几种常用的免疫细胞

几种常用的免疫细胞

概念

自体免疫细胞治疗技术是指从自体外周血中分离的单个核细胞经过体外激活和扩增后输入患者体内，直接杀伤肿瘤细胞或病毒感染细胞，或调节和增强机体的免疫功能。

免疫细胞分类

自身免疫细胞疗法包括mDC疗法、DC-CIK疗法、NK疗法、mDC疗法、mCTL疗法、EBV-CTL和CAR-T疗法等。

几种常用的免疫疗法

1、DC-CIK疗法

树突状细胞(dendritic cells，DCs)是机体功能最强的专职抗原递呈细胞(Antigen presenting cells, APC)，它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原，未成熟DC具有较强的迁移能力，成熟DC能有效激活初始型T细胞，处于启动、、并维持免疫应答的中心环节。

DC细胞可以单独回输治疗，通过体外负载肿瘤抗原并扩增达到一定数量后回输给病人，可诱导机体产生强烈的抗肿瘤免疫反应。

DC细胞也可与CIK细胞联合回输，杀伤肿瘤细胞。在肿瘤免疫中，DC不能直接杀伤肿瘤细胞，但能通过识别肿瘤细胞特异性抗原，诱导产生大量效应T细胞激活并迁移至肿瘤部位，将其信号呈递给具杀伤效应的T细胞来达到监测、杀灭肿瘤的功能。

CIK细胞即细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine activated killer cells)，是一种细胞因子诱导的杀伤性T细胞，具有非特异性杀伤肿瘤细胞的作用。通过释放颗粒酶、穿孔素及Fas/FasL途径来杀伤肿瘤细胞，同时CIK细胞分泌IL-2、IL-6、IFN-γ等多种抗肿瘤的细胞因子。

CIK细胞的分离培养：在体外条件下，人体外周血单个核细胞(PBMC)经过多种细胞因子(如IFN-γ, IL-1, IL-2, anti-CD3 mAb)的共同刺激后诱导成为一群异质细胞，它具有非性杀瘤的优点。其主要效应细胞表面既有T细胞的表面标志(TCR-α/β，CD3)，也

有NK细胞的表面标志(CD56)。

2、NK疗法

NK细胞即自然杀伤细胞，占人体外周血的5%-10%，它是人体防御体系的第一道屏障。它通常处于休眠状态，一旦被激活，它们会渗透到大多数组织中攻击肿瘤细胞和病毒感染细胞。NK细胞是人体先天免疫的核心组成部分，是肿瘤细胞免疫的基础。

由于NK细胞的杀伤活性无MHC，不依赖抗体，因此称为自然杀伤活性。NK细胞作用于癌细胞后杀伤效果出现早，在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。同时NK细胞弥补了细胞毒性T淋巴细胞在杀伤肿瘤细胞时必须识别MHC-I类分子，而无法杀伤此类分子阴性的肿瘤细胞的缺陷。

人类NK细胞为CD56和CD16阳性，CD3、CD4和CD19为阴性。少部分NK细胞可以为CD8阳性。NK细胞对肿瘤的杀伤优势表现为直接溶解和分泌细胞因子两个方面，NK细胞可以产生TNF-α、IFN-γ和IL-1，这些细胞因子在NK细胞抗癌反应中有十分重要地位。

免疫细胞适用范围及副作用

因DC-CIK、NK细胞发挥识别和杀伤肿瘤细胞的功能不受MHC等因素，因此有广谱抗肿瘤作用，临床可应用于多种肿瘤不同阶段的治疗。

呼吸系统:肺癌(小细胞肺癌、鳞癌、腺癌)等;

消化系统:肝癌、胃癌、肠癌等;

泌尿系统:肾癌、肾上腺癌及其转移癌等;

血液系统:急慢性白血病、淋巴癌(除T细胞淋巴癌)及其转移癌等;

其他肿瘤:恶性黑色素瘤、鼻咽瘤、乳腺癌、前列腺癌、舌癌等;

还包括肿瘤转移，以及恶性胸水、恶性腹水等治疗。

自体细胞回输后副作用普遍较小，个别病人会出现发烧、战栗、抽搐、出汗等症状，但对症下药后均可在数小时内恢复正常。

免疫细胞治疗的禁忌症

• 孕妇或者正在哺乳的妇女;

• T细胞淋巴瘤患者;

• 不可控制的严重感染患者;

• 对IL-2等生物制品过敏的患者;

• 艾滋病患者;

• 正在进行全身放疗、化疗的患者;

• 晚期肿瘤造成的恶病质、外周血象过低患者;

• 器官功能衰竭者;

• 脏器移植者;

• 长期使用或正在使用免疫抑制剂的患者。

随着肿瘤免疫学理论和技术的发展，免疫治疗在肿瘤治疗中的作用日益受到重视。T淋巴细胞在肿瘤免疫应答中起主要作用，包括CIK细胞治疗在内的T细胞过继性细胞免疫治疗虽然在部分肿瘤中取得了一些不明确的效果，但在大多数肿瘤中无明显疗效。近年来发展的利用基因改造技术表达肿瘤特异性嵌合抗原受体(Chimeric antigen receptor，Car)的T细胞显示出的靶向性、杀伤活性和持久性为过继性细胞免疫治疗注入了新的活力。

3、CAR-T细胞

CAR-T，全称是Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy Car-T 是将识别肿瘤相关抗原(TAA)的单链抗体(scFv)和T细胞的活化序列在体外进行基因重组，形成重组质粒，通过转染技术，在体外转染，纯化和大规模扩增经过基因改造和修饰后的T细胞，称之为CarT细胞。CarT在体外及体内都对特定肿瘤抗原具有高度亲和性，CarT在体内能够迅速扩增，及对抗原负荷肿瘤细胞具有高效选择性杀伤作用。

CAR-T治疗流程：第一步，从癌症病人身上分离免疫T细胞。第二步、利用基因工程技术给T细胞加入一个能识别肿瘤细胞，并且同时激活T细胞杀死肿瘤细胞的嵌合抗体，T细胞变身CAR-T细胞，靶向杀死癌细胞。第三步、体外培养，大量扩增CAR-T细胞，一般一个病人需要几十亿，乃至上百亿个CAR-T细胞。第四步、把扩增好的CAR-T细胞输回病人体内杀死癌细胞。第五步：严密监护病人，尤其是控制前几天身体的剧烈反应。

CART技术已经发展到第三代，第二代除添加T细胞刺激因子CD3外，还串联添加了

共刺激因子如CD28、OX40、4-1BB，刺激T细胞增殖，第三代在一个共刺激因子的基础上再串联一个共刺激因子，即两个共刺激因子，更加有效地促进T细胞的活化增殖。

CAR-T现状

一代、二代CAR-T技术从理论上来讲是已经相对成熟了，欧美也已经应用于临床试验，副作用的问题，如果只是常规的反应较小的副作用，应该是没什么大问题，大一点的副作用，如细胞因子风暴，目前应该是尚无很好的解决办法。

由于CAR-T技术涉及到转基因技术，西方国家是可以应用于临床的，但中国卫计委目前还不允许转基因技术应用于人体，即使目前国内某些医院或公司已经在开展该技术，基本上都是违规的。

CAR-T细胞比其他T细胞的治疗方式存在以下优势：

• 使用患者自体细胞，降低排异反应风险;

• 鉴于很多肿瘤细胞表达相同的肿瘤抗原，针对某一种肿瘤抗原的CAR基因构建一旦完成，便可以被广泛利用治疗多种肿瘤;

• Car-T既可以识别肿瘤蛋白质抗原，又可识别糖脂类非蛋白质抗原，扩大了肿瘤抗原靶点范围;

• Car-T细胞作用过程不受白细胞相关抗原系统（MHC）的;

• Car-T细胞具有免疫记忆功能，可以长期在体内存活。

CAR-T的副作用：

CAR-T也不是完美的，病人接受CAR-T疗法有一个巨大的临床风险：细胞因子风暴，也叫细胞因子释放综合征。产生的原因是T细胞在杀死其它细胞，比如细菌病毒的时候会释放很多蛋白，叫细胞因子，它们的作用是激活更多的免疫细胞来一起对抗这些病原体，这种正反馈机制保证了对病原体的快速清除。这在临床上就是炎症反应，平时我们扁桃体发炎啥就和这个有关。由于CAR-T杀癌细胞实在是太快太有效了，于是在瞬间在局部产生超大量的细胞因子，引起惊人的免疫反应，这就是细胞因子风暴。临床表现就是病人超高烧不退，如果不控制好，很有可能就救不过来了。这就是为什么我说CAR-T的最后一步是严密监护病人，这其实非常关键。