油脂TBA值的测定方法

油脂TBA值的测定方法

⒈ 原理：

油脂受到光、热、空气中氧的作用，发生酸败反应，分解出醛、酸之类的化合物。丙二醛就是分解产物的一种，它能与TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉红色化合物，在538nm波长处有吸收高峰，利用此性质即能测出丙二醛含量，从而推导出油脂酸败的程度。

⒉ 试剂：

TBA水溶液：准确称取TBA0.288g溶于水中，并稀释至100ml（如TBA不易溶解，可加热至全溶澄清，然后稀释至100ml），相当于0.02M；

三氯乙酸混合液：准确称取三氯乙酸（分析纯）7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀释至100ml；

氯仿（分析纯）；

丙二醛标准溶液：称取0.315g 1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀释至1000ml，此溶液每ml相当于丙二醛100ug，置于冰箱内保存。准确吸取10ml，稀释至100ml，此溶液每ml相当于丙二醛10ug，备用。

⒊ 操作步骤：

⑴标准曲线的绘制

准确吸取每相当于丙二醛10ug的标准溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于纳氏比色管中，加水至总体积为5ml，加入5mlTBA溶液，然后按样品测定步骤进行，测得光密度绘制标准曲线。

⑵样品测定：

准确称取融化均匀的油脂样品5-10g，置于100ml有盖三角瓶内，加入25ml三氯乙酸混合液，振摇半小时（保持油脂融溶状态，如冷结即在70℃水浴上略微加热使之融化后继续振摇）用双层滤纸过滤，除去油脂。滤液重复用双层滤纸过滤一次。

准确移取上述滤液5ml置于25ml比色管内，加入5mlTBA溶液，混匀，加塞，置于90℃水浴内保温40min，取出，冷却1h，移入小试管内，离心5min，上清液倾入25ml纳氏比色管中，加入5ml氯仿，摇匀，静置，分层，吸出上清液于532nm波长比色，对照标准曲线得到微克数（同时做空白试验）。

⒋ 计算

C20丙二醛含量（mg/kg）=5m

式中：C——从标准曲线查得丙二醛的微克数（ug）

m——样品质量（g）

A532（V1V2）V1000mV1光密度：TBA（A532/kg）=

式中：V——油脂用三氯乙酸定容体积，ml

V1——取滤液体积，ml

V2——加TBA体积，ml