固相萃取简介

固相萃取（Solid-Phase Extraction，简称SPE）是近年发展起来一种样品预处理技术，由液固萃取和柱液相色谱技术相结合发展而来，主要用于样品的分离、纯化和浓缩，与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率，更有效的将分析物与干扰组分分离，减少样品预处理过程，操作简单、省时、省力。广泛的应用在医药、食品、环境、商检、化工等领域。

原理：SPE是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在SPE过程中，固相对分析物的吸附力大于样品母液，当样品通过SPE柱时，分析物被吸附在固体表面，其他组分则随样品母液通过柱子，最后用适当的溶剂将分析物脱下来。利用被测样品中的化合物与背景杂质在SEP柱不同填料中的分配系数差异，匹配相应的洗脱溶剂，将化合物和杂质分离。

固相萃取(SPE)是一种用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术,它建立在传统的液-液萃取(LLE) 基础之上,结合物质相互作用的相似相溶机理和目前广泛应用的HPLC、 GC中的固定相基本知识逐渐发展起来的。SPE具有有机溶剂用量少、便捷、安全、高效等特点。 SPE根据其相似相溶机理可分为四种:反相SPE、正相SPE、离子交换SPE、吸附SPE。

SPE大多数用来处理液体样品,萃取、浓缩和净化其中的半挥发性和不挥发性化合物,也可用于固体样品,但必须先处理成液体。用途： 1、 被测样品 的富集 2、 除去干扰的杂质 3、改变被测样品的基体，使其适合分析时的需要。目前国内主要应用在水中多环芳烃(PAHs) 和多氯联苯(PCBs)等有机物质分析,水果、蔬菜及食品中农药和除草剂残留分析,抗生素分析,临床药物分析等方面。

SPE装置由SPE小柱和辅件构成。SPE小柱由三部分组成, 医用聚丙烯柱管、烧结垫（多孔聚丙烯筛板）和填料（多为40-60μm，80-100μm）。常见规格：实际中常用的是100mg/1ml,200mg/3ml,500mg/3ml,1g/6ml等。以100mg/1ml为例，其中100 mg为填料的质量，1ml是空柱管的体积。为避免交叉污染，保证检测可靠性，SPE柱通常是一次性使用的。SPE辅件一般有真空系统、真空泵、吹干装置、惰性气源、大容量采样器和缓冲瓶。

固相萃取

前处理技术比较 小结

SPE（固相萃取法）：较通用 LLE（液液萃取法）：水油两相

PPT（蛋白沉淀法）：蛋白质较多的样品，医药

SPME（固相微萃取法）：半挥发-挥发性样品，多与GC或LC联用

GPC（凝胶渗透法）：去除大分子杂质（油脂，大分子色素），分离复杂蛋白混合

物或水溶性聚合物

ASE（快速溶剂萃取法）：加速溶剂萃取 SFE(超临界萃取) TLC：层析色谱 Flash：快速纯化色谱

一、什么是 SPE？

* 固体 Solid(S)，状态或相 Phase(P)，萃取 Extraction(E) * 样品在分析前的预处理 * 基于液相色谱原理 * 将被分析物与杂质分开 * 浓缩样品 二、为什么用 SPE？

* 从基质中消除干扰物 * 保护色谱柱

* 减少样品与溶剂使用量 * 缩短处理时间 * 提高回收率

三：固相萃取小柱构造

四、分离原理

* 保留被分析物，洗脱污染物 * 保留污染物，洗脱被分析物

类型一：保留目标物

类型二:保留杂质

五、操作步骤中影响萃取效率的因素

活化：干；

上样：流速过快；溶剂强度过大 淋洗：吹干

洗脱：流速过快；洗脱溶剂强度不够

六、固相萃取使用要点

1、准确了解样品物理及化学特性 2、选择合适的样品净化机理： 3、选择适当的 SPE 产品 * 填料类型、柱容量、配套附件

4、选择老化及洗脱溶剂

七、应用 C18

主要用于反相萃取，适合于非极性到中等极性的化合物，如抗菌素、巴比妥酸盐、酞嗪、咖啡因、药物、染料、芳香油、脂溶性维生素、杀真菌剂、除草剂、环境农药、PAH和PCB残留、食品添加剂、碳水化合物、对羟基甲苯酸取代脂、苯酚、邻苯二甲酸酯、类固醇、表活化剂、茶碱、水溶性维生素… C8

比C18的非极性吸附更弱些。 C2

相对于C18和C8，因为短链，保持作用小得多，适合非极性化合物。

硅胶Silica

极性化合物萃取，如乙醇、醛、胺、药物、染料、除草剂、农药、酮、含氮化合物、有机酸、苯酚、类固醇…

苯基Phenyl

相对于C18和C8，吸附更弱，适合于非极性到中等极性的化合物，尤其是苯系物。

氰基Cyano-cn

反相萃取：适合于中等极性化合物，正相萃取：适合极性化合物，如黄曲霉毒素、抗菌素、染料、除草剂、苯酚、类固醇，弱阳离子交换萃取：适合碳水化合物、阳离子化合物…

氨基Amino-NH2

正相萃取：适合于极性化合物，弱阴离子交换萃取：适合碳水化合物、弱性阴离子和有机酸化合物…

酸性氧化铝Alumina A

PH~5极性化合物离子交换和吸附萃取，如维生素…

碱性氧化铝Alumina B

PH~8.5阳离子交换和吸附萃取

中性氧化铝Alumina N-neutral

PH~6.5，极性化合物吸附萃取，调节PH，阳和阴离子交换，适合维生素、抗菌素、芳香油、酶、糖苷、激素…

硅酸镁Florisil

极性化合物的吸附萃取，如乙醇、醛、胺、药物、染料、除草剂、农药、PCBs、含氮化合物、有机酸、苯酚、类固醇…

强阴离子交换SAX

适合阴离子、有机酸、核酸、核苷酸、表面活性剂，容量：0.2毫当量/克

强阳离子交换SCX

适合阳离子、抗菌素、有机碱、氨基酸、儿茶酚胺、除草剂、核酸碱、核苷、表面活化剂，容量：0.2毫当量/克