子。生理状态下，胎儿与成人肾组织ＶＥＧＦ主要由肾小球脏层上皮细胞（足细胞）表达，集合管上皮细胞ＶＥＧＦ ｍＲＮＡ有弱表达，肾小球内皮细胞与活化的系膜细胞（ｍｅｓａｎｇｉａｌ ｃｅｌｌ， ＭＣＰ］也可合成ＶＥＧＦ， ＶＥＧＦ通过调节血管生成，是肾脏正常发育不可缺少的细胞因子，尤其是肾小球的形成［［３］近年来研究发现，ＶＥＧＦ的表达与ＧＤ密切相关。本研究显示ＧＤ患者血清ＶＥＧＦ显著高于对照 组，推测其在ＧＤ发病机制中发挥重要作用；膜性肾小球肾炎（ｍｅｍｂｒａｎｏｕｓ ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ， ＭＧＮ）患者血清ＶＥＧＦ质量浓度与２４ ｈ尿蛋白排泄量呈正相关，肾病期ＮＳ患者血清ＶＥＧＦ水平显著高于缓解期，推测其与蛋白尿的发生有关。既往的研究中，人们对于足突细胞对滤过膜通透性的调节作用知之甚少，而足突细胞能持续表达ＶＥＧＦ这一发现提示，足突细胞可能通过ＶＥＧＦ对肾小球滤过膜的通透性起着重要的调节作用。ＶＥＧＦ通过与肾小球基底膜＜ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ ｂａｓｅｍｅｎｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ，ＧＢＭ）硫酸类肝素糖蛋白反应，减少ＧＢＭ阴离子的数目，并且诱导内皮细胞细胞间连接打开或内皮细胞小窗的形成，故ＶＥＧＦ可能通过同时影响ＧＢＭ的电荷屏障及机械屏障而调节肾小球的通透性［］’。血管漏出通过内皮细胞内囊泡（ｖｅｓｉｃｕｌａｒ ｖａｃｕｏｌａｒ ｏｒｇａｎｅｌｌｅ， ＶＶＯ）的方式，ＶＥＧＦ主要通过增加ＷＯ的功能发挥渗透作用。血管内皮细胞的基底膜面和ＷＯ中有结合的ＶＥＧＦ． ＶＶＯ之间，ＷＯ与胞膜之间相互作用，形成一些有利于大分子物质通过的“小窗”（ｆｅｎｅｓｔｒａｅ），ＶＥＧＦ可能通过对ＷＯ之间“窗口”开启的调节而促进血管通透性增加。还有可能ＶＥＧＦ提高毛细血管和静脉漏出是通过打开内皮细胞细胞间连接的结果。因此蛋白外渗和细胞的移居归因于打开的细胞间连接，而窗孔允许小分子溶质外流的提高。有可能此两种现象都出现于ＶＥＧＦ相关的病理改变。ＶＥＧＦ的上述作用特点提示其在ＧＤ蛋白尿的发生中可能起重要的作用，而ＶＥＧＦ特异性抗体或抑制物有可能成为治疗蛋白尿的措施之一［５１。已有研究报道，在慢性高灌注型肾脏损伤模型中，足突细胞的损伤与蛋白尿和肾小球硬化的发生明显相关，损伤的足突细胞能大量释放胞内储存的ＶＥＧＦ分子，使得ＶＥＧＦ局部水平显著升高，肾小球滤过膜通透性一过性升高，最终导致蛋白尿的发生。微小病变肾病肾组织ＶＥＧＦ ｍＲＮＡ表达提高，且与蛋白尿相关［６１。培养的人外周血单核细胞可产生ＶＥＧＦ，推测ＧＤ患者外周血中ＶＥＧＦ浓度基本可反映肾脏局部ＶＥＧＦ的表达水平，故患者血清ＶＥＧＦ水平升高与ＧＤ蛋白尿的发生发展有关。ＶＥＧＦ在蛋白尿发生中起重要作用已被大量研究所证实［［７．８］。此外，ＶＥＧＦ对单核／巨噬细胞具有趋化和激活能力，它可通过提高内皮细胞表面Ｐ－选择素的表达引起中性粒细胞和单核细胞的猫附、移居，它还可诱导内皮细胞源性的蛋白酶的产生，如纤溶酶原激活物、金属蛋白酶、间质胶原酶和组织因子以及纤溶酶原激活物抑制物一１，在引起血浆及蛋白外渗的能力上是组胶的５０ ０００倍。还有可能ＶＥＧＦ参与了细胞因子诱导的体内ＭＣ和内皮细胞的增生。所以，ＶＥＧＦ通过多种机制参与ＧＤ的炎症性损伤。 本研究发现ＧＤ临床分组中的Ｃ己Ｎ， ＬＧＮ，ＨＳＰＮ， ＬＮ患者血清ＶＥＧＦ均显著高于对照组，而各组之间无显著性差异。说明ＧＤ不论是原发性或继发性及其不同的临床分型ＶＥＧＦ表达无明显差异，即ＧＤ病因对ＶＥＧＦ的表达无明显影响，只要存在肾小球的炎症过程，外周血ＶＥＧＦ均升高。’本研究还发现， ＧＤ患者肾上腺糖皮质激素加细胞毒药物冲击治疗后血清ＶＥＧＦ质量浓度明显低于冲击前。未服用过免疫抑制剂的ＧＤ患者血清ＶＥＧＦ显著高于对照组，而服用组与对照组无明显差异。以上结果均说明免疫抑制剂可抑制ＶＥＧＦ的表达。有报道在用类固醇特异性治疗阶段ＶＥＧＦ表达降低，皮质类固醇治疗通过减少血清ＶＥＧＦ水平而发挥作用１９１。国内胡可斌等［Ｃｉｏ〕发现雷公藤内醋醇可西安交通大学学报（医学版）第２５卷万方数据以抑制佛波脂诱导的内皮细胞ＶＥＧＦ ｍＲＮＡ表达及ＶＥＧＦ生成与分泌，可能是其降低肾小球肾炎患者尿蛋白的作用机制之一。Ｋａｚｕｍｏｔｏ等发现地塞米松（ＤＥＸ）抑制１２氧一１４烷酸一１３醋酸盐诱导的培养人ＭＣ ＶＥＧＦ ｍＲＮＡ的表达，此抑制作用可能是控制转录的结果。糖皮质激素是最重要的免疫抑制剂，其作用也许由于抑制细胞因子的产生所介导或其对ＶＥＧＦ产生的直接抑制作用，还有可能其在某种程度上影响肾小球细胞ＶＥＧＦ受体的表达［Ｉ＇ｌｌ． ＧＤ患者中ＮＳ组血清ＶＥＧＦ与对照组无明显差异，且低于其他各临床分组，可能由于此组患者长期服用大剂量免疫抑制剂对ＶＥＧＦ的表达具有抑制作用而造成与其他临床分组的不同。 我们还发现ＬＮ患者血清ＶＥＧＦ浓度高于对照组，且与血抗一ｄｓＤＮ Ａ抗体滴度及血浆７－球蛋白呈正相关。ＬＮ的活动常伴有尿蛋白的增加，而ＶＥＧＦ与尿蛋白之间有密切的关系，故推测ＶＥＧＦ与ＬＮ的活动之间有一定的联系。目前大量实验表明，抗一ｄｓ－ＤＮＡ抗体滴度增高及血清Ｃ，浓度持续降低、血浆７－球蛋白升高是ＬＮ活动性的重要标志。本研究结果提示血清ＶＥＧＦ水平提高与ＬＮ活动存在一定的关系，可能由于ＬＮ活动时炎症反应造成肾小球脏层上皮细胞损害，释放大量ＶＥＧＦ而使血中ＶＥＧＦ水平升高，也许ＶＥＧＦ水平可作为ＬＮ活动的一个标志。 虽然ＶＥＧＦ的以上生物学特性决定了其在ＧＤ的发病中介导免疫性炎症损伤和蛋白尿的病理生理，但由于ＶＥＧＦ有促进血管内皮细胞有丝、血管生成和血管维持作用，有研究认为在以肾小球内皮细胞损伤为特征的ＧＤ过程中，ＶＥＧＦ对内皮细胞损伤的修复和肾小球结构的重建发挥一定的作用。可以这样推测，在ＧＤ的早期，肾组织局部的炎症反应引起肾小球脏层上皮细胞的大量破坏，从而引起细胞内贮存的ＶＥＧＦ的大量释放，浸润的肾小球巨噬细胞和激活的ＭＣ也可释放ＶＥＧＦ，肾小球通透性提高、蛋白尿产生及炎症反应加重。随着病程的进展，足细胞的破坏或晚期肾小球硬化都会使足细胞数量减少，功能障碍，不能合成生理状况下必需的低水平的ＶＥＧＦ以维持肾小球内皮细胞的完整性，不利于肾小球毛细血管的修复造成肾小球微动脉瘤形成等病理改变及肾功能恶化。所以在病程的早期，通过拮抗ＶＥＧＦ的表达可减轻肾组织的炎症反应，晚期用ＶＥＧＦ治疗可能对肾小球损伤有积极意义。上述观点只是处于假说阶段尚需进一步研究证实，并且由于ＶＥＧＦ和其受体存在几种不同异构体，是否不同的异构体或受体介导不同的信号传导途径和生物学功能尚不十分清楚，进一步研究ＶＥＧＦ不同的异构体和受体在不同ＧＤ中的表达及作用将更有意义。参考文献：［ｌ〕王玉梅，汪宏波．血管内皮生长因子与肾脏疾病〔Ｊ］．国外医学泌 尿系统分册，２０００， ２０（４） ：１７６一１７８．［２］Ｎｏｇｕｃｈｉ Ｋ， Ｙｏｓｈｉｋａｗａ Ｎ， Ｉｔｏ－Ｋａｒｉｙａ Ｓ， ｅｔ ａｌ． Ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｍｅ－ｓａｎｇｉ ａｌ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｄｕｃｅ ｖａｓｃｕｌａｒ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｅａｒｌｙ－ｓｔａｇｅｍｅ ｓａｎｇｉａｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ ［Ｊ］． Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈ－ｒｏｌ， １９９８， ９（１０）：１８１５一１８２５．、［３］Ｋｒｅｔｚｌｅｒ Ｍ， Ｓｃｈｒｏｐｐｅｌ Ｂ， Ｍｅｒｋｌｅ Ｍ． Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｖａｓ－ｃ ｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｓｐｌｉｃｅ ｉｓｏｆｏｒｍｓ ｉｎ ｓｉｎｇｌｅ ｇｌｏｍｅｒｕ－ｌ ａｒ ｐｏｄｏｃｙｔｅｓ ［Ｊ］． Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ， １９９８， ６７（ｓｕｐｐｌ） ：ｓ１５９一ｓ１６１．一 ［４〕李世军，胡伟新．蛋白尿形成的分子基础［Ｊ］．肾脏病与透析肾移植杂志，２００１，１０（６）：５６０一５６３． ［５」马娜， 刘志红．血管内皮细胞生长因子及其与肾脏病的关系仁Ｊ］．肾脏病与透析肾移植杂志，１９９９， ８（４）：３６７－３７０．［６］Ｂａｉ ｌｅｙ Ｅ， Ｂｏｔｔｏｍｌｅｙ ＭＪ， Ｗｅｓｔｗｅｌｌ Ｓ， ｅｔ ａｌ．Ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉ－ａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｍＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｍｉｎｉｍａｌ ｃｈａｎｇｅ， ｍｅｍｂｒａ－ｎｏｕｓ， ａｎｄ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ ｂｙ ｎｏｎ－ｉｓｏｔｏｐｉｃ ｉｎｓ ｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ［Ｊ］． Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐａｔｈｏｌ， １９９９， ５２：７３５一７３８．［７］ Ｗａｓａｄａ Ｔ， Ｋａｗａｈａｒａ Ｒ， Ｋａｔｓｕｍｏｒｉ Ｋ， ｅｔ ａｌ． Ｐｌａｓｍａ ｃｏｎｃｅｎ－ｔ ｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｅ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｔｏ ｓｍｏｋｉｎｇ ［Ｊ］． Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ， １９９８， ４７：２７．［８１Ｈｏｒ ｉｔａ Ｙ， Ｍｉｙａｚａｋｉ Ｍ， Ｋｏｊｉ Ｔ， ｅｔ ａｌ． Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔ ｈ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｏｖｅｒｌｏａｄ ｎｅ－「 ｐｈｒ ｏｓｉｓ ［Ｊ］， Ｎｅｐｈｒｏｌ Ｄｉａｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ， １９９８， １３：２５１９．［９］Ｎｉ ｔｔａ Ｋ， Ｕｃｈｉｄａ Ｋ， Ｋｉｍａｔａ Ｎ， ｅｔ ａｌ． Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆｖａｓ ｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｒｅｓｃｅｎｔｉｃ ｇｌｏｍｅｒｕ－ｌ ｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ ［Ｊ］． Ｃｌｉｎ Ｎｅｐｈｒｏｌ， １９９９， ５２（２） ：７６一８２．［１０〕胡可斌，刘志红，刘栋，等．雷公藤内醋醇对内皮细胞血管内皮细胞生长因子活性的影响〔 Ｊ］．肾脏病与透析肾移植杂志，２０００， ９（３）：２２９一２３３． ［１１］ Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ Ｋ， Ｋａｎｍａｔｓｕｓｅ Ｋ． Ｅｌｅｖａｔｅｄ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒ ｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｕｒｉｎｅ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｉｎｉｍａｌ－ｃｈａｎｇｅｎｅ ｐｈｒｉｔｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ［Ｊ］． Ｃｌｉｎ Ｎｅｐｈｒｏｌ， ２００１，５５（４）：２６９一２７４．（编辑 邱芬）
