牛磺酸含量测定方法

来源：年旅网

牛磺酸含量测定方法 1.牛磺酸提取

1.1前期处理

将原料洗净，称取 50g，按 1∶3 加入蒸馏水，匀浆并调pH为5.5。 1.2自溶

匀浆液于 55 ℃的水浴锅内，调 pH5.5，放置 22 ~24h。 1.3提取

匀浆液置于 80 ℃的水浴锅内，加热。提取 50 min，四层细纱布过滤。

1.4除蛋白

将提取液浓缩后用 1∶1 的盐酸调节 pH3.5～4.0，4500 r/min 离心 15 min，除酸性蛋白；再用 5 mol/L 的氢氧化钠调节 pH 至 8.5～9.0，4500r/min离心20min去除碱性蛋白。 1.5 脱色浓缩

每100ml加入2~3g活性炭脱色，过滤。旋转蒸发仪浓缩到50ml，调pH到4.5，待纯化后测定。

2.纯化及牛磺酸含量测定

2.1离子交换柱的制备

将树脂研磨,置于烧杯中蒸馏水反复冲洗; 2. 0mol·L - 1NaOH 溶液浸泡24 h, 用蒸馏水洗至中性; 2. 0 mol·L - 1 HCl溶液浸泡24 h, 再用蒸馏水洗至中性, 4℃保存备用。测定样品前,用玻璃棉塞住自制离子交换柱小口, 树脂填充高度为4 cm, 除去管中气泡后, 再用玻璃棉塞住大口待用。 2. 2显色剂配置

1. 0 mol·L - 1的醋酸钠溶液10. 0 mL, 加入0. 4 mL乙酰丙酮, 再加入1. 0 mL甲醛, 加蒸馏水稀释至25. 0 mL, 当日配用。 3.含量测定

吸取10 mL置于阳离子树脂交换柱, 用蒸馏水洗脱, 每次5 mL , 共3次。收集此溶液25mL , 再从中取2 mL溶液加入1 mL显色剂, 100℃水浴中加热15 min , 冷却至室温, 于400 nm波长下测定吸光度可确定牛磺酸的含量。

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